基于金磁复合微粒和荧光纳米粒子的肌红蛋白检测方法

发布时间：2017-03-26 17:13

  本文关键词：基于金磁复合微粒和荧光纳米粒子的肌红蛋白检测方法，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：免疫检测技术是基于抗原-抗体反应的检测技术,已普遍用于临床检测,食品安全检测,环境监测等多个领域。本文以肌红蛋白为研究对象,将金磁复合微粒和荧光纳米硅小球引入到免疫检测中,在研究制备金磁复合微粒的基础上,建立了基于金磁复合微粒和荧光纳米小球的免疫分析技术,进一步拓展了纳米粒子在免疫检测中的应用。主要研究结果如下:1.通过层层组装的方法制备金磁复合微粒,以溶剂热法制备Fe3O4纳米粒子(MNPs),对MNPs进行硅包埋和羧基功能化。在此基础上再进行表面BSA修饰和金包埋,制得金磁复合微粒。透射电镜(TEM)结果表明,金磁复合微粒是由一层20nm左右的金纳米粒子吸附在Fe3O4纳米粒子表面所形成的,其粒径均一,分散性良好;2.制备三种荧光纳米粒子,荧光硅纳米粒子,荧光聚丙烯酰胺聚烯酸共聚物纳米粒子,荧光PAAAM包埋的纳米硅小球。先采用St?ber法制备硅纳米小球,硅纳米小球偶联Rhodamine red X(Rh X)后羧基功能化制备基功能化的荧光硅纳米小球(SNP@Rh X);用反相微乳法制备出PAAAM纳米小球后偶联Rh X后制得荧光聚丙烯酰胺聚烯酸共聚物纳米粒子(PAAAM@Rh X);硅纳米小球用3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MPS)修饰后,再在表面聚合一层PAAAM后偶联Rh X制得聚丙烯酰胺聚烯酸共聚物包埋的荧光纳米硅小球(SNP@PAAAM@Rh X)TEM结果表明三种荧光纳米小球都具有很好的分散性;通过实验确定荧光硅纳米小球和PAAAM包埋的荧光纳米硅小球的Rh X的最佳偶联量为1%(W/W);对比三种荧光纳米粒子后选择了荧光硅纳米粒子对肌红蛋白进行检测;3.构建了一种检测肌红蛋白的新方法,在这种方法中使用金磁复合微粒作为固相载体分离和富集肌红蛋白,以荧光纳米粒子作为定量检测手段,对肌红蛋白实现了快速检测,该检测方法的检测时间不超过30 min,在浓度为0~250 ng/mL的范围内拥有良好的线性关系(R2=0.993),其理论最低检测限达到0.28 ng/mL,并且拥有很好的重复性和选择性。
【关键词】：金磁复合微粒 荧光纳米粒子 免疫检测 肌红蛋白 磁性纳米粒子 硅纳米粒子
【学位授予单位】：湖北工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TB383.1;O657.3
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 绪论10-25
• 1.1 免疫检测技术概述10-16
• 1.1.1 标记免疫检测技术10
• 1.1.2 标记免疫检测技术的原理10-12
• 1.1.3 标记免疫检测技术的分类12-16
• 1.2 纳米粒子的性质及其免疫检测中的应用16-24
• 1.2.1 纳米粒子的性质16-17
• 1.2.2 纳米粒子在免疫检测中的应用17-24
• 1.3 本论文的选题思路和研究内容24-25
• 第二章 金磁复合微粒的制备25-38
• 2.1 前言25-26
• 2.2 本章内容26
• 2.3 材料与方法26-30
• 2.3.1 试剂26-27
• 2.3.2 仪器27
• 2.3.3 Fe_3O_4磁性纳米粒子的制备27-28
• 2.3.4 Fe_3O_4磁性纳米粒子的硅包埋和羧基功能化28-29
• 2.3.6 组装制备金磁复合微粒29
• 2.3.7 性能表征29-30
• 2.4 结果与讨论30-36
• 2.4.1 Fe_3O_4磁性纳米粒子的表征30-31
• 2.4.2 羧基功能化的Fe_3O_4@SiO_2复合微粒的表征31-33
• 2.4.3 FT-IR图谱33
• 2.4.4 考察BSA的修饰量33-34
• 2.4.5 金磁复合微粒的UV-Vis图谱34-35
• 2.4.6 金磁复合微粒的形态表征35-36
• 2.4.7 金磁复合微粒的磁性表征36
• 2.5 本章总结36-38
• 第三章 荧光纳米粒子的制备38-49
• 3.1 前言38-39
• 3.1.1 荧光检测技术38
• 3.1.2 荧光纳米粒子38-39
• 3.2 本章内容39-40
• 3.3 材料与方法40-44
• 3.3.1 试剂40
• 3.3.2 仪器40-41
• 3.3.3 硅纳米粒子的制备41
• 3.3.4 荧光硅纳米粒子的制备41-42
• 3.3.5 荧光PAAAM纳米粒子的制备42
• 3.3.6 荧光SNP@PAAAM纳米粒子的制备42-43
• 3.3.7 性能表征43-44
• 3.4 结果与讨论44-48
• 3.4.1 三种荧光纳米粒子的形态表征44-46
• 3.4.2 三种荧光纳米粒子的FT-IR图谱46-47
• 3.4.3 荧光分析47
• 3.4.4 稳定性考察47-48
• 3.5 本章小结48-49
• 第四章 肌红蛋白的检测49-56
• 4.1 前言49
• 4.2 本章内容49-50
• 4.3 实验与材料50-52
• 4.3.1 试剂50
• 4.3.2 仪器50
• 4.3.3 免疫金磁微粒的制备50-51
• 4.3.4 免疫荧光硅纳米粒子的制备51
• 4.3.5 检测全血样中的肌红蛋白51-52
• 4.4 结果与讨论52-55
• 4.4.1 免疫金磁复合微粒和免疫荧光硅纳米粒子的表征52-53
• 4.4.2 建立检测标准曲线53-54
• 4.4.3 评估最低检测限54
• 4.4.4 检测方法的重复性分析54-55
• 4.4.5 检测方法的选择性分析55
• 4.5 本章小结55-56
• 第五章 总结与展望56-57
• 参考文献57-61
• 硕士期间的成果61-62
• 致谢62

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 顾仁敖;陈三朋;;伏安免疫检测[J];苏州大学学报(自然科学);1991年03期

2 祁妍华;;表面增强拉曼散射标记免疫检测的再生性研究[J];中国医学创新;2013年15期

3 李汝宜,赖青莲,麻文英;聚苯乙烯免疫检测球珠的表层改性及其性能[J];高分子学报;1987年06期

4 蒋芸;崔颜;姚建林;顾仁敖;;表面增强拉曼光谱研究以4,4'-联吡啶为标记分子的免疫检测[J];化学学报;2006年03期

5 杨丽丽;王振国;王明泰;牟峻;邹明强;李锦丰;王楠;钱爱东;;新城疫病毒流式微球免疫检测新方法[J];分析化学;2008年01期

6 赵海鹰,倪一,姜维,罗培青,黄梅珍,窦晓鸣;纳米近场中的生化学免疫检测的研究[J];中国科学(B辑 化学);2005年01期

7 孔涛;李小兵;刘国文;谢光洪;张志刚;张q

本文编号：269123