基于距离和荧光检测方法的免疫纸芯片研究
发布时间：2021-06-12 04:44
纸质微流控芯片也称为纸质微流控分析装置（microfluidic paper-based analytical devices,μPAD）,是通过各种加工技术,在纸载体之上制作出具有一定结构的亲/疏水微细通道,从而将分析、检测集于一体的新型研究平台;具有成本低、制作简单、化学相容性好等特点而被广泛应用到环境监测、食品安全及疾病诊断领域。本研究论文以用于医疗检测领域的免疫纸分析芯片为研究对象,以建立纸上简单易行的检测模式及同时测定方法为目的,发展了一种实现纸上肿瘤标志物测定的距离检测模式;利用具有同一激发,不同发射波长的量子点标记在检测抗原上,实现了同一区域的不同肿瘤标志物测定的荧光检测模式;同时,利用等离子体技术,发展了一种新型聚苯乙烯微孔板上抗原抗体的快速固定化方法。本研究论文分为两部分,第一部分为综述,主要介绍微流控纸芯片的发展历程及纸上距离检测和荧光检测方法。第二部分为研究报告,由三部分构成,具体内容如下。一、基于纸芯片免疫分析方法距离检测癌胚抗原（CEA）的研究本研究工作建立了一种半定量测定癌胚抗原的纸上距离检测方法。利用沉淀型3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）作为距离...
【文章来源】：陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２基于纸芯片比色分析法检测卡那霉素示意图??－－
于京华Ｍ研究小组使用丁丨〇２纳米颗粒／多壁碳纳米管作为标签，基于壳聚糖修饰??的纸芯片，结合化学发光免疫分析法，成功实现丫血清中前列腺特异性蛋白（ＰＳＡ）的检??测。原理如图１－３所示，利用壳聚糖－戊二醛交联反应实现捕获抗体的间定，将Ｔｉ０２纳米??颗粒结合在多壁碳纳米管上，再与二抗交联，作为信号抗体，实现信号的增敏。通过双抗??体夹心免疫反应后，再加入化学发光反应试剂，形成ｌｕｍｉｎｏｌ－对碘苯船－Ｈ２Ｏ２化学发光体??系，实现ＰＳＡ的灵敏检测。??■⑴?（２）?（３）??＼，?丨?Ｌｕｍｉｎｏ！－Ｈ，〇３／ＴｉＯ，??—?Ｉ??，?＿１＿＿??－ｒ??图１－３基于纸芯片化学发光检测原理图??Ｆｉｇ．?１－３?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ａｎｄ?ａｓｓａｙ?ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｍｉｃｒｏＨｕｉｄｉｃ?ｐａｐｅｒ－ｂａｓｅｄ?ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ?（ＣＬ）??ｉｍｍｕｎｏｄｅｖｉｃｅ?ｉｎ?ＣＬ?ｄｅｔｅｃｔｏｒ??（３）基于纸芯片电化学检测法??基于纸芯片电化学检测法，是以纸作为载体，代替传统的固体电极，在纸芯片上建立??电极的检测方法
荧光检测法因其选择性强、分析灵敏度高、使用简便等优点而得到较广泛的应用，常??与量子点相结合用于物质的检测。２０１７年，Ｃｈｅｎ研究小组基于量子点分子印迹聚合物三??维网络结构与三维折纸微流控芯片相结合，荧光分析法检测藻蓝蛋白，原理如图１－６所示。??通过分子印迹法制作ｐａｐｅｒ＠ＱＤｓ＠ＰＣ－ＭＩＰｓ，当加入藻蓝蛋白后，与识别位点相结合，使??ＱＤｓ荧光猝灭。藻蓝蛋白的量与荧光强度成反比，从而实现藻蓝蛋白的检测。??ｎｕ〇ｒｃＭ？＜Ｍ＊??９ｐ＞ｐｗｃｒｔｕｉ〇Ｍ?９〇［ｈ?〇?ｌｔｅ（〇ｃｎ（Ｕｏｎ?ｔｉｌｅ?＾Ｑｕ？？ｃｌ？（ｎ｜ＱＤ？Ｎ＾??图１－６基于纸芯片荧光检测藻蓝蛋白原理图??Ｆｉｇ．?１－６?