间接分光光度法测定茶叶中茶多酚

发布时间：2019-09-05 09:12

【摘要】：在盐酸介质中,茶多酚可以定量地将硅钼黄还原为硅钼蓝,通过测定硅钼蓝的吸光度,可间接测定茶多酚的含量,从而建立了硅钼蓝光度法测定茶多酚的新方法。通过试验研究确定了测定茶多酚的最佳条件。结果表明,显色体系的最大吸收波长为730 nm,茶多酚质量浓度在4.000~64.00μg/mL范围内服从比尔定律,线性相关系数γ=0.999 1,方法检测限为0.000 097 mg/mL。该方法用于绿茶和红茶中茶多酚含量的测定,结果与国标法相符,精密度(相对标准偏差)分别为0.9%,0.4%,加标回收率分别为98.6%~100.8%和97.8%~101.7%。
【图文】：

成的硅钼蓝的吸光度与茶多酚质量浓度（4.000~64.00μg/mL范围内）服从朗伯-比尔定律，通过测定硅钼蓝的吸光度，可以间接测定茶多酚的含量。2.2吸收光谱取25mL比色管，依次准确加入28.25mg/mL钼酸铵溶液1.00mL，二次蒸馏水15.00mL，4.295mg/mLNa2SiO3溶液1.40mL，1.0mol/L盐酸溶液0.50mL，1.000mg/mL茶多酚标准溶液0.50mL，摇匀，反应5min后，加入pH10NH3-NH4Cl缓冲液溶液2.00mL，以水定容，摇匀，常温放置15min后在波长550~850nm范围内，以试剂空白作参比测定反应生成物硅钼蓝的吸收光谱，结果见图1。从图1可见，硅钼蓝的最大吸收波长λmax为730nm。图1吸收光谱2.3反应条件的选择2.3.1反应温度取25mL比色管，依次准确加入28.25mg/mL钼酸铵溶液1.00mL，二次蒸馏水15.00mL，4.295mg/mLNa2SiO3溶液1.40mL，1.0mol/L盐酸溶液0.50mL，1.000mg/mL茶多酚标准溶液0.50mL，摇匀，分别置于25℃，30℃，35℃，40℃，45℃，50℃，55℃和60℃水浴锅中加热反应5min后，加入pH10NH3-NH4Cl缓冲液溶液2.00mL，以水定容，摇匀，常温放置15min后以试剂空白作参比，用1cm比色皿在波长730nm处分别测定吸光度A。试验表明，当温度为35℃~60℃时，，A最大且基本恒定，故反应温度确定为40℃。2.3.2反应时间固定钼酸铵溶液用量、二次蒸馏水用量、Na2SiO3溶液用量、盐酸溶液用量、茶多酚标准溶液用量以及pH10NH3-NH4Cl缓冲液溶液用量不变，置于40℃水浴锅中反应5，10，15，20，25和30min，以水定容，摇匀，常温放置15min后以试剂空白作参比，用1cm比色皿在波长730nm处测定吸光度A。结果表明，反应时间在5min之后吸光度基本恒定，故选取10min作为反应时间。2.3.3放置时间固定钼酸铵溶液用?

《食品工业》2017年第38卷第12期282分析检测这表明体系中生成的硅钼蓝（H4Si（Mo3O10）2（Mo3O9）2）达到了最大量，即体系中的茶多酚完全被氧化。因此，选择硅酸钠溶液的用量为0.40mL。图2硅酸钠用量的影响2.3.5钼酸铵溶液用量固定二次蒸馏水用量、Na2SiO3溶液用量、盐酸溶液用量、茶多酚标准溶液用量、反应温度、反应时间、pH10NH3-NH4Cl缓冲液溶液用量及放置时间不变，试验了28.25mg/mL钼酸铵溶液用量对吸光度的影响，结果见图3。结果表明，吸光度随着钼酸铵溶液用量的增加而增加，当钼酸铵溶液用量为0.60~1.60mL范围时，吸光度达到最大值且恒定。这是因为体系中的茶多酚完全被氧化，体系中生成的硅钼蓝（H4Si（Mo3O10）2（Mo3O9）2）达到了最大量，因而吸光度为最大值且恒定。故选取0.80mL钼酸铵溶液作为反应用量。图3钼酸铵用量的影响2.3.6盐酸溶液用量固定钼酸铵溶液用量、二次蒸馏水用量、Na2SiO3溶液用量、茶多酚标准溶液用量、反应温度、反应时间、pH10NH3-NH4Cl缓冲液溶液用量及放置时间不变，探讨了盐酸溶液用量（0.10~0.50mL范围）对吸光度的影响。结果表明，1.0mol/L盐酸溶液用量在0.25~0.50mL范围内时，吸光度达到最大且基本恒定，故选择盐酸溶液用量为0.30mL。2.3.7pH10缓冲溶液用量固定钼酸铵溶液用量、二次蒸馏水用量、Na2SiO3溶液用量、盐酸溶液用量、茶多酚标准溶液用量、反应温度、反应时间和放置时间不变，pH10NH3-NH4Cl缓冲液溶液用量对吸光度的影响（见图4）表明，随着缓冲液溶液用量的增加，吸光度随之增加，当缓冲液溶液用量在1.60~2.00mL范围内吸光度最大且基本恒定，故选择pH10NH
【作者单位】： 嘉应学院医学院;嘉应学院化学与环境学院;
【分类号】：O657.3;TS272.7

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本文编号：2532110