元宝枫油的对力竭运动大鼠骨骼肌损伤的影响
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【摘要】:目的:本文旨在探索元宝枫油对力竭运动大鼠骨骼肌损伤的影响,为元宝枫油作为一种新型抗氧化剂服务于体育界提供依据。方法:将元宝枫种仁脱皮后,在净化式热风循环烘箱充分烘干,装入液压榨油机榨取元宝枫原油。随后采用CO_2超临界连续萃取技术对元宝枫原油进行萃取,通过设置单因素实验,控制萃取温度、萃取压力以及CO_2流量,测定萃取效率后,再通过响应面优化元宝枫油萃取工艺参数。采用高速逆流色谱技术测定元宝枫油中的脂肪酸组成及百分含量。选用7周龄SD雄性大鼠,体重270±30g,适应动物实验房环境一周后,将其随机分为安静组(CG)、力竭组(EG)、低剂量元宝枫油力竭组(LG)、中剂量元宝枫油力竭组(MG)、高剂量元宝枫油力竭组(HG),每组8只,双鼠单笼饲养,自然光照,自由饮水进食,室温25±2℃,国家标准臼齿类动物饲料喂养,2-3天更换一次垫料。所有力竭组大鼠每天上午九时以逐渐加速的方式进行15-20分钟的适应性训练,3天后建立为期6周的力竭模型,最后一次跑台训练至力竭后用乙醚麻醉对照组和力竭组的大鼠,腹主动脉取血,在冰上将其左腿腓肠肌迅速取下,剪取长、宽0.5cm的组织投入固定液中制备组织切片,将腓肠肌剩余部分迅速投入液氮中速冻30分钟之后,移入-80℃低温冰箱中备用。制备血清备用待测,检测血清中CK、LDH活性;腓肠肌制备匀浆后测定其中MDA、GSH含量,CAT、SOD、GSH-PX、T-AOC活性以及Caspase-8、Caspase-3活性。结果:1、通过单因素实验,确定超临界CO_2连续萃取元宝枫油过程中,萃取温度、萃取压力、CO_2流量对萃取效率的影响规律;以萃取温度、萃取压力、CO_2流量为自变量,以萃取效率作为响应指标,运用Design Expert7.1.3软件进行Box-Bebnken设计优化实验设计,确定最佳工艺条件为:萃取压力28MPa,萃取温度37.66℃,CO_2流量267.67L/h,萃取率达到96.23%。元宝枫油中含有脂肪酸的成分及百分比:0.15%棕榈油酸(C16H30O2)、4.13%棕榈酸(C16H32O2)、1.76%亚麻酸(C18H30O2)、35.86%亚油酸(C18H32O2)、26.53%油酸(C18H34O2)、2.6%硬脂酸(C18H32O2)、8.36%11-二十碳烯酸(C20H38O2)、0.22%花生酸(C20H40O2)、13.01%芥酸(C22H42O2)、0.89%山嵛酸(C22H44O2)、4.98%神经酸(C24H46O2)、0.34%木焦油酸(C24H48O2),不饱和脂肪酸含量达93.25%。2、力竭运动即刻,EG组骨骼肌肌膜模糊、肌纤维紊乱且肌核分布不均;与CG组相比,EG组血清CK和LDH活性提高;与CG组相比,EG组骨骼肌中MDA、SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC、Caspase-8以及Caspase-3升高,GSH含量下降。3、元宝枫油干预力竭运动大鼠后,LG组骨骼肌损伤较EG组小,但HG组骨骼肌损伤明显较EG组严重;与CG组相比,LG、MG、HG组CK、LDH活性均升高;与EG组相比,LG组CK、LDH活性降低;MG、HG组CK活性较EG组升高,但LDH活性较EG组降低;与CG和EG组相比,LG组MDH含量降低,但GSH、SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC升高;与CG和EG组相比,MG、HG组的MDA含量升高,但GSH、SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC降低。