姜黄素结合递增负荷有氧运动对中老年大鼠骨骼肌线粒体功能的影响

发布时间：2017-07-26 15:02

  本文关键词：姜黄素结合递增负荷有氧运动对中老年大鼠骨骼肌线粒体功能的影响

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【摘要】：本文建立大鼠递增负荷有氧训练模型,提取大鼠股四头肌内的线粒体,测定与能量与物质代谢相关的具有代表性的的生化指标,为姜黄素抗衰老的研究与应用提供一定的动物实验依据。研究目的:通过测定姜黄素结合递增负荷有氧运动后对中老年大鼠骨骼肌线粒体PTP开放程度、线粒体呼吸链复合体酶复合体Ⅲ、Ⅳ活性、ATP酶活性的变化。探讨姜黄素结合递增负荷有氧运动对衰老大鼠线粒体功能的影响。研究方法:21个月龄SD雄性大鼠40只,适应性伺养3天,适应性训练5天后将SD雄性大鼠随机分为4组,分别为:对照组(N)、姜黄素组(C)、递增负荷运动组(I)、姜黄素+递增负荷运动组(A),每组10只,每组分2笼饲养,每笼5只。递增负荷组(I)和姜黄素+递增负荷运动组(A)采用跑台运动方式,建立递增负荷实验动物模型(坡度为0。,运动强度递增至21m/min×45min,运动强度相当于75!VO2max),每星期持续训练5天,共8周。各实验组大鼠分别于末次训练结束后24h麻醉,断颈处死。处死后将大鼠固定于手术台上,剪开下肢皮肤,小心处理鼠毛,尽量避免粘在肌肉上,迅速取出股四头肌。在冷生理盐水中除去脂肪等结缔组织之后,滤纸吸干,置于液氮中冷冻,-80℃低温保存待用。采用分光光度法分别测定线粒体ATP酶活性、线粒体呼吸链复合物Ⅲ、Ⅳ活性、线粒体PTP开放程度变化情况。研究结果:(1)骨骼肌线粒体PTP开放程度:对照组与递增负荷运动组、姜黄素+递增负荷运动组比较均有显著性差异(P0.05),姜黄素组与递增负荷运动组比较有显著性差异(P0.05),递增负荷运动组与姜黄素+递增负荷运动组之间的差异并不明显,但呈现降低的趋势。(2)骨骼肌线粒体ATP酶活性:对照组与姜黄素组、递增负荷运动组、姜黄素+递增负荷运动组比较均有极显著性差异(P0.01),递增负荷运动组与姜黄素+递增负荷运动组之间有显著性差异(P0.05)。(3)骨骼肌线粒体CⅢ、活性:对照组与递增负荷运动组、姜黄素+递增负荷运动组比较均有极显著性差异(P0.01),姜黄素组与递增负荷运动组比较有极显著性差异(P0.01),姜黄素组与姜黄素+递增负荷运动组比较有极显著性差异(P0.01);递增负荷运动组与姜黄素+递增负荷运动组比较有显著性差异(P0.01)。(4)骨骼肌线粒体CⅣ活性:对照组与姜黄素组比较有显著性差(P0.05),对照组与递增负荷运动组比较有极显著性差异(P0.01),对照组与姜黄素+递增负荷运动组比较有极显著性差异(P0.01),姜黄素组递增负荷运动组比较有极显著性差异(P0.01),姜黄素组与姜黄素+递增负荷运动组比较有极显著性差异(P0.01),递增负荷运动组与姜黄素+递增负荷运动组比较有显著性差异(P0.01)。研究结论:(1)姜黄素结合递增负荷有氧运动使中老年大鼠股四头肌线粒体PTP开放程度呈降低趋势,降低骨骼肌线粒体因PTP过度或者异常开放造成细胞凋亡的发生率,保持细胞的正常代谢。减少细胞质中大量大分子蛋白质非选择性地进入线粒体内膜,并伴随着线粒体膜的去极化和线粒体氧化磷酸化失偶联现象。(2)姜黄素结合递增负荷有氧运动使中老年大鼠股四头肌线粒体ATP酶活性增强,提高了线粒体合成ATP的能力,维持线粒体正常的能量代谢功能以及线粒体的钙稳态。(3)姜黄素结合递增负荷有氧运动使中老年大鼠股四头肌线粒体CⅢ活性增强,增强线粒体呼吸及氧化磷酸化的能力,提高线粒体产能效率。(4)姜黄素结合递增负荷有氧运动使中老年大鼠股四头肌线粒体CⅣ活性增强,提高线粒体电子传递链、H+的传递及氧气的利用效率。
【关键词】：线粒体 递增负荷有氧运动 姜黄素 衰老
【学位授予单位】：湖南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：G804.2
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-12
• 1 前言12-14
• 2 实验对象与方法14-22
• 2.1 实验对象、分组、训练方案及给药剂量14-15
• 2.1.1 实验对象与分组14
• 2.1.2 给药时间及剂量14
• 2.1.3 递增负荷有氧运动方案14-15
• 2.2 实验仪器与试剂15-16
• 2.2.1 实验仪器15
• 2.2.2 实验试剂15-16
• 2.3 线粒体提取样品准备及线粒体的提取16-17
• 2.4 线粒体蛋白浓度测定与蛋白定量17
• 2.5 股四头肌线粒体PTP开放程度的测定17-18
• 2.6 股四头肌线粒体ATP酶活性测定方法18-19
• 2.7 股四头肌线粒体呼吸链复合物Ⅲ活性检测方法19-20
• 2.7.1 测定准备19
• 2.7.2 背景对照测定19
• 2.7.3 样品总活性测定19-20
• 2.7.4 样品非特异活性测定20
• 2.7.5 计算样品活性20
• 2.8 股四头肌线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性检测方法20-22
• 2.8.1 检测准备20
• 2.8.2 背景对照测定20-21
• 2.8.3 样品测定21
• 2.8.4 计算样品活性21-22
• 3 数据处理22-23
• 4 研究结果23-28
• 4.1 八周实验时长，实验大鼠体重（g）变化情况23
• 4.2 股四头肌线粒体PTP开放程度的检测结果23-24
• 4.3 骨骼肌线粒体ATP酶活性的检测情况24-25
• 4.4 骨骼肌线粒体呼吸链复合物CⅢ活性的检测情况25-26
• 4.5 骨骼肌线粒体呼吸链复合物CⅣ活性的检测情况26-28
• 5 分析与讨论28-31
• 5.1 姜黄素结合递增负荷有氧运动对中老年大鼠骨骼肌线粒体PTP开放程度变化情况28
• 5.2 姜黄素结合递增负荷有氧运动对中老年大鼠骨骼肌线粒体ATP酶活性变化情况28-29
• 5.3 姜黄素结合递增负荷有氧运动对中老年大鼠骨骼肌线粒体CⅢ活性变化情况29
• 5.4 姜黄素结合递增负荷有氧运动对中老年大鼠骨骼肌线粒体CⅣ活性变化情况29-31
• 6 研究结论31-32
• 参考文献32-34
• 文献综述34-48
• 参考文献44-48
• 附录48-49
• 致谢49

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本文编号：576941