靶向亲和-液相色谱-质谱联用技术快速筛选黄藤总生物碱中乙酰胆碱酯酶抑制剂
发布时间：2020-04-12 07:31
【摘要】：采用靶向亲和-液相色谱-质谱联用技术(Target molecule affinity-LC-ESI-MS~n)快速筛选黄藤总生物碱中能够抑制乙酰胆碱酯酶活性的成分,共筛选出12种具有潜在抑制乙酰胆碱酯酶的活性成分,并鉴定了6种成分,分别为黄藤素(Palmatine)、小檗碱(Berberine)、药根碱(Jatrorrhizine)、巴马汀红碱(Palmatrubine)、7,8-二氢-8-羟基小檗碱(7,8-Dihydro-8-hydroxyberberine)、Groenlandicine,结合体外酶学实验对这6种化合物进行了活性验证实验。结果表明,黄藤素抑制活性最强,其抑制作用强于阳性对照药盐酸多奈哌齐,说明黄藤素具有开发成抗阿尔茨海默症药物的潜力。本方法简单、快速、准确地从复杂的中药提取物中筛选出具有抑制乙酰胆碱酯酶活性的成分,适用于复杂体系中的高通量筛选。
【图文】：
6002t（min）mAU4002000０４６８１０１２E20t（min）mAU０406080１０0１40D１201211109876453120t（min）mAU０406080１０0１40C１20t（min）20mAU０406080１０0１40A１2012111098764532t（min）20mAU0０406080１０0１40B１2012111098765431221543210108642122.01.51.00.50.01086420图1不同靶向亲和作用体系的高效液相色谱图。(A)黄藤总生物碱与乙酰胆碱酯酶(AChE)相互作用体系;(B)黄藤总生物碱原液;(C)未加AChE的空白对照;(D)黄藤总生物碱与等量的灭活AChE相互作用体系;(E)盐酸多奈哌齐与AChE相互作用体系。Fig．1HPLCchromatogramsof(A)ultrafiltrationHPLCscreeningoftotalalkaloidsforbindingtoAChE，(B)totalalkaloidsstocksolution，(C)controlassayoftotalalkaloidswithnoAChE，(D)ultrafiltrationHPLCscreeningoftotalalkaloidsforbindingtodenaturedAChEand(E)ultrafiltrationHPLCscreeningofdonepezilhydrochlorideforbindingtoAChE3．3活性实验结果对黄藤总生物碱和其中能够获得的单体化合物黄藤素、药根碱和小檗碱等进行了体外酶活性抑制实验，结果表明，，阳性药盐酸多奈哌齐在0．25mg/mL时对乙酰胆碱酯酶的抑制率为65．86%，IC50为(90．7±0．003)$g/mL;而黄藤总生物碱在同样浓度下的抑制率为89．12%，IC50为(6．2±0．035)$g/mL;各单体化合物中黄藤素的抑制活性最强，0．25mg/mL时抑制率为92．25%，其抑制率呈现出黄藤素＞黄藤总生物碱＞巴马汀红碱＞药根碱＞盐酸多奈哌齐＞小檗碱＞7，8-二氢-8-羟基小檗碱＞Groenlandicine，表明黄藤素具
6002t（min）mAU4002000０４６８１０１２E20t（min）mAU０406080１０0１40D１201211109876453120t（min）mAU０406080１０0１40C１20t（min）20mAU０406080１０0１40A１2012111098764532t（min）20mAU0０406080１０0１40B１2012111098765431221543210108642122.01.51.00.50.01086420图1不同靶向亲和作用体系的高效液相色谱图。(A)黄藤总生物碱与乙酰胆碱酯酶(AChE)相互作用体系;(B)黄藤总生物碱原液;(C)未加AChE的空白对照;(D)黄藤总生物碱与等量的灭活AChE相互作用体系;(E)盐酸多奈哌齐与AChE相互作用体系。Fig．1HPLCchromatogramsof(A)ultrafiltrationHPLCscreeningoftotalalkaloidsforbindingtoAChE，(B)totalalkaloidsstocksolution，(C)controlassayoftotalalkaloidswithnoAChE，(D)ultrafiltrationHPLCscreeningoftotalalkaloidsforbindingtodenaturedAChEand(E)ultrafiltrationHPLCscreeningofdonepezilhydrochlorideforbindingtoAChE3．3活性实验结果对黄藤总生物碱和其中能够获得的单体化合物黄藤素、药根碱和小檗碱等进行了体外酶活性抑制实验，结果表明，阳性药盐酸多奈哌齐在0．25mg/mL时对乙酰胆碱酯酶的抑制率为65．86%，IC50为(90．7±0．003)$g/mL;而黄藤总生物碱在同样浓度下的抑制率为89．12%，IC50为(6．2±0．035)$g/mL;各单体化合物中黄藤素的抑制活性最强，0．25mg/mL时抑制率为92．25%，其抑制率呈现出黄藤素＞黄藤总生物碱＞巴马汀红碱＞药根碱＞盐酸多奈哌齐＞小檗碱＞7，8-二氢-8-羟基小檗碱＞Groenlandicine，表明黄藤素具
