纳米载体表面PEG化程度的控制及其在药物递送的研究

发布时间：2021-05-19 07:52

　　纳米药物载体可通过实体瘤的高通透性和滞留效应（EPR）在肿瘤部位积累,增加药物的含量,提高效果,降低副反应,具有应用前景。纳米载体经注射入血液循环,易被单核吞噬系统（MPS）识别并摄取,并被清除。纳米药物载体表面涂覆聚乙二醇（PEG）,可通过空间立体障碍,减少血液中蛋白吸附。目前已经上市和具有临床转化前景的纳米载体几乎都经过PEG化修饰,如Genexol-PM胶束化紫杉醇药物,聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段聚合物组成的荷载紫杉醇的纳米颗粒NK105。纳米载体PEG化（如表面PEG长度和密度）程度对其生物学行为产生显著影响,但高分子纳米载体表面的PEG化程度的控制一直未能有效解决,难以客观评价高分子聚合物纳米载体PEG化程度对体内命运影响的规律。本论文旨在调控高分子纳米药物载体的表面PEG化程度,在减少对其它纳米特性的干扰情况下,研究纳米药物载体表面PEG化程度对其体内生物学行为的影响,并应用于药物递送研究。论文的主要内容和结论如下:1、发展了调控聚合物纳米颗粒表面PEG密度不同、其它纳米特性相近的方法,并系统研究了表面PEG密度对纳米颗粒体内生物学行为的影响。通过将聚己内酯（PCL）均聚物掺... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：109 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
    1.1 癌症治疗的现状和瓶颈
    1.2 纳米载药系统
        1.2.1 纳米载药系统的定义
        1.2.2 纳米载药系统的分类
    1.3 纳米载体所具有的各种特性及其影响
        1.3.1 纳米载体具有的各种纳米特性
        1.3.2 不同纳米特性对其颗粒体内命运的影响
    1.4 纳米特性对载体生物学特性影响的研究面临的困境
    1.5 本课题的选题目的及主要研究内容
    参考文献
第二章 聚合物纳米颗粒表面PEG密度的调控及其对体内生物学效应的影响
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 主要材料
        2.2.2 细胞株
        2.2.3 实验动物
    2.3 实验方法
        2.3.1 聚合物纳米颗粒的制备
        2.3.2 纳米颗粒的粒径分布及表面电势测定
        2.3.3 纳米颗粒的平均分子质量测定
        2.3.4 纳米颗粒的形貌观察
        2.3.5 代谢动力学测定
        2.3.6 蛋白吸附实验
        2.3.7 肝脏和脾脏中纳米颗粒定量
        2.3.8 体外细胞摄取纳米颗粒及定量
        2.3.9 肿瘤组织中纳米颗粒定量
        2.3.10 体内肿瘤细胞摄取纳米颗粒及定量
        2.3.11 肿瘤抑制
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 调控纳米颗粒尺寸及表面PEG密度
        2.4.2 制备PEG密度不同而粒径相同的纳米颗粒
        2.4.3 高PEG密度显著延长纳米颗粒体内循环时间
        2.4.4 高PEG密度增强纳米颗粒在肿瘤部位富集
        2.4.5 高PEG密度增强体内肿瘤细胞对纳米颗粒摄取
        2.4.6 高PEG密度增强载药纳米颗粒抗肿瘤作用
    2.5 本章小结
    参考文献
第三章 聚合物纳米颗粒表面PEG长度对其体内生物学效应的影响
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 主要材料
        3.2.2 动物
    3.3 实验方法
        3.3.1 PEG-PCL嵌段聚合物的合成
        3.3.2 表面不同PEG长度的纳米颗粒的制备
        3.3.3 PCL-RhoB荧光标记及载药(DTXL)纳米颗粒的制备
        3.3.4 动态光散射仪检测纳米颗粒稳定性
        3.3.5 细胞培养及传代
        3.3.6 MDA-MB-231乳腺癌模型构建
        3.3.7 MDA-MB-231-GFP细胞系构建
        3.3.8 MDA-MB-231-GFP乳腺癌模型构建
        3.3.9 B16黑色素瘤小鼠模型构建
        3.3.10 流式细胞术(FACS)检测纳米颗粒进入MDA-MB-231细胞的能力
        3.3.11 流式细胞术(FACS)检测体内纳米颗粒进入肿瘤细胞的能力
        3.3.12 黑色素瘤小鼠生长周期实验
