基于磁性纳米颗粒和化学发光技术定量检测核酸及其拷贝数变化的方法研究
发布时间：2024-05-25 00:54
拷贝数变异(Copy Number Variations, CNVs)是一种大小从1 kb到几个Mb范围内的DNA片段多态性,形式包括缺失、插入、重复以及复杂的多位点突变等。CNVs广泛分布于基因组中,是遗传变异的主要形式之一,对基因表达、表型变异以及基因剂量的改变都有很大影响,可以引发各种复杂的疾病。对CNVs的研究可以阐述遗传疾病的分子机制,寻找用于基因诊断和产前诊断的分子标记,为疾病的分子诊断和新治疗方法的开发提供科学依据。近年来,随着纳米技术的迅速发展,纳米材料的应用为生物医学的研究和发展提供了新的技术和手段。磁性纳米颗粒(Magnetic Nanoparticles, MNPs)是纳米材料的重要组成部分,由于其具有高表面积、易分离以及良好的生物相容性等特点,目前已被广泛地应用于生物信号检测方面。另外,化学发光(Chemiluminescence, CL)技术因具有较高的灵敏度、特异性和准确度以及仪器要求简单等优点,成为了生物分析研究与发展的重要工具。本论文研究结合磁性纳米颗粒和化学发光技术的优点,建立了一种快速、灵敏和实用的核酸定量新技术,并用于CNVs的检测,具体研究内容包...
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 CNVs与疾病的相关性
1.1.1 致病性CNVs的发生形式
1.1.2 CNVs与常见疾病
1.2 CNVs的检测方法
1.2.1 基于杂交技术的检测方法
1.2.2 基于PCR技术的检测方法
1.2.3 基于测序技术的检测方法
1.3 磁性纳米颗粒的生物医学应用
1.3.1 生物分子的分离与纯化
1.3.2 靶向药物治疗
1.3.3 靶向磁热疗
1.3.4 磁共振成像
1.3.5 磁转染
1.4 化学发光的生物检测应用
1.4.1 化学发光在核酸检测分析中的应用
1.4.2 化学发光在免疫分析中的应用
1.5 本课题的研究目的和意义
参考文献
第二章 基于磁性纳米颗粒和引物延伸的核酸定量法的初步探索
2.1 引言
2.2 实验材料与方法
2.2.1 实验试剂和仪器
2.2.2 实验方法
2.3 结果与讨论
2.3.1 颗粒的表征
2.3.2 特异性检测
2.3.3 基于MNPs和引物延伸的核酸检测方法的优化
2.3.4 基于MNPs-CL和引物延伸法的核酸定量检测
2.4 结论
2.4.1 基于MNPs-CL和引物延伸的核酸检测方法的初步建立
2.4.2 化学发光条件的优化
2.4.3 模拟核酸定量分析
参考文献
第三章 基于磁性纳米颗粒和探针连接依赖的扩增技术的核酸定量法的初步探索
3.1 引言
3.2 实验材料与方法
3.2.1 实验试剂和仪器
3.2.2 实验方法
3.3 结果与讨论
3.3.1 特异性检测
3.3.2 MNPs-CL核酸检测系统的优化
3.3.3 基于MNPs-CL和探针连接依赖的扩增技术的核酸定量检测
3.4 结论
3.4.1 基于MNPs-CL和探针连接依赖的扩增技术的核酸检测法的建立
3.4.2 MNPs-CL系统检测目标DNA扩增产物的条件优化
3.4.3 模拟核酸定量分析
参考文献
第四章 基于磁性纳米颗粒和探针连接依赖的扩增技术的CNVs检测方法的研究
4.1 引言
4.2 实验材料与方法
4.2.1 实验试剂和仪器
4.2.2 实验方法
4.3 结果与讨论
4.3.1 连接探针的特异性
4.3.2 模拟基因的拷贝数检测
4.3.3 MNPs-CL系统对目标基因的拷贝数检测及分析
4.3.4 MLPA技术的拷贝数检测及其与MNPs-CL系统的比较分析
4.4 结论
4.4.1 基于MNPs-CL和探针连接依赖的扩增技术的CNVs检测方法的初步建立
4.4.2 基因组DNA中目标基因的拷贝数检测与分析
4.4.3 与MLPA检测法的比较分析
参考文献
第五章 基于金磁纳米复合颗粒和荧光技术的核酸定量检测的可能性探讨
5.1 引言
5.2 实验材料与方法
5.2.1 实验试剂和仪器