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｓｅｎｓｉｎｇ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?ｐａｐｅｒ＠ＱＤｓ＠ＰＣ－ＭｌＰｓ??７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]多种肿瘤标志物在结直肠癌患者术后腹腔引流液中水平的表达与疾病的相关性研究[J]. 张海林,贾爱萍,邢丽. 国际检验医学杂志. 2014(01)
本文编号：3225975
【文章来源】：陕西师范大学陕西省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２基于纸芯片比色分析法检测卡那霉素示意图??－－
于京华Ｍ研究小组使用丁丨〇２纳米颗粒／多壁碳纳米管作为标签，基于壳聚糖修饰??的纸芯片，结合化学发光免疫分析法，成功实现丫血清中前列腺特异性蛋白（ＰＳＡ）的检??测。原理如图１－３所示，利用壳聚糖－戊二醛交联反应实现捕获抗体的间定，将Ｔｉ０２纳米??颗粒结合在多壁碳纳米管上，再与二抗交联，作为信号抗体，实现信号的增敏。通过双抗??体夹心免疫反应后，再加入化学发光反应试剂，形成ｌｕｍｉｎｏｌ－对碘苯船－Ｈ２Ｏ２化学发光体??系，实现ＰＳＡ的灵敏检测。??■⑴?（２）?（３）??＼，?丨?Ｌｕｍｉｎｏ！－Ｈ，〇３／ＴｉＯ，??—?Ｉ??，?＿１＿＿??－ｒ??图１－３基于纸芯片化学发光检测原理图??Ｆｉｇ．?１－３?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ａｎｄ?ａｓｓａｙ?ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｍｉｃｒｏＨｕｉｄｉｃ?ｐａｐｅｒ－ｂａｓｅｄ?ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ?（ＣＬ）??ｉｍｍｕｎｏｄｅｖｉｃｅ?ｉｎ?ＣＬ?ｄｅｔｅｃｔｏｒ??（３）基于纸芯片电化学检测法??基于纸芯片电化学检测法，是以纸作为载体，代替传统的固体电极，在纸芯片上建立??电极的检测方法
荧光检测法因其选择性强、分析灵敏度高、使用简便等优点而得到较广泛的应用，常??与量子点相结合用于物质的检测。２０１７年，Ｃｈｅｎ研究小组基于量子点分子印迹聚合物三??维网络结构与三维折纸微流控芯片相结合，荧光分析法检测藻蓝蛋白，原理如图１－６所示。??通过分子印迹法制作ｐａｐｅｒ＠ＱＤｓ＠ＰＣ－ＭＩＰｓ，当加入藻蓝蛋白后，与识别位点相结合，使??ＱＤｓ荧光猝灭。藻蓝蛋白的量与荧光强度成反比，从而实现藻蓝蛋白的检测。??ｎｕ〇ｒｃＭ？＜Ｍ＊??９ｐ＞ｐｗｃｒｔｕｉ〇Ｍ?９〇［ｈ?〇?ｌｔｅ（〇ｃｎ（Ｕｏｎ?ｔｉｌｅ?＾Ｑｕ？？ｃｌ？（ｎ｜ＱＤ？Ｎ＾??图１－６基于纸芯片荧光检测藻蓝蛋白原理图??Ｆｉｇ．?１－６?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ａｎｄ?ｔｈｅ?ｓｅｎｓｉｎｇ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?ｐａｐｅｒ＠ＱＤｓ＠ＰＣ－ＭｌＰｓ??７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]多种肿瘤标志物在结直肠癌患者术后腹腔引流液中水平的表达与疾病的相关性研究[J]. 张海林,贾爱萍,邢丽. 国际检验医学杂志. 2014(01)
本文编号：3225975
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