半巢式荧光定量PCR快速检测登革Ⅰ型病毒成熟microRNA方法的建立

发布时间：2018-05-07 19:13

  本文选题：成熟miRNA + 登革病毒Ⅰ型　； 参考：《中国病原生物学杂志》2016年06期

【摘要】：目的建立外周血中登革病毒微小RNA检测方法,探讨其作为登革热病毒感染生物标记物的可行性。方法设计并筛选半巢式实时荧光定量PCR检测登革病毒miRNA引物,验证方法的灵敏度、特异性和重复性。结果设计的登革病毒茎环引物和扩增引物可区分健康人和登革热Ⅰ型感染者;重复试验确定Ct≤35为登革病毒感染阳性,Ct35为阴性,同一样品内相对标准偏差(RSD)为0.05%,样品间的相对标准偏差(RSD)为0.15%,总体样品的相对标准偏差(RSD)为5%;该方法检测miRNA的灵敏度为1×10-7μmol/L,检测1~10-4μmol/L内的miRNA呈良好的线性关系。该方法也显示了较好的特异性。结论成功建立了半巢式SYBR GreenⅠ荧光定量qRT-PCR检测Ⅰ型DENV的miRNA方法。外周血中成熟的miRNA可以作为一种潜在的DENV感染生物标志物。
[Abstract]:Objective to establish a method for detection of dengue virus micro in peripheral blood and explore its feasibility as a biomarker of dengue virus infection. Methods Semi-nested real-time fluorescent quantitative PCR primers were designed and screened for the detection of dengue virus miRNA, and the sensitivity, specificity and reproducibility of the method were verified. Results the stem ring primers and amplified primers of dengue virus could be used to distinguish healthy persons from dengue virus type 鈪，

本文编号：1858129