基于凝集素的唾液糖蛋白分离、分析及应用

发布时间：2019-08-19 08:06

【摘要】：唾液中的糖蛋白丰度偏低,给分离、分析带来挑战。该文采用麦胚素(WGA)和橙黄网胞盘菌凝集素(AAL)分别富集糖蛋白,考察了高丰度蛋白质去除和不同酶解方式对糖蛋白分离、分析的影响。结果显示,WGA和AAL提取的唾液糖蛋白经胶内酶解可鉴定到的糖蛋白数量显著多于溶液内酶解的结果,也优于去除高丰度蛋白质后的鉴定结果。选择WGA结合胶内酶解进一步对比分析肺癌患者与健康人唾液糖蛋白的差异,通过免标记定量分析共鉴定到139个蛋白质,其中102个蛋白质存在糖基化位点,包括14个在癌症组和正常组之间存在显著差异(p0.05)的糖蛋白,表明该策略可用于唾液糖蛋白的有效分离、分析和癌症标志物的发现。
[Abstract]:The abundance of glycoprotein in saliva is low, which brings challenges to separation and analysis. In this paper, wheat germ (WGA) and (AAL) were used to enrich glycoproteins, and the effects of high abundance protein removal and different enzyme hydrolysis methods on the separation and analysis of glycoproteins were investigated. The results showed that the number of glycoproteins extracted by WGA and AAL by enzyme hydrolysis was significantly higher than that by enzyme hydrolysis in solution, and better than that by removing high abundance proteins. WGA binding enzyme hydrolysis was selected to further compare and analyze the difference of sialoglycan between patients with lung cancer and healthy people. A total of 139 proteins were identified by quantitative analysis without labeling. Among them, there were glycosylation sites in 102 proteins, including 14 glycoproteins with significant difference between cancer group and normal group (p0.05), indicating that this strategy can be used for effective isolation, analysis and discovery of cancer markers.
【作者单位】： 微生物代谢国家重点实验室上海交通大学生命科学技术学院生物分离与分析实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(21275099,21305087,21475086) “863”项目(2014AA020545) 国家青年千人计划项目(2013)~~
【分类号】：R446.1

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2528109