与EG组相比,LG、MG、HG组的Caspase-8、Caspase-3活性均降低;与LG与CG组Caspase-8、Caspase-3活性结果相近,MG、HG组与EG组相比Caspase-8、Caspase-3活性均降低。结论:1.响应面优化CO_2超临界萃取可提高元宝枫油的萃取效率,萃取效率高达96.23%,其中不饱和酸含量高达93.25%。2、低剂量元宝枫油可明显缓解力竭运动导致的骨骼肌氧化应激损伤,表现为改善力竭大鼠骨骼肌的肌纤维排列、肌核分布,降低力竭运动大鼠血清CK和LDH活性,减少骨骼肌MDA含量、提高抗氧化酶活性,同时降低骨骼肌Caspase-8与Caspase-3的活性。
【关键词】:元宝枫油 力竭运动 大鼠 骨骼肌 损伤
【学位授予单位】:山西师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:G804.7
【目录】:
- 摘要3-5
- Abstract5-11
- 1 引言11-13
- 2 文献综述13-21
- 2.1 运动性骨骼肌损伤的研究进展13
- 2.2 氧化应激与骨骼肌损伤13-17
- 2.2.1 氧化应激对骨骼肌形态结构的影响14
- 2.2.2 氧化应激引发骨骼肌损伤的生化指标变化14-15
- 2.2.3 氧化应激对骨骼肌细胞凋亡的影响15-17
- 2.3 补充抗氧化剂对骨骼肌的保护作用17-18
- 2.4 元宝枫油的研究综述18-21
- 3 实验材料与方法21-29
- 3.1 超临界CO_2连续萃取元宝枫油的工艺研究21-23
- 3.1.1 实验材料与仪器21
- 3.1.2 实验方法21-22
- 3.1.3 实验设计22-23
- 3.2 元宝枫油脂肪酸成分分析23-24
- 3.2.1 实验试剂与仪器23
- 3.2.2 实验设计23-24
- 3.3 元宝枫油对力竭大鼠骨骼肌损伤的研究24-28
- 3.3.1 动物实验24-25
- 3.3.2 实验试剂与仪器25
- 3.3.3 实验指标与方法25-28
- 3.4 数据处理28-29
- 4 实验结果29-41
- 4.1 超临界CO_2连续萃取元宝枫油的工艺研究29-34
- 4.1.1 元宝枫油萃取的单因素实验29-30
- 4.1.2 元宝枫油萃取的响应面因素实验30-34
- 4.2 元宝枫油中脂肪酸成分分析34-35
- 4.3 元宝枫油对力竭大鼠骨骼肌损伤的研究35-41
- 4.3.1 元宝枫油对力竭大鼠骨骼肌形态结构的变化35-37
- 4.3.2 元宝枫油对力竭大鼠血清CK、LDH活性的检测结果37
- 4.3.3 元宝枫油对力竭大鼠骨骼肌生化指标变化的检测结果37-39
- 4.3.4 元宝枫油对力竭大鼠骨骼肌Caspase-8、Caspase-3 活性的检测结果39-41
- 5 分析与讨论41-49
- 5.1 力竭运动对大鼠的影响41-44
- 5.1.1 力竭运动后大鼠骨骼肌形态结构发生变化41
- 5.1.2 力竭运动后大鼠血清CK、LDH活性变化41
- 5.1.3 力竭运动后大鼠骨骼肌生化指标的变化41-43
- 5.1.4 力竭运动后大鼠骨骼肌Caspase-8、Caspase-3 活性变化43-44
- 5.2 元宝枫油对力竭运动大鼠骨骼肌损伤的影响44-49
- 5.2.1 元宝枫油的萃取与成分分析44-45
- 5.2.2 元宝枫油对力竭大鼠骨骼肌形态结构变化的影响45
- 5.2.3 元宝枫油对力竭大鼠血清CK、LDH活性变化的影响45-46
- 5.2.4 元宝枫油对力竭大鼠骨骼肌生化指标变化的影响46-47
- 5.2.5 元宝枫油对力竭大鼠骨骼肌Caspase-8、Caspase-3 活性变化的影响47-49
- 6 结论49-51
- 致谢51-53
- 参考文献53-61
- 附录61-63
- 攻读硕士学位期间公开发表的论文63
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