褐藻胶寡糖纳米脂质体的制备及其生物学功能研究

发布时间：2017-12-20 16:07

  本文关键词：褐藻胶寡糖纳米脂质体的制备及其生物学功能研究　出处：《中国计量大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：褐藻胶寡糖是由α-L-古洛糖醛酸(GulA)、β-D-甘露糖醛酸(Man A)或者二者杂合段通过β-1,4糖苷键连接而成的一种低聚物。作为无毒、无免疫原性、可生物降解的低聚糖,褐藻胶寡糖具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化等生物学活性,提高其生物利用度可以更好地发挥其功能。脂质体是具有膜状磷脂双层分子微囊泡,作为载体能够有效运输活性物质穿过细胞膜。本课题通过响应面设计试验优化褐藻胶寡糖纳米脂质体制备的工艺参数,探讨其对南美白对虾的保水效果,并对其抗菌、抗氧化和抑制癌细胞生长作用进行研究。主要结果如下:1、采用逆相蒸发法制备褐藻胶寡糖纳米脂质体,通过单因素实验和响应值优化得到最优的制备方案:脂胆比为5.12:1,褐藻胶寡糖浓度为8.44 mg/m L,吐温含量为1.11%,外内水相之比为5.25:1,此时的包封率最高,为65.84%,粒径为323 nm。2、为了研究褐藻胶寡糖纳米脂质体的稳定性,分别从pH、温度、超声时间、贮藏时间以及模拟胃肠液环境这几个方面分析对其释放率的影响。结果表明,褐藻胶寡糖脂质体在过酸和高温环境时,其膜结构会遭到破环,稳定性发生改变;超声时间增加,也会导致脂质体的释放率上升。脂质体在4℃冰箱存放14 d,释放率不超过3%。模拟胃肠液环境的实验表明,在胃肠道中,纳米脂质体能够保护褐藻胶寡糖免受环境的影响,其脂质体的稳定性较好。3、为了提高虾仁的保水品质,以南美白对虾为原材料进行单因素实验和正交试验,得到最优保水剂配方为褐藻胶寡糖脂质体:氯化钠:碳酸氢钠:柠檬酸三钠:山梨糖醇为2:1:1:2:2。使用该保水剂处理得到的虾仁其浸渍增重率为11.76%,解冻增重率为8.18%,蒸煮损失率为7.23%。利用该配方配制褐藻胶寡糖的复合无磷保水剂,考察并比较蒸馏水、复合磷酸盐、褐藻胶寡糖复合保水剂、褐藻胶寡糖脂质体复合保水剂对虾仁的保水效果。结果表明,蒸馏水、复合磷酸盐、褐藻胶寡糖复合无磷保水剂组的虾仁浸泡增重率分别为5.37%、9.81%、10.19%,褐藻胶寡糖脂质体复合无磷保水剂组的虾仁浸泡增重率为12.02%,保水效果明显(P0.05);褐藻胶寡糖脂质体复合无磷保水剂组的虾仁解冻失水率为-8.36%,显著低于蒸馏水和复合磷酸盐处理组(6.15%和-3.70%)(P0.05),其解冻失水率与褐藻胶寡糖复合保水剂组的虾仁相比(-7.59%),无显著性差异(P0.05);褐藻胶寡糖脂质体复合保水剂组的虾仁蒸煮损失率为7.55%,显著低于蒸馏水和复合磷酸盐的处理组(30.33%和12.63%)(P0.05),其蒸煮损失率和褐藻胶寡糖复合保水剂组的虾仁(7.31%)相比,无显著性差异(P0.05)。4、牛津杯抑菌实验表明,褐藻胶寡糖脂质体对几种常见的致病菌(沙门氏菌、大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌、志贺氏菌和李斯特菌)有较好的抑制作用,且效果优于褐藻胶寡糖。体外抗氧化的研究表明,褐藻胶寡糖脂质体有清除DPPH自由基和羟基自由基的能力,在浓度为3000μg/m L时,清除率分别为45.78%和55.86%,相对于褐藻胶寡糖清除能力有着极显著的差异(P0.01)。采用MTT法、乳酸脱氢酶试剂盒、CCK法和AO/PI双染法研究褐藻胶寡糖纳米脂质体对人结肠癌细胞抑制作用。MTT实验结果表明当褐藻胶寡糖脂质体浓度为0.5 mg/m L时,细胞活性为53.23%,且效果优于褐藻胶寡糖(P0.01);乳酸脱氢酶实验结果表明当褐藻胶寡糖脂质体浓度为0.5 mg/m L时,LDH泄漏率为66.32%,其相对于褐藻胶寡糖组,具有极显著差异(P0.01);CCK实验结果表明当褐藻胶寡糖脂质体浓度为0.5 mg/m L时,细胞活性为52.04%,且效果优于褐藻胶寡糖(P0.01)。此外,AO/PI双染实验也证明了上述的结果。
【学位授予单位】：中国计量大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TS201.2;O629.12

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1 包华芳;刘t，

本文编号：1312682