薰衣草精油SPME提取及抑制大肠杆菌组效关系研究

发布时间：2018-10-04 19:28

【摘要】：本论文以新疆伊犁薰衣草为研究对象,建立了顶空固相微萃取(SPME)和磁性粒子结合微波辅助顶空固相微萃取(MD-SPME)快速提取薰衣草花中挥发性成分的提取方法,采用气相色谱/质谱联用(GC/MS)对其化学成分进行分析。采用多元统计分析方法对不同品种薰衣草的差异标志物进行识别,以辨别薰衣草的品种。基于薰衣草精油的气相色谱/质谱联用分析及抑制大肠杆菌的半数抑菌浓度的测定,建立了薰衣草精油化学成分与其抑制大肠杆菌的组效关系模型,并寻找与药效显著相关的成分。1)采用顶空固相微萃取-气相色谱/质谱(SPME-GC/MS)联用技术建立新疆不同品种薰衣草化学成分的快速识别模式,并结合多元统计分析方法对不同品种薰衣草的特征差异性标志物进行识别。选取薰衣草挥发性化合物中顺-β-罗勒烯、芳樟醇、乙酸芳樟酯、萜品烯-4-醇、石竹烯和石竹烯氧化物等6个代表性成分为指标进行方法考察,首先优化HS-SPME萃取条件,其最佳萃取条件为:萃取温度为55?C,萃取时间为30 min和解析时间为30 s。然后运用GC/MS法分析3个品种26批薰衣草花中挥发性成分,最后采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)对数据进行处理。结果显示:3个不同品种的薰衣草样品间的化学成分得到有效区分;筛选识别出9个不同品种薰衣草间差异显著的化学成分标志物,薰衣草特征变量组分与差异标志物分析结果一致。这表明,SPME-GC/MS结合多元统计技术可以对薰衣草复杂体系的快速鉴定、差异标志物识别提供一个可行的参考方法。2)磁性粒子微波辅助结合SPME-GC/MS快速分析新疆薰衣草干花中的挥发性成分。采用Fe3O4作为微波吸收介质,提取薰衣草干花中的挥发性成分。使用该方法萃取薰衣草中的精油成分,分离、萃取及富集只需一步即可完成。首先对萃取条件进行优化,最佳萃取条件为:30μm DVB/CAR/PDMS萃取纤维涂层,微波功率为600 W,辐射时间为15 min,Fe3O4的加入量为5 mg。然后使用GC/MS共鉴定出39个薰衣草精油的化学成分。相对标准偏差(RSD)值均小于9%,证明该方法具有较好的精密度。最后采用主成分分析(PCA)对数据进行处理,识别出薰衣草的品种和品种的特征变量组分。磁性粒子微波辅助结合SPME-GC/MS法具有简单、快速、稳定和无溶剂等优点,可用于干的植物材料的分析与鉴定。3)基于气相色谱/质谱联用(GC/MS)分析,建立薰衣草精油的化学成分与其抑制大肠杆菌的组效关系模型。采用GC/MS分析了新疆3个不同品种的13批薰衣草精油样品,以GC/MS结合保留指数对复杂未知物进行定性,确定了42个化合物。采用主成分分析(PCA)对薰衣草精油样品的GC/MS数据进行分析,13批薰衣草精油样品根据品种不同被明显的分为3个品种。采用平板菌落计数法测定了薰衣草精油对大肠杆菌的半数抑菌浓度IC50值,其值在1.36~3.05%之间。采用偏最小二乘法(Partial least squares,PLS)分析薰衣草精油的化学成分与其抑制大肠杆菌的抑菌活性之间的内在联系,结果表明,抑制大肠杆菌有较大贡献的活性物质为芳樟醇、萜品烯-4-醇、乙酸芳樟酯、α-萜品醇和乙酸薰衣草酯,其中芳樟醇是抑制大肠杆菌贡献最大的生物活性成分。此方法为薰衣草精油抑菌活性成分的辨识提供一定的方法参考。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：新疆大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：TQ654.2;O657.63

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本文编号：2251590