黄秋葵花多糖的结构修饰、表征及对大肠杆菌发酵液中短链脂肪酸的影响

发布时间：2017-11-18 13:20

  本文关键词：黄秋葵花多糖的结构修饰、表征及对大肠杆菌发酵液中短链脂肪酸的影响

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【摘要】：黄秋葵[Abelmoschus esculentus(L.)Moench]为锦葵科秋葵属一年生的草本类植物,富含果胶、蛋白质、维生素、不饱和脂肪酸、多糖和黄酮,黄秋葵花多糖作为其中的主要活性成分,具有增强免疫、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤及降血糖等生理活性。多糖可促进肠道内短链脂肪酸(short chain fatty acids,简称为SCFAs)的形成,对宿主健康产生重要的影响。然而对黄秋葵花多糖进行结构修饰,修饰多糖对SCFAs的影响却鲜有报道。因此本论文在前期研究的基础上,对黄秋葵花多糖进行羧甲基化、硫酸酯化和乙酰化修饰,并对其进行结构表征,考察修饰多糖对发酵液中SCFAs的影响,为黄秋葵花多糖的应用提供参考。主要研究内容如下:(1)以黄秋葵花多糖为原料,对其进行羧甲基化、硫酸酯化和乙酰化结构修饰,采用IR、Raman、CD、AFM、SEM和TEM等方法对其进行结构表征。结果表明,羧甲基化、硫酸酯化和乙酰化黄秋葵花多糖的的取代度分别为0.636、1.265和0.168;三种修饰多糖中分别有羧甲基(-OCH2-COOH)、磺酸基及乙酰基的存在;经不同方法修饰的黄秋葵花多糖可致其分子的不对称性、链构象、分子厚度、分子间距及表面形貌发生改变。(2)研究气相色谱法分析大肠杆菌发酵液中SCFAs的预处理和分析方法并进行验证。其最佳萃取条件为:萃取溶剂为乙酸乙酯,大肠杆菌发酵液的pH值为2。GC分析条件为DB-FFAP毛细管色谱柱;氢气和空气的流速分别为37和370 mL/min,氮气的流速为2 mL/min,分流比1:10;程序升温设置:初温100°C,以10°C/min升温至180°C,保持1 min,以20°C/min程序升温至230°C保持1min,总分析时长为12.5 min;进样口温度为230°C;检测器温度250°C。结果表明,乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、异己酸、己酸和庚酸之间分离度较好,标准曲线R20.99,LOD范围为0.011-0.07 mM(S/N≥3),LOQ范围为0.037-0.233 mM(S/N≥10);日间及日内精密度较好,各标准品的日内及日间精密度分别为0.07-0.70%和0.44-2.3%(n=6);发酵液样品中各SCFAs的日内及日间精密度分别为0.58-1.44%和1.19-2.67%(n=6);标准品与发酵液样品稳定性较好,RSD%6%(n=6);除乙酸的回收率为70.22-87.83%外,其余SCFAs的回收率为82.65-104.17%。可见,该法简便、稳定、精密度较好,可用于大肠杆菌发酵液中的SCFAs的分析。(3)采用多糖对大肠杆菌E.Coli BL21进行培养,研究不同黄秋葵花多糖及修饰多糖对其发酵液中SCFAs的影响。结果表明:与空白组相比,黄秋葵花多糖可显著促进大肠杆菌发酵液中乙酸和己酸的产生,对丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸的浓度没有显著的影响。与黄秋葵花多糖组相比,羧甲基化、硫酸酯化和乙酰化黄秋葵花多糖可显著抑制大肠杆菌发酵液中乙酸、丁酸和己酸的产生,对丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸的浓度没有显著的影响。
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O636.1

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1 吴慧玉;黄秋葵花多糖的结构修饰、表征及对大肠杆菌发酵液中短链脂肪酸的影响[D];江苏大学;2016年

2 吴秋敏;黄秋葵花总黄酮的微胶囊化及其应用在冷鲜肉保鲜上的研究[D];浙江大学;2015年

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本文编号：1199932