体外储存致悬浮红细胞凋亡损伤机制的研究

发布时间：2017-12-30 23:44

  本文关键词：体外储存致悬浮红细胞凋亡损伤机制的研究　出处：《安徽医科大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的研究体外储存期悬浮红细胞(suspenged erythrocytes)在不同保存时间引起红细胞凋亡损伤的影响,并探讨其可能的发生机制。方法采集8例健康献血员全血,常规分离白细胞和血浆制成悬浮红细胞。置4℃贮血冰箱储存,在保存后3 d、11 d、19 d、27 d和35 d共5个时相点,分别留取相应保存期的悬浮红细胞,利用Annexin V-FITC进行荧光染色,经流式细胞仪检测不同保存期红细胞凋亡率及红细胞体积大小变化,同时用荧光显微镜观察PS外翻的凋亡的红细胞形态;利用Fluo-3/AM作为荧光探针,经流式细胞仪检测不同保存期红细胞内钙离子浓度;同时留取不同保存期悬浮红细胞上清液,利用酶标仪检测上清液在405 nm的吸光度并计算红细胞溶血率。结果不同保存期的悬浮红细胞经过荧光染色,经流式细胞仪检测后发现,红细胞凋亡率和红细胞内钙离子浓度逐渐增加,与保存3 d的悬浮红细胞相比较,11d和19 d差异不明显,至27 d差异均有统计学意义(P0.05),并且荧光显微镜下可以观察到凋亡红细胞膜上的FITC荧光信号;用酶标仪检测上清液中血红蛋白的吸光度后发现,与保存3 d的红细胞相比较,11 d、19 d和27 d溶血率增加不明显,至35 d差异才有统计学意义(P0.05);而随着保存时间的增加,红细胞体积逐渐变小,与保存3 d的红细胞相比较,11 d和19 d体积变小差异不明显,至27d差异有显著性(P0.05)。结论体外储存的悬浮红细胞随着保存时间的延长,凋亡逐渐增加,这可能是导致储存损伤的原因之一。红细胞凋亡发生的主要机制可能是钙离子内流。
[Abstract]:Objective to study the effects of suspended erythrocytes (RBC) suspending erythrocytes on erythrocyte apoptosis at different storage times in vitro. Methods whole blood samples from 8 healthy blood donors were collected, leucocytes and plasma were routinely separated and made into suspended red blood cells (RBC), stored in 4 鈩，

本文编号：1357087