盐析和双水相萃取法在纯化藻蓝蛋白过程中的研究

发布时间：2017-11-19 10:13

  本文关键词：盐析和双水相萃取法在纯化藻蓝蛋白过程中的研究

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【摘要】：本论文以新鲜巢湖水华蓝藻为研究对象,通过冻融破壁方法提取藻蓝蛋白粗提液,以藻蓝蛋白的纯度和得率为指标,在此基础上,研究了不同盐析剂对藻蓝蛋白提纯效果的影响和双水相法提纯藻蓝蛋白的条件。另外,探索了盐析法和双水相萃取法的结合方式。主要实验结果摘要如下：1.不同盐析剂对藻蓝蛋白提纯效果的影响研究。通过冻融破壁法获得一定量藻蓝蛋白粗提液。选取硫酸铵、柠檬酸三铵、柠檬酸钾三种盐析剂进行两步盐析实验,结合光谱扫描法选取三种盐析剂的最优投加量,最终优选出最佳的盐析剂。结果表明：硫酸铵是最佳的藻蓝蛋白盐析剂。硫酸铵盐析剂两步盐析的最佳投加量分别为1.2mol/L和2.Omol/L,藻蓝蛋白纯度可达到1.95.2.PEG-硫酸铵体系对藻蓝蛋白提纯效果的影响。以藻蓝蛋白纯度和回收率为指标,经过冻融和盐析所得的藻蓝蛋白液,再用正交法选取双水相体系中聚乙二醇的分子量和其他实验条件,之后用单因素法进一步确认不同条件对藻蓝蛋白提取效果的影响。结果表明：选用聚乙二醇1000和硫酸铵构成双水相体系。聚乙二醇质量浓度为9%,硫酸铵质量浓度为26%、使用未调节pH的原水样、NaC1质量浓度0。3.盐析法和双水相法结合方式的探索。考察了先双水相后盐析和先盐析后双水相的结合方法。结果表明,由于聚乙二醇在藻蓝蛋白液中较难去除,所以双水相萃取实验后再接盐析比较难以实现,且粗提液接双水相纯度提高没有盐析效果好,所以盐析和双水相实验相结合的方式应为盐析后接双水相。
【学位授予单位】：合肥工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TQ936;O658.2

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