杂色曲霉毒素分子印迹上转换荧光传感检测研究

发布时间：2019-08-16 07:26

【摘要】：杂色曲霉毒素(Sterigmatocystin,ST)是真菌产生的次生代谢产物,常常污染粮食谷物、饲料等,有致癌、致畸、致突变的潜在危害。目前,检测杂色曲霉毒素常用的方法有层析法、高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法等。本论文建立一种简单、灵敏、低成本的荧光传感检测方法。本文基于分子印迹聚合物的高选择性和上转换纳米材料的荧光特性,研究开发了一种兼具选择性和荧光信号的聚合物,能高选择、高灵敏地识别痕量杂色曲霉毒素。首先用四水醋酸钇、四水醋酸镱、四水醋酸铒为主要材料采用热解法合成六方相上转换荧光纳米材料UCNPs(β-NaYF4:Yb3+,Er3+),用TrTton X-100进行油转水相之后再用Stober碱水解法包覆一层Si02,合成一种新型荧光载体UCNP@SiO2,然后将其用于分子印迹聚合过程中,以杂色曲霉毒素的结构类似物1,8-二羟基-蒽醌为模板分子,丙烯酰胺作为功能单体,3-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷为交联剂,采用非水相溶胶凝胶的方法合成了对杂色曲霉毒素有较高选择性的荧光分子印迹聚合物材料。对合成的荧光材料进行了透射电镜,X射线衍射,傅里叶红外光谱等表征。吸附实验结果表明:在最优条件下,荧光分子印迹聚合物随杂色曲霉毒素浓度的增大荧光增强。在杂色曲霉毒素浓度为0.050-1.0 mg L-1范围内,荧光印迹聚合物荧光增强的程度与浓度呈现出好的线性关系,杂色曲霉毒素的检出限为0.013mg L-1。为了验证实验所建立方法的实用性,本文对大米、玉米和大豆中杂色曲霉毒素进行了检测。加标回收实验表明:大米、玉米和大豆的添加浓度为50、100、200 μg kg-1,三种样品的添加回收率分别为 83.8%-88.8% (RSD1.8%)、82.1 %-87.5% (RSD4.0%)、80.6%-89.2% (RSD5.9%),说明了本文所建立的检测方法可行。
【图文】：

荧光光谱图,荧光光谱图

作选择性实验。但是真菌毒素均有很强的毒性，对环境、实验人员都存在很大的风险；逡逑此外，毒素的价格十分昂贵，不利于实验成本的节约；综合考虑，本实验一方面选取逡逑了与ＳＴ结构相近的ＤＴ邋（结构见图３－１０邋ａ）；邋—方面选取了在实际样品中和ＳＴ可能逡逑会同时存在、毒性较大的黄曲霉毒素Ｂｌ（ＡｆｌａｔｏｘｉｎＢｌ，，ＡＦＢｌ）（结构如图１－ｌｂ）和赭逡逑曲霉毒素ＯＴＡ。配制浓度为１．０邋ｍｇ邋Ｌ；１的ＳＴ溶液、ＡＦＢ１溶液和ＯＴＡ溶液作为吸附逡逑溶液，溶剂均为甲醇，准确称２．０ｍｇＵＣＮＰｓ＠ＳｉＯ２＠ＭＩＰ和ＵＣＮＰｓ＠Ｓｉ０２＠ＮＩＰ，分逡逑别吸附各竞争物溶液３邋ｍＬ，室温下充分振荡６邋ｈ后，用改造光路后的荧光分光光度逡逑计测定吸附前后聚合物的荧光强度巧ｘ邋＝９８０邋ｎｍ）。逡逑２．邋２．邋９实际样品的测定逡逑为了评价己建立的分子印迹荧光传感法检测食品中痕量ＳＴ的实用性和可行性，本逡逑实验选取了当地市售的大米、玉米和大豆作为样品进行加标回收实验。荧光分子印逡逑迹材料不但具有荧光材料的高灵敏度，同时还具备选择性吸附富集目标分子的功能，逡逑因此不需要经过固相萃取净化步骤，可吸附后直接测定。逡逑样品前处理：将大米样品用粉碎机粉碎，然后过６０目筛子得到粒径均匀的大米样逡逑品

荧光光谱图,添加量,氨水,荧光光谱图

逦７００逡逑Ｗａ邋ｖｅ邋丨邋ｅｎｔｈ（邋ｎｍ）逡逑图３－３氨水添加量条件下ｌｍｌ（ａ），２ｍｌ（ｂ）和０ｍｌ（ｃ）ＵＣＮＰｓ＠ＳｉＯ２的荧光光谱图逡逑Ｆｉｇ．邋３－３邋Ｔｈｅ邋ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ邋ｓｐｅｃｔｒａ邋ｏｆ邋ＵＣＮＰｓ＠邋Ｓｉ０２邋ｐｒｅｐａｒｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｌｍｌ（ａ），邋２ｍｌ（ｂ）邋ａｎｄ邋Ｏｍｌ（ｃ）逡逑结果表明：在该实验的整个反应体系中氨水的添加量为ｌ邋ｍＬ时，ＴＥＯＳ在此水解逡逑１８逡逑
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：O657.3;TS210.7

【参考文献】