小黄瓜包装与物流保鲜技术及冷害机理研究
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【摘要】:水果小黄瓜又名袖珍黄瓜、小黄瓜,果实组织比普通黄瓜幼嫩,它兼有水果与蔬菜的食用特性,深受消费者欢迎。但小黄瓜皮薄,易失水,果实采后品质容易劣变,难以保鲜,在常温条件下,采后1 d~2 d即开始萎蔫,而贮运温度过低又易出现冷害,难以远距离运销。本试验主要研究新型包装材料、冷藏、预冷技术及物流技术等黄瓜保鲜技术,并针对小黄瓜在贮运过程容易发生冷害的实际问题,探讨小黄瓜冷害发生过程中相关基因表达模式及相互作用。主要研究结果如下:1.在11°C条件下,微孔防雾袋、PE袋密封包装适用于小黄瓜保鲜,可将小黄瓜保鲜20 d以上。小黄瓜在7°C下贮藏容易发生冷害,在7°C下贮藏10 d~12 d后转移到常温,果实出现水渍斑冷害症状,随着小黄瓜在冷害低温下贮藏时间延长,冷害症状加重,出现凹陷、腐烂、果心褐变、味道变苦、呼吸速率和乙烯释放量显著增加。2.预冷结合低温运输能有效保持小黄瓜的品质。小黄瓜在低温(13°C)条件下运输,其外观品质、硬度、维生素C含量等指标优于常温运输。预冷(13°C)结合低温运输(13°C)能有效保持小黄瓜的果肉硬度、果皮绿色和维生素C含量。在低温运输条件下,预冷结合纸箱包装处理的小黄瓜果肉硬度、外观品质、维生素C含量均显著优于不预冷处理。常温运输的各处理中,预冷结合泡沫箱包装处理的小黄瓜的果肉硬度、维生素C含量较高,常温运输时间超过2 d,果实容易产生异味;预冷后采用纸箱或泡沫箱密封包装能有效延长小黄瓜常温物流的保鲜时间,但常温运输时间不宜超过2 d。3.克隆了黄瓜MAPKs、WRKYs、BADH、P5CS等11个冷害相关基因的cDNA全长序列,分别命名为MAPK1、MAPK4-1、MAPK4-2、MAPK6、MAPK7、MAPK9-3、MAPK13、MAPK19、MAPK20-2、BADH、P5CS(已提交到GenBank,登录号分别为KM925149、KM925155、KM925150、KM925156、KM925151、KM925153、KM925154、KM925152、KM925157、KP645172、KP645173)。4.实时荧光定量试验结果表明,大部分MAPKs、WRKYs以及P5CS、BADH都响应低温胁迫而上调表达,并且部分MAPKs、WRKYs对低温胁迫可能存在应激性。5.酵母双杂交试验结果表明,WRKY2和WRKY23是MAPK7的互作蛋白。
【关键词】:水果小黄瓜 包装 低温贮藏 物流 冷害
【学位授予单位】:华南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S642.2
【目录】:
- 摘要3-4
- Abstract4-6
- 本文缩略词及中英文对照6-12
- 1 前言12-19
- 1.1 研究目的及意义12-13
- 1.2 国内外保鲜技术研究现状和发展趋势13-15
- 1.2.1 果蔬保鲜技术研究进展13
- 1.2.2 低温贮藏和预冷技术在果蔬保鲜上的应用13-14
- 1.2.3 薄膜包装在果蔬保鲜上的应用14-15
- 1.3 果蔬采后冷害及相关基因机理的研究进展15-19
- 1.4 研究内容19
- 2 材料与方法19-42
- 2.1 供试材料19
- 2.2 试验处理和取样方法19-20
- 2.2.1 小黄瓜低温贮藏的保鲜效果19-20
- 2.2.2 小黄瓜低温贮藏结合包装的保鲜效果20
- 2.2.3 预冷及包装对小黄瓜物流的保鲜效果20
- 2.2.4 小黄瓜采后冷害生理生化变化20
- 2.3 小黄瓜表型观察和生理指标测定方法20-26
- 2.3.1 小黄瓜外观品质分级20-21
- 2.3.2 小黄瓜商品率计算方法21
- 2.3.3 小黄瓜冷害指数分级21-22
- 2.3.4 小黄瓜果肉硬度的测定22
- 2.3.5 小黄瓜果皮色度的测定22
- 2.3.6 小黄瓜乙烯释放量的测定22-23
- 2.3.7 小黄瓜果实呼吸速率的测定23
- 2.3.8 小黄瓜果实可溶性固形物含量的测定23
- 2.3.9 小黄瓜果实维生素C含量的测定23-24
- 2.3.10 小黄瓜感官评价品评方法24-25
- 2.3.11 小黄瓜果实丙二醛含量的测定25-26
- 2.3.12 小黄瓜果实脯氨酸含量的测定26
- 2.4 黄瓜果实采后冷害相关基因全长cDNA的克隆与生物学分析26-31
- 2.4.1 黄瓜果实总RNA的提取26-27
- 2.4.2 黄瓜果实总RNA的检测27
- 2.4.3 第一链cDNA的合成27-28
- 2.4.4 黄瓜果实采后冷害相关基因cDNA全长的扩增28
- 2.4.5 目的基因片段的回收纯化28-30
- 2.4.6 PCR回收产物的载体连接30
- 2.4.7 连接产物的转化30
