基于二维埃及蓝和金属有机骨架纳米片的磷酸化肽选择性富集新方法

发布时间：2021-01-12 01:04

　　蛋白质磷酸化在调控生命活动中发挥重要作用。利用蛋白组学技术大规模分析磷酸化蛋白的主要障碍在于复杂样品中痕量磷酸化蛋白的高效富集。针对这个问题,研究工作者发展了“自下而上”样品预处理和质谱（MS）分析方法,将蛋白酶解后的磷酸化肽段进行富集,利用质谱实现磷酸化蛋白的检测。此方法的关键在于磷酸化肽段的高选择性富集。目前,已有许多材料和方法策略用于磷酸化肽段的高效富集。但在选择性富集特定磷酸化肽方面进展不多。本论文将二维片层材料应用于富集磷酸化肽,开展了基于埃及蓝和金属有机骨架纳米片的研究工作。具体的研究内容和取得的研究进展如下:1、基于剥离的二维埃及蓝纳米片对多磷酸化肽的特异性富集方法研究从复杂生物样品中富集低丰度的磷酸化肽对于研究磷酸化蛋白具有重要的意义。但是选择性地富集多磷酸化肽却有很少报道。在本体系中,我们合成了三种二维纳米片,包括CaCuSi4O10纳米片,SrCuSi4O10纳米片和BaCuSi4O10纳米片,它们是首次应用于富集磷酸化肽。二维CaCuSi4OH)纳米片有富集多磷酸化肽的特异性效果,并且在酸度以及有机溶剂比例改变的条件下,这种特异性富集效果不会改变。二维CaCuSi... 

【文章来源】：南京师范大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１蛋白质组学概述示意图??

关键的调控作用在功能化蛋白质的形成过程中的规律性无法在基因水平上得到??答案。因此，蛋白质翻译后修饰现己成为蛋白质组研宄中的重要内容之一。截至??目前，已经有报道过的翻译后修饰方式有１５０多种（如图１．２），常见的类型有磷??酸化、甲基化、乙酰化、糖基化、泛素化和亚硝基化修饰等。其中研宄较多的有??磷酸化方式和糖基化方式８。??祕??Ｒｉｂｏｓｏｍｅ??￡?．?Ｈｙｄｒｏｘｙｌａｔｉｏｎ?ｉ?Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ?容，＾??．Ｒ?Ａｔｔｅｃｈ？ｓ?ａ?ｈｙｄｒｏｘｙｌ?Ａｄｄｓ?ａ?ｐｈｏｓｐｈａｔｅ?ｔｏ?Ｍ，??ｇｒｏｕｐ?（－ＯＨ）?ｔｏ?ａ?ｓｉｄｅ?ｓｅｒｉｎｅ，?ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ?ｏｒ??ｔｓ?ｖ?ｄｗｉｎ?ｏｆ?ａ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｔｙｒｏｓｉｎｅ?°?１?＾??＼?＾?、?／??＾?Ｍｅｔｈｙｌａｔｌｏｎ?Ｇｉｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ?篆：??／?Ａｄｄｓ?ａ?ｍｅｔｈｙｌ?ｇｒｏｕｐ，?＾?Ａｔｔａｃｈｅｓ?ａ?ｓｕｇａｒ，?ｕｓｕａｌｌｙ??ｕｓｕａＢｙ?ａｔ?ｌｙｓｉｎｅ?ｏｒ?Ｍ?，ｔｏ?ａｎ?Ｖ?ｏｒ?Ｗ?Ｉｎ?ａｎ??＊?ａｒｇｉｎｉｎｅ?ｒｅｓｉｄｕｅｓ?ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｓｉｄｅ?ｃｈａｉｎ?＇■??｛?１??ｉ．?Ｌｉｐｌｄａｔｉｏｎ?、?人？Ｕｂｉｑｕｌｔｉｎａｔｉｏｎ?￡?．，－４ＳＳ＞??＇＇＾?＾?＾?

?ｐｒｏｔｅｉｎ??Ｐｉ??图１．３蛋白质的磷酸化和去磷酸化过程??根据氨基酸中所含Ｒ基的不同，蛋白质中的可逆磷酸化过程主要分为４类：??（１）?０位磷酸化，是最为常见的一种磷酸化类型，通过羟基氨基酸形成磷酸化，??如酪氨酸、苏氨酸或丝氨酸，三者的比例为１：?２００：?１８００；?（２）Ｎ位磷酸化，磷??酸化的形成主要通过精氨酸、组氨酸或赖氨酸；（３）?Ｓ位磷酸化，通过半胱氨酸形??成磷酸化；（４）磷酸化的酰基，通过精氨酸、组氨酸或赖氨酸形成磷酸化。磷酸化??氨基酸具有不同的化学稳定性，相比于后三种，第一种比较稳定，也是研宄最多??的，目前已形成较为成熟的研究方法。鉴于磷酸化修饰过程在生命活动中所展现??出的重要意义


本文编号：2971825