苦参生物碱的吸脱附研究及氧化苦参碱的分离

发布时间：2017-05-20 04:07

  本文关键词：苦参生物碱的吸脱附研究及氧化苦参碱的分离，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本文主要对苦参生物碱在大孔树脂上的吸脱附行为进行研究,包括吸附等温曲线、吸附动力学行为及动态吸脱附过程等；并以溶剂萃取的苦参总碱为原料,采用大孔树脂柱层析法分离其中的氧化苦参碱,重点考察了各工艺条件对分离效果的影响。 首先,考察了苦参生物碱的分析检测方法。鉴于检测方法应符合快速、灵敏、准确的原则,考虑到实验室已有苦参碱标样和氧化苦参碱标样,我们提出了采用酸碱滴定法、TLC、HPLC和GC-MS四种方法对苦参生物碱进行定性、定量分析的方案。首先采用酸碱滴定法对溶剂提取的苦参总碱进行含量测定,并对总碱进行HPLC分析,其次在苦参生物碱的吸脱附研究中,采用TLC对分离样品进行定性和半定量分析。在氧化苦参碱的分离中,采用HPLC跟踪检测洗脱样品,并采用GC-MS对样品中的氧化苦参碱进行准确定量。 其次,采用溶剂萃取法从苦参中得到苦参总碱,通过酸碱滴定,确定了苦参总碱的收率为0.803%,HPLC分析发现,总碱中成分复杂,苦参碱的保留时间为10.099min,含量仅为5.06%,氧化苦参碱的保留时间为14.953min,含量为21.08%。另外,保留时间在12.6min附近具有较强吸收峰的物质,经查阅文献确定为氧化槐果碱,含量为5.56%。 再次,对苦参生物碱在大孔树脂上的吸脱附进行研究。首先,从九种大孔树脂中筛选出适合吸附苦参生物碱的H103树脂,其吸附率为85.86%,通过研究苦参生物碱在H103大孔树脂上的吸附等温曲线和吸附动力学行为,发现其符合Freundlich方程,所选出的H103大孔树脂具有很大的饱和吸附量,吸附能力较强。吸附过程符合二级动力学方程,吸附平衡在100mmin内就可达到,吸附速度较快,进一步确定了所筛选出的H103大孔树脂适合后续的动态吸脱附实验。动态吸脱附研究发现,采用梯度洗脱,以30%乙醇-25%氨水(115：1,v/v)、80%乙醇为洗脱剂,苦参碱和氧化苦参碱可以很好的分离。经计算苦参碱的收率为90.1%,氧化苦参碱的收率为85.3%。 最后,筛选出对苦参总碱吸附性能较好的H103树脂,利用大孔树脂柱层析法从苦参总碱中分离氧化苦参碱。确定了分离氧化苦参碱的洗脱剂为30%乙醇-25%氨水(115：1,v/v)。对不同工艺条件下所得的样品进行HPLC分析,最终得出最优的柱层析工艺条件：H103树脂采用乙醇湿法装柱,树脂柱的高径比选为33：1,30%乙醇-25%氨水(115：1,v/v)为洗脱剂以2.0mL/min的流速洗脱。为了进一步确定样品中氧化苦参碱的准确纯度,又对样品作了GC-MS分析,GC-MS结果表明,氧化苦参碱的峰面积百分数高达91.53%,经计算富集率为78.19%。可见,采用H103大孔树脂柱层析法可以实现氧化苦参碱的较好分离。
【关键词】：苦参 大孔树脂 苦参生物碱 氧化苦参碱 分离
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：TQ028.8
【目录】：

