用于检测超氧阴离子和多硫化氢的多响应荧光探针的合成及应用

发布时间：2017-12-18 00:07

  本文关键词：用于检测超氧阴离子和多硫化氢的多响应荧光探针的合成及应用

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【摘要】：近几年的研究表明,超氧阴离子(O2?-)是存在于细胞中的众多活性氧(ROS)中最重要的一种,其在不同的生理和病理过程中起着重要的作用。在广泛研究一氧化碳和一氧化氮之后,硫化氢(H2S)作为一种内源性气体信号分子开始被重视,被认为可在生命体内发挥重要的作用。在心血管系统和神经系统中,H2S都起到了十分重要的调节生理功能的作用。通过最近的研究发现,越来越多的证据都表明,多硫化氢(H2Sn)实际上是生理活动的信号分子,硫化氢只是多硫化氢生理活动中所释放的标志物,同时有研究表明,多硫化氢的产生是依赖于活性氧对细胞的刺激并产生于线粒体中。我们报道了两种用于检测超氧阴离子和多硫化氢的多响应近红外荧光探针。一种用于检测细胞线粒体中的超氧阴离子和多硫化氢,一种用于检测癌细胞中的超氧阴离子和多硫化氢。探针利用间硝基苯作为多硫化氢的响应基团,选取对苄基氯作为线粒体定位基团;生物素作为癌细胞的定位基团。在多种活性氧物种和活性硫物种的存在下,该探针对超氧阴离子和多硫化氢具有高选择性。我们还验证了胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和血管内皮生长因子(VEGF)对多硫化氢的产生起着重要的作用。探针还成功的应用于检测活细胞外源性以及内源性的超氧阴离子和多硫化氢,同时还应用于小鼠和荷瘤鼠模型内的荧光成像。论文共分为五章,内容如下:1、荧光探针的荧光成像技术、花菁荧光团和荧光探针的设计机理简介。综述了已发表的用于检测超氧阴离子的荧光探针和用于检测多硫化氢的荧光探针,开发具有多响应的近红外荧光探针对于研究生命过程具有极其深远的意义。2、介绍了新型多响应近红外荧光探针的设计和合成的具体步骤,并介绍了荧光探针检测超氧阴离子和多硫化氢的检测机理。3、利用合成的新型荧光探针进行体外对超氧阴离子和多硫化氢的检测,使用紫外可见分光光度计和荧光分析仪对探针的性能进行了评估,同时对荧光探针在不同pH值条件下的稳定性、选择性和化学动力学进行了分析。4、利用合成的荧光探针进行细胞内以及生物体内的超氧阴离子和多硫化氢的检测,使用激光共聚焦显微镜和小动物成像系统对探针的性能进行了评估,同时利用新型荧光探针检测细胞内线粒体中的超氧阴离子和多硫化氢,利用探针的肿瘤靶向性能,对荷瘤鼠模型进行了肿瘤靶向实验。5、对本文的主要内容进行总结。
【学位授予单位】：青海师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.3

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本文编号：1302056