粘质沙雷菌产酶性及抗菌药物的联合用药模式研究

发布时间：2018-02-20 20:30

本文关键词： 粘质沙雷菌 ESBLs AmpC酶碳青霉烯酶 PCR 抗菌药物体外联合药敏试验　出处：《第四军医大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的为了了解粘质沙雷菌的产酶性以及对抗菌药物的体外抗菌活性,探讨其耐药性,并为联合用药模式对临床产酶菌感染的治疗提供实验室依据。本试验第一部分对咸阳地区(陕西省核工业二一五医院、咸阳市第一人民医院、中铁二十局医院)从2009年1月至2012年12月临床分离出的106株粘质沙雷菌从临床的来源、感染特点及耐药情况进行了统计分析;第二部分实验,通过对ESBLs、Amp C酶和碳青霉烯酶的检测,了解本地区粘质沙雷菌的产酶特性,并对产酶菌株选择临床常用的抗菌药物进行体外联合药敏试验,检测其联合药物对产酶菌的体外抗菌活性特点,对其临床上感染的控制及耐药菌株的播散起到重要的指导作用。方法1.收集咸阳地区(陕西省核工业二一五医院、咸阳市第一人民医院、中铁二十局医院)从2009年1月至2012年12月临床分离出的106株粘质沙雷菌,对其临床分布情况、常见抗生素的耐药性以及重症医学科与普通病房的感染特点进行分析。2.ESBLs检测:在106株粘质沙雷菌中,用头孢噻肟或头孢他啶进行产ESBLs初筛试验,对耐药菌株采用双纸片协同确认试验(头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸,头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸)进行ESBLs的检测;PCR检测产ESBLs菌株的耐药基因。3.Amp C酶检测:用头孢西汀纸片进行初筛试验,然后采用三维试验进行确证,PCR检测Amp C酶耐药基因。4.碳青霉烯酶的检测:应用改良Hodge试验对8株耐碳青霉烯酶类药物细菌筛选产酶株;PCR技术检测KPC型碳青霉烯酶耐药基因。5.联合药敏试验:采用棋盘稀释法对产酶粘质沙雷菌进行体外联合药敏试验,计算FIC指数,判断药物联合体外抗菌活性效果。6.统计学方法:采用X检验,P0.05为具有统计学意义。结果1.菌株来源:从咸阳地区共分离获得106株粘质沙雷菌,其中以痰液标本最多,占84.1%(89/106),其次为分泌物、尿液和咽拭子,分别为4株、3株、3株;菌株来源科室主要为重症医学科(ICU)41.5%(44/106)株、呼吸内科15.1%(16/106)、神经外科13.2%(14/106)和肾内科9.4%(10/106)。2.临床药敏试验结果:106株粘质沙雷菌对一、二代头孢菌素的耐药率均在90%以上;对三、四代头孢菌素类药物耐药率在20%左右;对氨基糖甙类药物、氟喹诺酮类药物及碳青霉烯酶类药物的耐药率均在10%以下。3.重症医学科与普通病房菌株的耐药率结果:重症医学科和普通病房菌株的耐药率为氨曲南36.7%和11.3%、头孢吡肟为27.3%和8.1%、头孢他啶为29.5%和14.5%、头孢哌酮/舒巴坦为18.2%和8.1%、厄他培南为13.6%和3.2%,采用χ2检验,P0.05,具有统计学意义;而对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、环丙沙星、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、美罗培南,重症医学科和普通病房的耐药率分别进行χ2检验,P0.05,无统计学差别。4.产ESBLs的阳性率:106株粘质沙雷菌中ESBLs初筛试验阳性率34.9%(37/106),,22株耐头孢他啶,31株耐头孢噻肟,其中有16株细菌对头孢他啶和头孢噻肟同时耐药。经双纸片确证试验阳性为33株,总阳性率为31.1%(28/106)。