基于PVP和PDMAEMA的聚阳离子结构对DNA递送性能的影响

发布时间：2022-02-17 16:08

　　基因治疗在治愈遗传性疾病和获得性疾病方面具有重要的应用价值,其原理是把功能性基因递送到靶细胞产生治疗性蛋白或沉默致病性蛋白达到治疗疾病的目的。生物安全性好和转染效率高的基因载体是基因治疗获得临床应用的关键。基因载体分为病毒载体和非病毒载体,聚阳离子作为一类重要的非病毒载体能有效负载和递送基因至细胞内特定的部位。其中,聚甲基丙烯酸N,N-二甲氨基乙酯（PDMAEMA）是聚阳离子基因载体研究的优良模型。众多研究集中于PDMAEMA的不同结构对递送DNA性能的影响,例如接枝和嵌段共聚物被广泛研究。但将两者进行对比性、系统性研究却少有报导。本论文采用具有基因协同递送作用的PVP作为起始链段,通过可逆加成-断裂链转移自由基聚合（RAFT）和原子转移自由基聚合（ATRP）两种可控的自由基聚合法制备了基于PVP和PDMAEMA的组成相同的接枝和嵌段两种结构的聚合物。研究表明接枝聚合物（PgP）能更有效地压缩pDNA,形成的纳米粒比嵌段聚合物（PbP）与pDNA形成的纳米粒更紧实、更稳定而且表面电荷更高。在低的N/P条件下,PgP在HepG2细胞上的体外细胞转染效率不仅比PbP高而且明显高于通用转染试... 

【文章来源】：天津大学天津市211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
第二章 文献综述
    2.1 基因治疗
        2.1.1 基因治疗的原理
        2.1.2 基因治疗的发展
        2.1.3 基因治疗的应用
    2.2 非病毒性基因载体
        2.2.1 脂质体
        2.2.2 阳离子聚合物
        2.2.3 合成阳离子聚合物
    2.3 基因传递过程中的障碍
        2.3.1 二元复合/压缩效果
        2.3.2 细胞间递送的障碍
        2.3.3 细胞内的过程
        2.3.4 细胞毒性，生物相容性和生物可降解性
        2.3.5 特异性靶向目标细胞
    2.4 研究思路和主要内容
第三章 同组异构的二元复合物的制备与表征
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验原料
        3.2.2 PVP均聚物的合成
        3.2.3 接枝共聚物PVP-g-PDMAEMA（PgP）的制备
        3.2.4 嵌段共聚物PVP-b-PDMAEMA（PbP）的制备
        3.2.5 二元复合物的制备
        3.2.6 聚合物及二元复合物的理化性质测试
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 PVP、PgP和PbP合成与表征
        3.3.2 聚合物的质子缓冲能力测试和稳定性测试
        3.3.3 二元复合物的制备与表征
    3.4 本章结论
第四章 二元复合物的体外细胞生物学效应
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 实验原料
        4.2.2 体外细胞毒性检测
        4.2.3 体外细胞转染实验
        4.2.4 复合物的细胞摄取
        4.2.5 复合物在细胞内的分布
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 体外细胞毒性检测
        4.3.2 体外细胞转染实验
        4.3.3 二元复合物的细胞摄取
        4.3.4 内涵体逃逸和复合物在细胞内的分布
    4.4 本章结论
第五章 结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]A kind of modified bovine serum albumin with great potential for applying in gene delivery[J]. Ning Zhang,Chong-Xi Wang,Jin-Hao Liu,Jin-Feng Xing,An-Jie Dong.  Chinese Chemical Letters. 2013(07)
[2]叶酸受体在肿瘤靶向诊断和治疗中的应用[J]. 黄英男,吴昊,沈锡中.  复旦学报(医学版). 2012(01)
[3]胶原蛋白结构基础上的设计与合成[J]. 杜春玲,姚菊明.  生物工程学报. 2007(02)



本文编号：3629708