5.2.2 实验方法
5.3 结果与讨论
5.3.1 Fe3O4@SiO2@Au纳米复合颗粒的表征
5.3.2 基于GMNPs和引物在位延伸的荧光检测体系
5.4 结论
参考文献
第六章 总结与展望
6.1 论文工作总结
6.2 下一步工作需要解决的问题
附录
攻读博士学位期间发表的论文
攻读博士期间参加的会议
攻读博士期间申请或参与申请的专利
致谢
本文编号：3981466
【文章页数】：123 页
【学位级别】：博士
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中文摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 CNVs与疾病的相关性
1.1.1 致病性CNVs的发生形式
1.1.2 CNVs与常见疾病
1.2 CNVs的检测方法
1.2.1 基于杂交技术的检测方法
1.2.2 基于PCR技术的检测方法
1.2.3 基于测序技术的检测方法
1.3 磁性纳米颗粒的生物医学应用
1.3.1 生物分子的分离与纯化
1.3.2 靶向药物治疗
1.3.3 靶向磁热疗
1.3.4 磁共振成像
1.3.5 磁转染
1.4 化学发光的生物检测应用
1.4.1 化学发光在核酸检测分析中的应用
1.4.2 化学发光在免疫分析中的应用
1.5 本课题的研究目的和意义
参考文献
第二章 基于磁性纳米颗粒和引物延伸的核酸定量法的初步探索
2.1 引言
2.2 实验材料与方法
2.2.1 实验试剂和仪器
2.2.2 实验方法
2.3 结果与讨论
2.3.1 颗粒的表征
2.3.2 特异性检测
2.3.3 基于MNPs和引物延伸的核酸检测方法的优化
2.3.4 基于MNPs-CL和引物延伸法的核酸定量检测
2.4 结论
2.4.1 基于MNPs-CL和引物延伸的核酸检测方法的初步建立
2.4.2 化学发光条件的优化
2.4.3 模拟核酸定量分析
参考文献
第三章 基于磁性纳米颗粒和探针连接依赖的扩增技术的核酸定量法的初步探索
3.1 引言
3.2 实验材料与方法
3.2.1 实验试剂和仪器
3.2.2 实验方法
3.3 结果与讨论
3.3.1 特异性检测
3.3.2 MNPs-CL核酸检测系统的优化
3.3.3 基于MNPs-CL和探针连接依赖的扩增技术的核酸定量检测
3.4 结论
3.4.1 基于MNPs-CL和探针连接依赖的扩增技术的核酸检测法的建立
3.4.2 MNPs-CL系统检测目标DNA扩增产物的条件优化
3.4.3 模拟核酸定量分析
参考文献
第四章 基于磁性纳米颗粒和探针连接依赖的扩增技术的CNVs检测方法的研究
4.1 引言
4.2 实验材料与方法
4.2.1 实验试剂和仪器
4.2.2 实验方法
4.3 结果与讨论
4.3.1 连接探针的特异性
4.3.2 模拟基因的拷贝数检测
4.3.3 MNPs-CL系统对目标基因的拷贝数检测及分析
4.3.4 MLPA技术的拷贝数检测及其与MNPs-CL系统的比较分析
4.4 结论
4.4.1 基于MNPs-CL和探针连接依赖的扩增技术的CNVs检测方法的初步建立
4.4.2 基因组DNA中目标基因的拷贝数检测与分析
4.4.3 与MLPA检测法的比较分析
参考文献
第五章 基于金磁纳米复合颗粒和荧光技术的核酸定量检测的可能性探讨
5.1 引言
5.2 实验材料与方法
5.2.1 实验试剂和仪器
5.2.2 实验方法
5.3 结果与讨论
5.3.1 Fe3O4@SiO2@Au纳米复合颗粒的表征
5.3.2 基于GMNPs和引物在位延伸的荧光检测体系
5.4 结论
参考文献
第六章 总结与展望
6.1 论文工作总结
6.2 下一步工作需要解决的问题
附录
攻读博士学位期间发表的论文
攻读博士期间参加的会议
攻读博士期间申请或参与申请的专利
致谢
本文编号：3981466
本文链接：https://www.wllwen.com/huliyixuelunwen/3981466.html
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