• 目录4-8
• CATALOG8-12
• 摘要12-14
• ABSTRACT14-16
• 第一章 文献综述16-28
• 1.1 苦参中的主要有效成分16-18
• 1.1.1 生物碱16-17
• 1.1.2 黄酮类化合物17
• 1.1.3 挥发油成分17
• 1.1.4 其它类型的化合物17-18
• 1.2 苦参中生物碱类物质的生物活性18-20
• 1.2.1 抗肿瘤研究18
• 1.2.2 抗病毒性心肌炎、心律失常研究18
• 1.2.3 抗肝损伤、肝纤维化研究18-19
• 1.2.4 抗炎抑菌作用研究19
• 1.2.5 平喘作用研究19
• 1.2.6 免疫调节及抗过敏研究19
• 1.2.7 苦参及其生物碱在植物保护方面的活性研究19-20
• 1.3 苦参中生物碱的提取分离及纯化20-21
• 1.4 大孔吸附树脂21-24
• 1.4.1 大孔吸附树脂的种类22
• 1.4.2 大孔吸附树脂的预处理22
• 1.4.3 大孔吸附树脂的吸脱附原理22
• 1.4.4 影响大孔吸附树脂分离效果的因素22-24
• 1.4.5 大孔吸附树脂的再生24
• 1.4.6 大孔吸附树脂的应用24
• 1.5 国内外研究现状24-25
• 1.6 本研究的目的、意义和内容25-28
• 1.6.1 研究的目的、意义25-26
• 1.6.2 研究的主要内容26-28
• 第二章 苦参碱、氧化苦参碱的测定方法28-38
• 2.1 试验仪器、试剂与材料28-29
• 2.1.1 主要仪器和设备28
• 2.1.2 原料和试剂28-29
• 2.2 有苦参生物碱测定方法的分析29-30
• 2.2.1 苦参生物碱的定性测定方法29
• 2.2.2 苦参生物碱的定量测定方法29-30
• 2.3 本研究拟建立的苦参生物碱检测方法分析30-32
• 2.3.1 酸碱滴定法31
• 2.3.2 薄层色谱法31
• 2.3.3 高效液相色谱法31-32
• 2.3.4 气相色谱-质谱联用法32
• 2.4 苦参碱标样、氧化苦参碱标样的HPLC分析32-36
• 2.4.1 测试条件32-33
• 2.4.2 苦参碱标样、氧化苦参碱标样的HPLC谱图33-35
• 2.4.3 标准曲线的绘制35-36
• 2.5 本章小结36-38
• 第三章 溶剂萃取法萃取苦参总碱38-43
• 3.1 试验仪器、试剂与材料38
• 3.1.1 主要仪器与设备38
• 3.1.2 原料与试剂38
• 3.2 实验内容38-40
• 3.2.1 实验条件38-39
• 3.2.2 实验步骤39-40
• 3.2.3 酸碱滴定条件及HPLC分析条件40
• 3.3 结果与讨论40-41
• 3.3.1 溶剂萃取得到的苦参总碱的酸碱滴定分析40
• 3.3.2 溶剂萃取得到的苦参总碱的HPLC分析40-41
• 3.4 本章小结41-43
• 第四章 苦参生物碱在大孔树脂上的吸脱附研究43-57
• 4.1 试验仪器、试剂与材料43-44
• 4.1.1 主要仪器与设备43-44
• 4.1.2 材料与试剂44
• 4.2 实验内容44-47
• 4.2.1 大孔吸附树脂的预处理44-45
• 4.2.2 大孔吸附树脂的筛选45
• 4.2.3 吸附等温曲线的测定45-46
• 4.2.4 吸附动力学行为的测定46
• 4.2.5 H103大孔吸附树脂分离纯化苦参碱与氧化苦参碱46-47
• 4.3 结果与讨论47-55
• 4.3.1 不同型号大孔树脂的吸附效果比较47-48
• 4.3.2 绘制吸附等温曲线48-50
• 4.3.3 吸附动力学行为的研究50-53
• 4.3.4 动态吸脱附过程实验条件的研究53-55
• 4.3.5 分离样品中苦参碱和氧化苦参碱收率的测定55
• 4.4 本章小结55-57
• 第五章 H103大孔吸附树脂分离氧化苦参碱57-69
• 5.1 试验仪器、试剂与材料57-58
• 5.1.1 主要仪器与设备57
• 5.1.2 材料和试剂57-58
• 5.2 实验内容58-60
• 5.2.1 溶剂萃取的苦参总碱在大孔树脂上的静态吸脱附58-59
• 5.2.2 大孔树脂柱层析法分离氧化苦参碱59-60
• 5.2.3 分离样品的分析检测60
• 5.3 结果与讨论60-67
• 5.3.1 苦参总碱在大孔树脂上的吸脱附研究60-63
• 5.3.2 H103树脂分离氧化苦参碱工艺条件探讨63-66
• 5.3.3 在最优工艺条件下所得分离样品的GC-MS分析66-67
• 5.4 本章小结67-69
• 第六章 结论69-72
• 参考文献72-76
• 致谢76-77
• 附录：硕士期间发表学术论文77-78
• 学位论文评阅及答辩情况表78

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7 崔o，

本文编号：380610