乙醇对原代培养大鼠海马神经元形态及细胞活性的影响

发布时间：2017-11-15 14:04

  本文关键词：乙醇对原代培养大鼠海马神经元形态及细胞活性的影响

  更多相关文章： 乙醇 大鼠海马神经元 形态学 细胞活性

【摘要】：背景与目的:现如今,“酒”已经成为人们日常生活中必不可少的一种“饮料”,甚至发展成为一种文化。酒其主要成分是乙醇,而乙醇是一种在体内可自由扩散且氧化、代谢缓慢的物质,对人体许多系统脏器均有损伤作用,且能轻易地通过血脑屏障,导致大脑中枢神经系统的损伤。在我国,由于人们生活水平的不断提高,并受我国传统饮酒文化的影响,以及“酒”在社会人际交流中的作用,乙醇滥用、乙醇中毒现象呈增长趋势,并呈现年轻化趋势。而在中枢神经系统中,海马神经元对乙醇损伤的敏感性比较高,可引起海马神经元结构和功能的改变,造成学习记忆认知功能的损害。本研究主要是通过体外培养原代大鼠海马神经元,观察在不同浓度乙醇的作用下,其形态学和细胞活性发生的变化,为进一步探究乙醇对神经元损伤的作用机制提供一定的依据。方法:从实验室饲养的24h出生的SD大鼠乳鼠,分离出海马神经元,在体外无血清培养至第7天,经NSE免疫细胞化学染色鉴定海马神经元的纯度。将培养好的海马神经元随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和对照组,在培养液中加入无水乙醇,使培养液中乙醇的终浓度分别为11mM,33mM,66mM,对照组在培养液中加入等量生理盐水,在二氧化碳培养箱共同培养1h、12h、24h。然后通过免疫细胞化学染色观察不同浓度不同作用时间干预下海马神经元的形态学变化,用CCK-8试剂盒检测海马神经元活性的变化。结果:1.不同浓度不同作用时间乙醇干预下海马神经元的形态学变化:低剂量组加入11mM乙醇,各时间段细胞形态未发生明显改变,胞浆和突起着色的深浅未发生明显变化,神经元的特征与正常对照组基本相同。中剂量组加入33mM乙醇,作用1h后极个别细胞的边缘变得模糊不清,细胞未出现明显的聚集现象,细胞突起数量减少不明显。作用12h后细胞开始出现聚集现象,呈簇状,可见神经胶质细胞开始增殖。作用24h后可见细胞密度明显降低,细胞之间的突触连接减少,每个细胞的突起数量减少,但仍可见稀疏的神经网络。高剂量组加入66mM乙醇,作用1h后细胞的突起长度变短,突起数量变少。作用12h后细胞簇状聚集现象明显,神经胶质细胞增殖大量增殖。作用24h后细胞大量死亡,细胞密度极低,细胞的突起变短,细胞间的突触连接极少,几乎不能形成神经网络。2.不同浓度不同作用时间乙醇干预下海马神经元的活性变化:不同浓度乙醇对海马神经元细胞活性的影响与对照组相比有明显的变化,细胞活性在不同作用时间均有下降,活性改变的程度与乙醇作用浓度呈剂量依赖关系,尤其是高浓度组对海马神经元活性的改变更为明显。相同浓度乙醇在不同的作用时间对海马神经元的活性的影响与对照组相比差异有统计学意义。结论:1.采用阴道涂片法和循环交配法相结合的方法,成功获取精确妊娠孕鼠和P0期乳鼠,简化动物繁殖过程,保证实验中乳鼠的供给。2.中、高剂量的乙醇会造成原代培养大鼠海马神经元的胞体损伤,细胞间的突触连接减少,突起长度变短,突起数量减少,且与作用时间相关联。3.不同浓度的乙醇能够引起原代培养大鼠海马神经元活性的降低,与乙醇浓度呈剂量依赖性关系,且与作用时间有关。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：D919

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 翁默;海马神经元的集群放电活动与关联性学习过程的实时对应[J];生理科学进展;2004年01期

