青岛市两所三甲医院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药机制和菌株同源性研究

发布时间：2018-03-31 17:20

  本文选题：鲍曼不动杆菌　切入点：碳青霉烯酶　出处：《青岛大学》2015年硕士论文

【摘要】：目的1、了解青岛市两三甲医院鲍曼不动杆菌耐药情况及分布特征,指导临床合理用药。2、探讨鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制。3、比较与分析院内及院间主要克隆株流行情况;分析菌株的同源性。方法1、收集两医院2013年7月至2014年7月期间145株鲍曼不动杆菌临床分离株(A院78株;B院67株);2、采用纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B法)对所收集的菌株进行药物敏感试验,并进行统计学分析;3、采用聚合酶链反应(Ploymerase Chain Reaction,PCR)对鲍曼不动杆菌在基因水平上检测碳青霉烯酶的编码基因、外膜蛋白car O基因及外排泵系统Ade ABC、Ade DE、Ade IJK、Ade FGH的主要结构基因和MATE家族abe M基因,分析耐药株所产生的主要碳青霉烯酶和外排泵的流行状况;4、对随机从碳青霉烯耐药组中抽取的30株鲍曼不动杆菌和敏感组的17株鲍曼不动杆菌,用超声破碎及高速离心法提取外膜蛋白并用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析并比较不同菌株在外膜蛋白水平上的表达差异。5、应用肠杆菌科基因间一致重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)对所有菌株进行DNA分型及同源性分析。结果1、所有菌株大部分来自痰标本,主要分离于ICU和呼吸内科。A院78株鲍曼不动杆菌对临床常用的16种抗菌药物普遍耐药,对头孢哌酮舒巴坦耐药率最低(3.85%)其次是米诺环素(16.67%),氨苄西林舒巴坦(73.08%),对其他抗菌药物的耐药率均超过85%;B院67株鲍曼不动杆菌对常用的23种抗菌药物普遍耐药,对米诺环素和替加环素均不耐药,对阿米卡星、左氧氟沙星、头孢哌酮舒巴坦的耐药率依次为23.88%、38.81%、64.18%,对其他抗菌药物的耐药率均超过89%。两院所有菌株对大部分抗菌药物的耐药情况有差异,且差异有统计学意义;而对多重耐药株来说对大部分抗菌药物的耐药情况在两院间没有差异;两院ICU与非ICU科室间对大部分抗菌药物的耐药情况有差异,但差异没有统计学意义。2、两院所有菌株中均携带OXA-51、abe M基因,均未检测到OXA-24、SIM-1、IMP-1、IMP-2、VIM-1、VIM-2、ade D基因。两院菌株OXA-23基因携带率分别为75.64%(59/78),50.75%(34/67)相比有显著差异(χ2=9.711,P0.05);A院有3株携带OXA-58基因,B院没有检测到此基因。两院ade B、ade G、ade J的携带率分别为96.15%(75"78)和97.01%(65"67)、79.49%(62"78)和92.54%(62"67)、88.46%(69"78)和100%(67"67)。统计学分析结果显示:ade B(χ2=0.030,P0.05)基因在两院分离株的携带率上没有差异,ade G(χ2=4.956,P0.05)基因和ade J(χ2=6.380,P0.05)基因在两院分离株的携带率上有差异。两院car O基因阳性率分别为89.74%(70/78)和86.57%(58/67),统计学显示(χ2=0.351,P=0.5530.05)差异没有统计学意义。3、SDS-PAGE显示30株碳青霉烯耐药组与敏感组相比在大约47KDa(20株)、37KDa(25株)和29KDa(23株)处有不同程度的缺失或减弱;17株敏感组各有16株、13株、13株在相应条带处表达。4、145株菌株可分为8个基因型,其中A型71株和E型37株为主要流行株;A院主要流行A型(46.15%)和E型(41.03%)菌株,B院主要流行A型(52.24%)和C型(17.91%)菌株。结论1、青岛市两三甲医院临床分离的鲍曼不动杆菌耐药情况严重且存在泛耐药株在院内及院间大肆流行。2、外膜蛋白car O基因在耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌中广泛存在,产OXA-23、OXA-51型碳青霉烯酶、主动外排系统Ade ABC、Ade IJK、Ade FGH和Abe M的高表达、外膜蛋白表达的缺失或减弱是两院鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素的重要机制。3、两院主要流行株、大部分药物的耐药情况及某些耐药基因携带率存在显著差异。
[Abstract]:Objective 1 . To investigate the drug resistance and distribution characteristics of acinetobacter baumanii in two hospitals of Qingdao , and to guide clinical rational drug use . .涓ら櫌鎵，

本文编号：1691694