毛细管电泳技术在酶分析及毒品灵敏检测中的应用研究

发布时间：2017-12-09 11:00

本文关键词：毛细管电泳技术在酶分析及毒品灵敏检测中的应用研究

【摘要】：由于分离效率高,分析速度快,试剂与样品消耗量少,并且可以与多种检测手段连用等独特优点,毛细管电泳技术(CE)已经逐渐发展成为酶分析的重要工具,并广泛应用于几乎所有酶分析的研究领域。另一方面,由于CE操作简单,成本低廉,高效快速且实用性强,近年来在毒品的痕量检测方面受到越来越广泛的关注。本论文中,作者开展了CE在以上两个领域的应用研究。论文第一部分工作针对丙氨酸消旋酶(Ala R)的催化消旋反应,建立一个基于连续自动进样-胶束电动色谱技术的新型在线酶分析方法。利用穿过样品池的两根相隔5?m的毛细管,依据氨基酸的柱上快速衍生扩散,通过自动控制分离电压的开关,实现了准确的在线连续进样及分析;同时,利用胶束电动色谱实现了酶反应过程中的手性丙氨酸对映体(底物和产物)的高效分离和灵敏监测。利用该方法分别测定了D-Ala→L-Ala和L-Ala→D-Ala反应的米氏常数。该工作推进了CE在线酶分析的研究,为高效、准确检测酶活性和酶反应动力学研究提供了新方法。此外,实验中获得的酶活性和酶反应动力学信息,对了解Ala R的代谢功能以及临床诊断和应用具有重要意义。论文第二部分工作旨在发展基于毛细管电泳技术的先进分离分析方法,针对毒品进行有效、快速、准确的分析检测,对于涉毒等相关犯罪活动的防范与侦破提供科学依据。实验通过结合毛细管电泳分析与场放大进样(FASI)和固相萃取(SPE)的优势,提高了毒品检测的灵敏度。实验室自制的毛细管固相萃取柱实现了微量毒品的有效富集与净化,富集后的分析物洗脱液再通过毛细管电泳场放大进样,进一步富集并分离与检测。实验中以C18萃取剂填充到已拉伸尖端的毛细管中作为固相萃取柱,以两种常见毒品麻黄碱和甲基安非他明为分析对象,考察该分析方法的可行性与富集效果。
【学位授予单位】：东北师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：O658.9;D918.9

【参考文献】

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