应用PCR检测ESBLs耐药基因,共检出28株阳性菌株,阳性率26.4%(28/106),28株产ESBL耐药基因菌株中,CTX-M型75.0%(21/28),TEM型46.4%(13/28),SHV型10.7%(3/28)。21株产CTX-M型β-内酰胺酶菌株中,CTX-M-1型5株,占23.8%(5/21);CTX-M-2型8株,占38.1%(8/21);CTX-M-9型15株,占71.4%(15/21)。有16株粘质沙雷菌产两种或两种以上耐药基因,为57.1%(16/28)。5.产Amp C酶阳性率:Amp C酶初筛试验阳性率21.7%(23/106),三维确证试验阳性10株,总检出率9.4%(10/106)。PCR检测耐药基因阳性株有10株,与三维试验结果一致,EBC型Amp C酶耐药基因阳性株有6株,DHA型有3株,FOX型有1株,未检出MOX型与CIT型耐药基因。6.KPC型碳青霉烯酶阳性率:8株耐碳青霉烯酶类药物菌株在改良Hodge试验中,阳性率为75.0%(6/8),总阳性率为5.7%(6/106),应用PCR检测KPC型碳青霉烯酶耐药基因,阳性株为4株,均为KPC-2型耐药基因。7.常用抗菌药物体外联合药敏试验结果:对产ESBLs菌株,(哌拉西林/他唑巴坦)/阿米卡星、头孢吡肟/阿米卡星、(哌拉西林/他唑巴坦)/环丙沙星、美罗培南/环丙沙星及美罗培南/阿米卡星FIC指数1的比率分别为32.2%、25.0%25.0%、25.0%和21.4%;对产Amp C酶菌株,(哌拉西林/他唑巴坦)/环丙沙星、(哌拉西林/他唑巴坦)/阿米卡星、美罗培南/阿米卡星、头孢吡肟/阿米卡星、美罗培南/环丙沙星的FIC1的比率为40%、30%、30%、20%和20%,而头孢吡肟/环丙沙星尽管其FIC1的比率为30%,但其FIC≥2的比率高达60%;对4株产碳青霉烯酶的菌株,FIC指数1的头孢吡肟/阿米卡星有2株,(哌拉西林/他唑巴坦)/环丙沙星、美罗培南/环丙沙星及美罗培南/阿米卡星各有1株,对头孢吡肟/阿米卡星和(头孢哌酮/舒巴坦)/阿米卡星均有1株FIC≥2。结论咸阳地区粘质沙雷菌标本来源以痰液为主,重症医学科检出率最高。菌株对抗生素敏感率整体较好,对一、二代头孢菌素类药物的耐药率很高;对三、四代头孢菌素类药物的敏感性较好,仍可作为临床常规用药;对氨基糖苷类药物、氟喹诺酮类药物和碳青霉烯酶类药物的敏感性较高,作为严重感染的首选药物。值得我们注意的是,粘质沙雷菌对各类抗生素的耐药率呈逐年上升趋势,且已有耐碳青霉烯酶类药物的菌株出现。重症医学科检出菌株的耐药率明显高于普通病房,尤其是氨曲南、头孢吡肟、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦和厄他培南。对ESBLs、Amp C酶和碳青霉烯酶均有一定比例的产酶株出现,产酶是粘质沙雷菌耐药的主要机制。产ESBLs粘质沙雷菌以CTX-M型和TEM型耐药基因为主,携带多重耐药基因菌株比例较高;Amp C酶耐药基因以EBC型为主,DHA型和FOX型也有检出;碳青霉烯酶以KPC-2型耐药基因为主。抗菌药物的联合使用对一些由产酶株引起的严重感染具有一定的加强作用,对产ESBLs菌株引起的感染,可使用头孢吡肟/阿米卡星和(哌拉西林/他唑巴坦)/环丙沙星的联合方案;对产Amp C酶的粘质沙雷菌,可以选择(哌拉西林/他唑巴坦)/阿米卡星和(哌拉西林/他唑巴坦)/环丙沙星的联合模式;头孢吡肟/阿米卡星和(哌拉西林/他唑巴坦)/环丙沙星可用于产碳青霉烯酶的粘质沙雷菌引起的感染,为临床医生选择联合用药提供依据。
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【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R446.5

【参考文献】