基于高效阴离子色谱-脉冲安培法优化阿拉伯木聚糖单糖组成分析

发布时间：2019-08-17 15:18

【摘要】：以大粒车前子来源阿拉伯木聚糖为研究对象,采用完全酸水解结合高效阴离子色谱-脉冲安培法测定单糖组成,系统优化酸的种类和浓度、水解温度和时间、水解后样品放置时间等水解条件。结果表明,将车前子多糖置于2 mol/L H_2SO_4、120℃常压油浴条件下水解2 h时,效果较好,但水解后稀释液放置时间不宜超过6 h。大粒车前子多糖主要由阿拉伯糖(8.89%)和木糖(41.52%)组成,同时检测出半乳糖醛酸(0.73%)、葡萄糖醛酸(3.44%)和微量的半乳糖、葡萄糖,结果重现性良好。利用上述最优条件水解黍子壳、燕麦麸皮和青稞来源阿拉伯木聚糖并分析单糖组成,均获得较好结果。本研究为分析各种来源阿拉伯木聚糖的单糖组成提供了参考。
【图文】：

色谱图,单糖,阴离子,色谱图

3结果与讨论3．1离子色谱测定方法建立11种单糖标品离子色谱行为见图1，除鼠李糖与阿拉伯糖、木糖与甘露糖有部分重叠外，其它单糖标品分离效果较好。各单糖标品浓度与峰面积的线性关系、检出限及定量限见表2。分别以3倍和10倍信噪比计算检测限和定量限，二者介于5．57～29．76μg/L和18．55～99．10μg/L，与同样采用离子色谱法进行检测的文献［15］(检出限为2．5～75．0μg/L)及文献［16］(检出限为2～26μg/L)相比，本研究采用的色谱条件较为理想。表2单糖标品的线性关系、检测限及定量限Table2Linearrelationship，detectionlimitandquantitationlimitofstandardmonosaccharides标准品Standards线性方程Linearequation相关系数Correlationcoefficient(r)线性范围Linearrange(ug/mL)检出限Detectionlimit(μg/L)定量限Quantitationlimit(μg/L)岩藻糖Fucosey=0．8063x－0．51650．99730．5～105．619鼠李糖Ｒhamnosey=1．6932x－0．97410．99720．5～109．431阿拉伯糖Arabinosey=1．0093x－0．78130．99760．5～106．622半乳糖Galactosey=0．8260x－0．56490．99610．5～101342葡萄糖Glucosey=0．5821x－0．80740．99750．5～108．629木糖Xylosey=0．6822x－1．29660．99620．5～108．829甘露糖Mannosey=0．8681x－0．52210．99890．5～101757果糖Fructosey=0．7444x+0．51840．99700．5～103099核糖Ｒibosey=0．7843x－0．56100．99650．5～101964半乳糖醛酸Galacturonicacidy=1．1264x－0．19190．99880．5～108．328葡糖糖醛酸Glucuronicacidy=0．8044x－0．52230．99570．5～105．719Note:yispeakarea(nCmin);xismassconcentration(μg/mL)．125755t(min)Signal（nC）5

种类,单糖组成,水解时间,方式

5035HClAcidtypeMassfraction（%）963H2SO4TFA040A45HHCl2SO41.21ConcentrationofH2SO4(mol/L)Massfraction（%）0.60.40.22450.00.8BArabinose/XyloseArabinose/20GalacturonicacidXylose/50Glucuronicacid/3Sum/501.003GlucuronicacidGalacturonicacidXyloseGalacturonicacidArabinoseXyloseArabinoseaTFAGlucuronicacidb图2水解方式、酸的种类及浓度对车前子多糖单糖组成的影响．(A)水解方式及酸的种类;(B)酸的浓度Fig．2Effectsofhydrolysismethods，acidtypesandconcentrationonmonosaccharidecompositionofplantagoasiaticaL．(PLCP)．(A)hydrolysismethodsandacidtypes;(B)acidconcentration．Arabinose/20repre-sentsa20-foldreductioninthemassfractionofarabinose．Othermonosaccharidesshowninthisform(B)aresimilartoArabinose/20．a，sealedinvacuum;b．atmosphericoilbath．3．3水解温度和水解时间对车前子多糖水解效果的影响在上述基础上，采用2mol/LH2SO4在相同水解时间(2h)下考察60℃，80℃，100℃和120℃下车前子多糖水解效果，结果见图3A。木糖含量随温度升高呈现出先增加后略减的趋势，，而核糖只有在60℃水解条件下才检测到，其余各单糖含量均随水解温度升高而增加，各单糖总量也随温度升高而增加。由于温度继续升高易引起多糖炭化，因此水解温度选择为120℃。在2mol/LH2SO4、120℃水解条件下，考察水解时间(0．5，1，2，3和4h)对PLCP水解效果的影响(图3B)。随着水解时间延长，大部分单糖(尤其是半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸)含量先增加后减小，水解2h后，PLC
【作者单位】：南昌大学食品科学与技术国家重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(Nos.31301434,21564007) 江西省优势科技创新团队(No.20133BCB24001) 江西省自然科学基金(No.20142BAB214004)资助~~
【分类号】：O636.1;O657

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