        3.3.13 肿瘤生长抑制实验
        3.3.14 PCL-RhoB标记的纳米颗粒荧光定量
        3.3.15 超高效液相色谱(UPLC)检测细胞中的荧光颗粒含量
        3.3.16 流式细胞仪分选MDA-MB-231-GFP乳腺癌细胞
        3.3.17 分离不同PEG长度纳米颗粒表面的吸附蛋白
        3.3.18 聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)检测颗粒表面吸附的蛋白含量
        3.3.19 激光共聚焦显微镜(LSCM)检测纳米颗粒进入MDA-MB-231细胞的能力
        3.3.20 肿瘤组织冰冻切片
        3.3.21 免疫组化
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 调控表面不同PEG长度纳米颗粒的尺寸
        3.4.2 调控不同PEG长度纳米颗粒的表面PEG密度
        3.4.3 不同PEG长度而其它特性相同的纳米颗粒性质表征
        3.4.4 不同PEG长度而其它纳米特性相同的纳米颗粒药物代谢动力学
        3.4.5 不同PEG长度而其它纳米特性相同的纳米颗粒肿瘤富集和肿瘤抑制
    3.5 本章小结
    参考文献
第四章 阳离子脂质辅助荷载他克莫司的药物载体用于溃疡性结肠炎治疗
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 主要材料
        4.2.2 主要药品及试剂
        4.2.3 动物
    4.3 实验方法
        4.3.1 纳米颗粒制备及表征
        4.3.2 纳米颗粒载药(FK506)量检测
        4.3.3 体外药物释放
        4.3.4 诱导结肠炎小鼠模型
        4.3.5 结肠部位颗粒富集
        4.3.6 结肠组织中纳米颗粒分布
        4.3.7 脂质辅助载药(FK506)纳米颗粒体内治疗实验
        4.3.8 MPO和TNF-α分析
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 脂质辅助荷载他克莫司FK506纳米颗粒的制备及性状表征
        4.4.2 体外胃肠环境模拟纳米载体中他克莫司FK506药物释放
        4.4.3 阳离子脂质辅助的纳米颗粒CLANs增强结肠部位颗粒富集
        4.4.4 阳离子脂质辅助的纳米颗粒CLANs增强结肠部位粘膜吸附能力
        4.4.5 阳离子脂质辅助的纳米颗粒CLANs减缓葡聚糖硫酸钠DSS诱导的结肠炎恶化程度
        4.4.6 组织学分析阳离子脂质辅助的纳米颗粒CLANs抑制结肠组织损伤
    4.5 本章小结
    参考文献
附录一 主要仪器设备
附录二 常规试剂
附录三 主要溶液配制
附录四 常规实验方法
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]Combination of corticosteroids and 5-aminosalicylates or corticosteroids alone for patients with moderate-severe active ulcerative colitis: A global survey of physicians’ practice[J]. Shomron Ben-Horin,Jane M Andrews,Konstantinos H Katsanos,Florian Rieder,Flavio Steinwurz,Konstantinos Karmiris,Jae Hee Cheon,Gordon William Moran,Monica Cesarini,Christian D Stone,Doron Schwartz,Marijana Protic,Xavier Roblin,Giulia Roda,Min-Hu Chen,Ofir Har-Noy,Charles N Bernstein.  World Journal of Gastroenterology. 2017(16)
[2]Molecular mechanism of action of anti-tumor necrosis factor antibodies in inflammatory bowel diseases[J]. Ulrike Billmeier,Walburga Dieterich,Markus F Neurath,Raja Atreya.  World Journal of Gastroenterology. 2016(42)



本文编号：3195416