基于量子点标记免疫分析技术建立火锅底料中吗啡检测方法的研究

发布时间：2018-05-27 05:19

本文选题：吗啡 + 量子点　；参考：《江苏大学》2017年硕士论文

【摘要】：调味料在我国源远流长的饮食文化中扮演着重要的角色,然而,一些非法商家和餐饮店为吸引更多顾客获取巨额利润,在火锅和烤禽类等调味汤料中添加罂粟壳、罂粟籽及其水浸物等非食品用违禁材料,罂粟壳中主要化学成分有:吗啡、罂粟碱、可待因、蒂巴因、那可汀、及罂粟壳碱等30多种类型生物碱。吗啡作为罂粟壳中最具代表性的特征生物碱,具有较强药理和毒理活性。人体长期接触容易成瘾,在身体和心理上产生严重的依赖性,我国明令禁止添加罂粟壳到食品中,罂粟壳被卫生部列入了第一批17种可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单之中。为保证食品的安全性和消费者的合法权益,构建一种快速、灵敏、有效的检测体系,对于消除餐桌饮食中不安全因素和规范食品添加剂的使用,具有十分重要的意义。本论文基于量子点标记荧光免疫分析技术,试图建立快速检测吗啡的方法。主要研究内容和结果如下:1.制备吗啡抗体,并借助间接竞争ELISA检测吗啡。将人工合成的吗啡半抗原与牛血清白蛋白偶联形成完全抗原,并采取背部皮下多点注射法免疫新西兰大耳白兔,经纯化血清制备高纯度吗啡抗体。采用间接竞争ELISA检测吗啡,结果表明,吗啡浓度在1.6×10-3-1 mg L-1范围内呈现较好的线性关系,抑制率最高可达88.9%,半抑制浓度(IC50)为0.043 mg L-1,检出限(IC15)为2×10-3 mg L-1。2.基于量子点标记吗啡抗体,建立检测吗啡的荧光免疫分析方法。利用带羧基量子点CdSe/ZnS为荧光标记物,以EDC/NHS为交联剂,将量子点与吗啡抗体生物共价偶联成荧光标记抗体,通过紫外荧光光谱、琼脂糖凝胶电泳等技术表征,表明制备的荧光标记抗体具有较好的荧光稳定性,并建立针对吗啡检测的荧光免疫分析方法。结果表明,在最佳优化条件下,测得吗啡浓度在3.2×10-4-1 mg L-1范围内呈现较好的线性关系。以火锅底料中添加罂粟壳为实际样品进行加标测定回收率实验,以吗啡为检测指示物,所建立的荧光免疫分析法测定吗啡的回收率在78.2%-87%之间,检测结果与间接竞争ELISA、HPLC法检测的结果均具有较好的一致性。3.以硝酸纤维素膜为固相载体,将量子点标记抗体作为靶向物,建立一种基于膜载体渗滤式荧光免疫分析检测技术,结果表明,该技术的吗啡最低检测限为0.01 mg L-1。并验证游离吗啡抗体与量子点均不会影响膜载体渗滤式荧光免疫分析方法对吗啡的检测,同时采用该方法对火锅底料添加罂粟壳的实际样品进行检测,采用HPLC法和间接竞争ELISA方法作为对照,检测结果具有较好的一致性。适用于现场快速检测筛选非法添加罂粟壳的火锅汤料。
[Abstract]:In order to ensure the safety of food and to regulate the use of food additives , it is very important to establish a rapid , sensitive and effective method for detecting morphine by coupling indirect competitive ELISA . The results show that the concentration of morphine is within 1.6 脳 10 - 3 - 1 mg L - 1 . The results show that the concentration of morphine is within the range of 1 . 6 脳 10 - 3 - 1 mg L - 1 . The results showed that the lowest detection limit of morphine was 0.01 mg 路 L - 1 . The results showed that the lowest detection limit of morphine was 0.01 mg 路 L - 1 . The results showed that the lowest detection limit of morphine was 0.01 mg 路 L - 1 .
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：O657.3;TS264

【参考文献】