天然产物中抗氧化活性成分的高速逆流色谱分离研究

发布时间：2017-04-08 06:13

  本文关键词：天然产物中抗氧化活性成分的高速逆流色谱分离研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：复杂天然产物中活性有机物分离分析方法的研究是当代有机分析化学的重要内容,也是药物研发中寻找先导化合物的重要环节。高速逆流色谱作为一种无需固体载体的分离技术,已广泛应用于天然产物中活性成分的分离纯化。因此,开展逆流色谱分离天然产物中活性成分的相关研究有着重要的科学意义和应用价值。围绕这一目标,本论文具体开展了以下工作： 1.活性导向的高速逆流色谱技术分离纯化异叶蛇葡萄中的抗氧化成分。首先进行在线活性测试,将异叶蛇葡萄粗品与羟基自由基在线反应,筛选出5个具有较好活性的化合物。选取上述5个化合物为分离目标,采用溶剂系统甲基叔丁基醚／乙腈／水(2/2/3,v/v)及环己烷／甲基叔丁基醚／乙酸乙酯／水(1/4/3/5,v/v),从100mg的粗品中成功分离出5个成分。经结构鉴定,这5个化合物分别为：金丝桃苷(1),异槲皮苷(2),芦丁(3),山柰酚-3-0-芸香糖苷(4)及槲皮素(5)。活性测试表明上述5个化合物均具有较好清除DPPH和羟基自由基的能力,其IC50值分别为18.2±1.3,17.0±1.4,24.2±1.2,38.1±1.7,9.0±1.2μM。抗氧化剂对羟基自由基的清除率(SRA)为65±5%,68±4%,96±2%,70±4%,98±2%。上述结果显示,使用该策略进行分离,可以大大提高活性化合物的纯化效率,在天然产物的活性成分的分离纯化中具有良好应用前景。 2.利用逆流色谱分离得到杭白菊粗提物中的目标活性化合物。粗提物经LC/MS/MS分析及与标准品对照,确认其主要成分为活性化合物芹黄素-5-O-葡萄糖苷和金合欢素-7-O-葡萄糖苷,随后选取甲基叔丁基醚/正丁醇/乙腈/水(1.5/2/1/5,v/v)为溶剂体系进行逆流色谱分离,得到上述两化合物的纯品。实验表明,逆流色谱是一种制备高纯度活性成分的有效手段。 此外,论文就高速逆流色谱近些年的方法发展作了简要总结。
【关键词】：逆流色谱 抗氧化剂 异叶蛇葡萄 杭白菊
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：O657
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 第一章 逆流色谱综述7-24
• 1.1 逆流色谱简介7
• 1.2 逆流色谱原理7-9
• 1.3 逆流色谱溶剂系统的选择9-12
• 1.4 逆流色谱研究发展12-18
• 1.4.1 传统HSCCC分离方法12
• 1.4.2 梯度洗脱HSCCC技术12-13
• 1.4.3 多维逆流色谱(Multidimensional CCC, MDCCC)13
• 1.4.4 洗脱-挤出逆流色谱(Elution-Extrusion CCC, EECCC)13-14
• 1.4.5 重叠洗脱-挤出逆流色谱(Overlapping Elution-Extrusion CCC)14-15
• 1.4.6 反推逆流色谱技术(Back-Extrusion CCC, BECCC)15-17
• 1.4.7 pH-区带精制逆流色谱17-18
• 1.5 本章小结18-19
• 参考文献19-24
• 第二章 活性导向的异叶蛇葡萄中抗氧化剂的逆流色谱分离24-39
• 2.1 引言24
• 2.2 材料和方法24-27
• 2.2.1 试剂25
• 2.2.2 仪器25-26
• 2.2.3 粗品准备26
• 2.2.4 测试粗品清除羟基自由基的能力26
• 2.2.5 溶剂系统和样品溶液的准备26-27
• 2.2.6 高速逆流色谱分离27
• 2.2.7 高效液相色谱检测及化合物鉴定27
• 2.2.8 分离后的化合物活性确认27
• 2.3 结果与讨论27-35
• 2.3.1 通过高效液相色谱在线测试筛选粗品中抗氧化剂27-28
• 2.3.2 溶剂系统的选择28-32
• 2.3.3 结构鉴定32-34
• 2.3.4 活性确认34-35
• 2.4 天然产物活性物质分离新策略35
• 2.5 本章小结35-36
• 参考文献36-39
• 第三章 应用高速逆流色谱分离杭白菊中活性成分39-49
• 3.1 引言39-40
• 3.2 材料和方法40-41
• 3.2.1 试剂40
• 3.2.2 仪器40
• 3.2.3 粗品准备40
• 3.2.4 粗提物高效液相色谱分析及LC/MS分析40-41
• 3.2.5 溶剂系统和样品溶液的准备41
• 3.2.6 高速逆流色谱分离41
• 3.2.7 高效液相色谱检测及化合物鉴定41
• 3.3 结果与讨论41-46
• 3.3.1 粗提物中主要成分的液质分析41-42
• 3.3.2 溶剂系统的选择42-46
• 3.3.3 结构鉴定46
• 3.4 本章小结46-47
• 参考文献47-49
• 论文总结及今后工作展望49-50
• 附录 硕士期间发表和待发表的论文50-51
• 致谢51-52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 王春霞;菊花化学成分的研究进展[J];中药材;2004年03期

  本文关键词：天然产物中抗氧化活性成分的高速逆流色谱分离研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：292240