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一种快速聚合酶链式反应方法的探究和法医学应用

发布时间:2017-12-16 02:18

  本文关键词:一种快速聚合酶链式反应方法的探究和法医学应用


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【摘要】:目的优化和建立一套快速聚合酶链式反应(PCR)扩增体系和程序,缩短扩增时间,提高短串联重复序列分型的速率和办案效率。方法运用AmpFLSTR?Identifiler?Plus试剂盒和7种快速扩增酶进行筛选和优化,最后对筛选出的酶优化其扩增体系和扩增程序,并对几种常规检材中提取的DNA进行扩增和检测,然后对其分型结果进行验证和讨论。结果最终优化的扩增程序由常规的3 h左右缩短至24 min,DNA检验结果与常规方法一致。结论应用优化后的快速PCR扩增体系可以成功准确扩增DNA样本,显著提高DNA分型速率。
【作者单位】: 南方医科大学基础医学院法医学系;公安部物证鉴定中心 北京市现场物证检验工程技术研究中心 法医遗传学公安部重点实验室;郑州大学基础医学院遗传学实验室;
【基金】:国家自然科学基金(81202384) 中央公益类基本科研业务费(2012JB012)
【分类号】:D919
【正文快照】: 生物物证的DNA检验在公安办案实践中发挥着举足轻重的作用,案(事)件尤其是一些大要案往往要求在极短时间甚至在现场就提供检验结果,为案(事)件的快速处置、侦查诉讼等提供及时的线索和证据。目前,生物物证常规检测步骤包括DNA提取、定量、复合短串联重复序列(short tandem rep

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 韩俊萍;李彩霞;严红;朱典;李艮平;胡兰;;低体积PCR扩增用于单细胞分离和检验[J];法医学杂志;2012年02期

2 杨文超;张晓东;;快速PCR研究进展[J];中国生物工程杂志;2007年04期

3 张明阳;单海燕;徐冬冬;丁梅;王保捷;庞灏;周勤虎;冯春梅;;PCR-SSCP技术分析线粒体DNA多态性及其法医学应用[J];中国医科大学学报;2011年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 谈忠鸣;鲍昌俊;潘红星;顾玲;周璐;钱慧敏;董晨;汤奋扬;;快速PCR检测猪链球菌2型方法的研究及应用[J];江苏预防医学;2012年06期

2 陈曹鑫;何晓辉;秦正红;王进;;Taq RecA蛋白的克隆表达及其在SNP基因分型中的应用[J];苏州大学学报(医学版);2012年02期

3 董军磊;欧元;李彩霞;刘琳;戈文东;郭磊;姜伯伟;赵兴春;叶健;;快速STR分型在法医DNA分析中的应用研究进展[J];生命科学研究;2013年04期

4 刘琳;郝晓明;董会;欧元;赵兴春;叶健;;AmpFlSTR~汶 Identifiler~汶 Plus试剂盒快速直接PCR扩增初探[J];中国司法鉴定;2014年01期

5 魏福军;张建;王天华;贾世友;伊莎莎;郭玉秋;;口腔细胞采集卡DNA分型快速检验模式的建立[J];生命科学仪器;2014年04期

6 蒋超;侯静怡;黄璐琦;袁媛;陈敏;金艳;;快速PCR方法在金银花真伪鉴别中的应用[J];中国中药杂志;2014年19期

7 陈康;蒋超;袁媛;黄璐琦;李曼;;快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用[J];中国中药杂志;2014年19期

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 法塞;特发性低促性腺激素性腺功能减退症及严重性腺功能减退的中国患者GnRHR基因分子缺陷[D];华中科技大学;2013年

2 法塞(Aws Khalid Fathi);特发性低促性腺激素性腺功能减退症及严重性腺功能减退的中国患者GnRHR基因分子缺陷[D];华中科技大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前2条

1 杨丽花;链球菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠埃希菌多重PCR诊断方法的建立[D];西北农林科技大学;2011年

2 汪艳;拉祜族人群PARL基因Leu262Val多态性与糖代谢异常的相关性研究及其与汉族人群的比较[D];昆明医科大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 翟仙敦;尹慧;黄代新;杨庆恩;;mtDNA异质性及其法医学应用[J];法律与医学杂志;2006年02期

2 李鑫;胡兰;郭红玲;刘志芳;Q谜,

本文编号:1294327


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