- 2.4.8 阳性克隆的扩大培养与扩大鉴定30-31
- 2.4.9 阳性克隆的测序31
- 2.5 黄瓜果实采后冷害相关基因荧光定量分析31-35
- 2.5.1 黄瓜果实总RNA的消化与纯化31
- 2.5.2 荧光定量RNA检测和模板的制备31-32
- 2.5.3 各基因荧光定量引物的选择与优化32
- 2.5.4 荧光表达的标准曲线和溶解曲线32-34
- 2.5.5 cDNA模板验证34
- 2.5.6 荧光定量PCR反应体系34
- 2.5.7 荧光定量PCR结果的计算方法34-35
- 2.6 黄瓜冷害相关基因的转录自激活分析35-38
- 2.6.1 酵母菌株35
- 2.6.2 载体构建35-37
- 2.6.3 酵母感受态细胞的制备及Li Ac介导的质粒转化37-38
- 2.6.4 α-半乳糖糖苷酶(α-galactosidase)活性检测38
- 2.7 酵母双杂交分析蛋白互作38-40
- 2.8 数据统计与作图40
- 2.9 主要仪器设备40-42
- 3 结果与分析42-103
- 3.1 小黄瓜适宜贮藏低温的筛选42-47
- 3.1.1 低温贮藏对小黄瓜商品率的影响42-43
- 3.1.2 低温贮藏对小黄瓜冷害指数的影响43-44
- 3.1.3 低温贮藏对小黄瓜果肉硬度和果皮颜色的影响44-46
- 3.1.4 低温贮藏对小黄瓜乙烯释放量和呼吸速率的影响46-47
- 3.2 冷藏条件下小黄瓜包装的筛选47-52
- 3.2.1 包装对小黄瓜外观品质和商品率的影响47-48
- 3.2.2 包装对小黄瓜果肉硬度和果皮颜色的影响48-51
- 3.2.3 包装对小黄瓜乙烯释放量和呼吸速率的影响51-52
- 3.3 小黄瓜适宜冷链物流方式的筛选52-56
- 3.3.1 预冷及包装对小黄瓜物流过程果实温度变化的影响52-53
- 3.3.2 小黄瓜感官品质重要度比较53-54
- 3.3.3 预冷、包装及物流方式对小黄瓜货架期果实品质的影响54-55
- 3.3.4 预冷、包装及物流方式对小黄瓜果肉硬度的影响55
- 3.3.5 预冷、包装及物流方式对小黄瓜维生素C含量的影响55-56
- 3.4 冷害温度下小黄瓜的生理生化变化56-65
- 3.4.1 冷害低温贮藏对小黄瓜外观品质和商品率的影响56-59
- 3.4.2 冷害低温贮藏对小黄瓜冷害指数的影响59-60
- 3.4.3 冷害低温贮藏对小黄瓜果肉硬度和果皮颜色的影响60-63
- 3.4.4 冷害低温贮藏对小黄瓜乙烯释放量和呼吸速率的影响63-64
- 3.4.5 冷害低温贮藏对小黄瓜可溶性固形物含量的影响64
- 3.4.6 冷害低温贮藏对小黄瓜脯氨酸和丙二醛含量的影响64-65
- 3.5 黄瓜采后冷害相关基因全长cDNA的克隆与生物学分析65-92
- 3.5.1 黄瓜MAPK1基因的克隆和序列分析65-67
- 3.5.2 黄瓜MAPK4-1 基因的克隆和序列分析67-70
- 3.5.3 黄瓜MAPK4-2 基因的克隆和序列分析70-72
- 3.5.4 黄瓜MAPK6基因的克隆和序列分析72-75
- 3.5.5 黄瓜MAPK7基因的克隆和序列分析75-77
- 3.5.6 黄瓜MAPK9-3 基因的克隆和序列分析77-80
- 3.5.7 黄瓜MAPK13基因的克隆和序列分析80-82
- 3.5.8 黄瓜MAPK19基因的克隆和序列分析82-85
- 3.5.9 黄瓜MAPK20-2 基因的克隆和序列分析85-87
- 3.5.10 黄瓜BADH基因的克隆和序列分析87-90
- 3.5.11 黄瓜P5CS基因的克隆和序列分析90-92
- 3.6 小黄瓜采后冷害相关基因在冷害温度贮藏过程中的表达变化92-100
- 3.6.1 果实总RNA的提取以及检测92-93
- 3.6.2 目的基因的qRT-PCR引物特异性验证及标准曲线制作93-96
- 3.6.3 MAPKs基因在冷害温度贮藏过程中的表达96-98
- 3.6.4 WRKYs基因在冷害温度贮藏过程中的表达98-99
- 3.6.5 BADH、P5CS基因冷害温度贮藏过程中的表达99
- 3.6.6 小黄瓜采后冷害相关基因与采后冷害指数的相关性分析99-100
- 3.7 黄瓜采后冷害相关基因的转录自激活分析100-101
- 3.8 黄瓜采后冷害相关基因MAPKs与WRKYs的蛋白互作分析101-103
- 4 讨论103-107
- 4.1 低温贮藏结合包装处理对小黄瓜采后品质的影响103
- 4.2 预冷及包装处理对小黄瓜物流保鲜的影响103-104
- 4.3 低温胁迫对小黄瓜采后品质的影响及分子机理104-107
- 全文结论107-108
- 致谢108-109
- 参考文献109-118
- 附录 在读期间发表论文及获得的奖励118
【参考文献】
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