本文编号：2624451
【图文】：
6002t（min）mAU4002000０４６８１０１２E20t（min）mAU０406080１０0１40D１201211109876453120t（min）mAU０406080１０0１40C１20t（min）20mAU０406080１０0１40A１2012111098764532t（min）20mAU0０406080１０0１40B１2012111098765431221543210108642122.01.51.00.50.01086420图1不同靶向亲和作用体系的高效液相色谱图。(A)黄藤总生物碱与乙酰胆碱酯酶(AChE)相互作用体系;(B)黄藤总生物碱原液;(C)未加AChE的空白对照;(D)黄藤总生物碱与等量的灭活AChE相互作用体系;(E)盐酸多奈哌齐与AChE相互作用体系。Fig．1HPLCchromatogramsof(A)ultrafiltrationHPLCscreeningoftotalalkaloidsforbindingtoAChE，(B)totalalkaloidsstocksolution，(C)controlassayoftotalalkaloidswithnoAChE，(D)ultrafiltrationHPLCscreeningoftotalalkaloidsforbindingtodenaturedAChEand(E)ultrafiltrationHPLCscreeningofdonepezilhydrochlorideforbindingtoAChE3．3活性实验结果对黄藤总生物碱和其中能够获得的单体化合物黄藤素、药根碱和小檗碱等进行了体外酶活性抑制实验，结果表明，，阳性药盐酸多奈哌齐在0．25mg/mL时对乙酰胆碱酯酶的抑制率为65．86%，IC50为(90．7±0．003)$g/mL;而黄藤总生物碱在同样浓度下的抑制率为89．12%，IC50为(6．2±0．035)$g/mL;各单体化合物中黄藤素的抑制活性最强，0．25mg/mL时抑制率为92．25%，其抑制率呈现出黄藤素＞黄藤总生物碱＞巴马汀红碱＞药根碱＞盐酸多奈哌齐＞小檗碱＞7，8-二氢-8-羟基小檗碱＞Groenlandicine，表明黄藤素具
6002t（min）mAU4002000０４６８１０１２E20t（min）mAU０406080１０0１40D１201211109876453120t（min）mAU０406080１０0１40C１20t（min）20mAU０406080１０0１40A１2012111098764532t（min）20mAU0０406080１０0１40B１2012111098765431221543210108642122.01.51.00.50.01086420图1不同靶向亲和作用体系的高效液相色谱图。(A)黄藤总生物碱与乙酰胆碱酯酶(AChE)相互作用体系;(B)黄藤总生物碱原液;(C)未加AChE的空白对照;(D)黄藤总生物碱与等量的灭活AChE相互作用体系;(E)盐酸多奈哌齐与AChE相互作用体系。Fig．1HPLCchromatogramsof(A)ultrafiltrationHPLCscreeningoftotalalkaloidsforbindingtoAChE，(B)totalalkaloidsstocksolution，(C)controlassayoftotalalkaloidswithnoAChE，(D)ultrafiltrationHPLCscreeningoftotalalkaloidsforbindingtodenaturedAChEand(E)ultrafiltrationHPLCscreeningofdonepezilhydrochlorideforbindingtoAChE3．3活性实验结果对黄藤总生物碱和其中能够获得的单体化合物黄藤素、药根碱和小檗碱等进行了体外酶活性抑制实验，结果表明，阳性药盐酸多奈哌齐在0．25mg/mL时对乙酰胆碱酯酶的抑制率为65．86%，IC50为(90．7±0．003)$g/mL;而黄藤总生物碱在同样浓度下的抑制率为89．12%，IC50为(6．2±0．035)$g/mL;各单体化合物中黄藤素的抑制活性最强，0．25mg/mL时抑制率为92．25%，其抑制率呈现出黄藤素＞黄藤总生物碱＞巴马汀红碱＞药根碱＞盐酸多奈哌齐＞小檗碱＞7，8-二氢-8-羟基小檗碱＞Groenlandicine，表明黄藤素具
【相似文献】
相关期刊论文 前3条
1 张剑;刘冰晶;李超;吴婉沂;杜兵;;紫外分光光度法测定乌药中总生物碱含量[J];江苏农业科学;2014年03期
2 李路扬;龙娓芳;万定荣;张飞;丁奇;梅之南;;5种小檗属药用植物总生物碱及小檗碱的含量测定[J];中国实验方剂学杂志;2014年17期
3 ;[J];;年期
本文编号：2624451
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/huaxue/2624451.html
教材专著