2 ;我校基础部章卫平课题组发现调控海马神经元发育的新机制[J];第二军医大学学报;2010年04期

3 朱辉;;新生海马神经元的功能与成熟神经元相同[J];国外医学情报;2003年12期

4 李林芳;张永健;吴洋;苗庆峰;胡会青;孟静;;双苯氟嗪对铅致海马神经元损伤的保护作用[J];中国公共卫生;2006年11期

5 陈志勇;王玲;潘振伟;孙丽华;张高小;潘国聘;吕延杰;杨宝峰;;三氧化二砷对海马神经元细胞内钙离子浓度的影响[J];哈尔滨医科大学学报;2007年01期

6 秦锦标;周红;郑秀琴;;氟西汀对海马神经元生长的影响[J];现代医学;2007年04期

7 苗庆峰;张伟;薛健梅;陈雪彦;张永健;;Aβ_(25～35)对海马神经元的损伤及双苯氟嗪的保护作用[J];中国老年学杂志;2008年22期

8 汤欣;陈益人;周松林;丁斐;;神经再生素促大鼠海马神经元生长的研究[J];解剖学报;2008年01期

9 吴洋;张永健;苗庆峰;薛健梅;高霄飞;;双苯氟嗪对谷氨酸致海马神经元损伤的保护作用[J];宁夏医科大学学报;2009年01期

10 鄂晓;姜爽;张英鸽;;海马神经元之间膜性连接的初步研究[J];军事医学科学院院刊;2010年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 刘蓓蓓;潘昊;陈娣;谢学猛;杨光田;;外源性硫化氢对大鼠海马神经元氧糖缺失/恢复损伤的作用[A];中华医学会急诊医学分会第十六次全国急诊医学学术年会论文集[C];2013年

2 周敏;崔越;周静文;黄子芮;谢远龙;;海马神经元钙离子通道的研究进展[A];2011全国老年痴呆与衰老相关疾病学术会议第三届山东省神经内科医师（学术）论坛论文汇编[C];2011年

3 刘卫;郭华;郑建全;刘振伟;刘传缋;;苯环壬酯对烟碱诱发海马神经元兴奋性突触后电流的抑制作用[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];2002年

4 刘卫;郭华;郑建全;刘振伟;刘传缋;;苯环壬酯对烟碱诱发海马神经元兴奋性突触后电流的抑制作用[A];中国药理学会第八次全国代表大会论文摘要集（第二部分）[C];2002年

5 蒋霞;朱传凤;江雅新;孙岚;张英鸽;;海马神经元的原子力显微成像[A];全国第七届扫描隧道显微学学术会议（STM'7）论文集（一）[C];2002年

6 叶伟;裘燕;刘富鑫;钟伟霞;罗建红;;咪唑安定对小鼠海马神经元放电模式的影响[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年

7 石素琴;蔡志平;霍东升;石岩;贾建新;;海马神经元的扫描电镜观察[A];科技创新与经济结构调整——第七届内蒙古自治区自然科学学术年会优秀论文集[C];2012年

8 蔡志平;霍东升;石素琴;李朝晖;贾建新;方刚;张明;;新生大鼠海马神经元的体外培养[A];科技创新与经济结构调整——第七届内蒙古自治区自然科学学术年会优秀论文集[C];2012年

9 张明;蒋莉;郭艺;;大鼠海马神经元无血清原代培养及膜电位测定[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

10 胡祁生;陈静芳;王勇;汤剑青;万曙霞;魏劲波;;川芎嗪对海马神经元电活动的调制作用[A];中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议论文摘要汇编[C];2002年

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 ;海马神经元损伤及保护的纳米级三维构像变化研究[N];中国医药报;2003年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 张玮;大鼠脑缺血—再灌注损伤时SGK1信号途径在海马神经元保护的机制研究[D];昆明医科大学;2015年

2 张静;氧糖剥夺后海马神经元中AP4M1表达变化及其对AMPA受体运输的调控作用[D];郑州大学;2014年

3 陈谦峰;固本健脑法对AD细胞模型的作用及Caveolin-1、P-tau影响的研究[D];湖北中医药大学;2015年

4 陈静;缺血后适应对树，

本文编号：1190023