外周血液样本抗凝剂类型、保存时间和温度对CIK细胞培养的影响
发布时间:2018-05-25 15:04
本文选题:细胞因子诱导的杀伤细胞 + 抗凝剂 ; 参考:《细胞与分子免疫学杂志》2016年03期
【摘要】:目的探讨外周血液样本抗凝剂类型、保存时间和保存温度对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞培养的影响,为自体免疫细胞治疗技术的外周血保存标准化提供实验依据。方法将抽取的4份60 m L外周血样本分别应用肝素钠、细胞保存液(枸橼酸钠)和EDTA抗凝剂抗凝,并分别存放于4、22、30℃的环境中,储存0、4、8、24 h,应用正交实验设计优选为12组,然后分离出单个核细胞分别诱导培养成CIK细胞,对比12组CIK细胞增殖效率及γ干扰素(IFN-γ)分泌量的变化。结果在CIK细胞培养过程中,EDTA组CIK细胞增殖不明显,肝素钠组和血液保存液组CIK细胞增殖明显,且肝素钠优于血液保存液;血液保存时间对CIK细胞培养影响不明显,但保存时间越长,细胞增殖效率越差,保存时间超过8 h的CIK细胞,其增殖效率在第16天以后明显降低。对培养时间在16 d内的CIK细胞,血液保存温度影响不显著,但CIK细胞培养16 d之后,22℃保存条件下,CIK细胞增殖效率最高,4℃次之,30℃最差。结论肝素钠和血液保存液均可用于CIK细胞培养的血液抗凝;保存时间在24 h内,温度在4℃~30℃之间保存的血液,均可用于CIK细胞培养。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of anticoagulant type, preservation time and preservation temperature on cytokine induced cytotoxicity (CIK) cell culture in peripheral blood samples, and to provide experimental evidence for the standardization of peripheral blood preservation in autologous immune cell therapy. Methods four samples of 60 mL peripheral blood were collected and treated with sodium heparin, sodium citrate (sodium citrate) and anticoagulant EDTA, respectively, and stored at 40 鈩,
本文编号:1933622
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