Box-Behnken响应面法优化酶法制备α-环糊精及其分离纯化

发布时间：2021-03-20 13:31

　　以α-环糊精葡萄糖基转移酶（α-cyclodextrin glycosyltransferase,α-CGTase）为催化剂,研究其作用于马铃薯淀粉产出α-环糊精的酶法生产工艺。通过单因素试验和Box-Behnken中心组合设计法设计响应面试验,分析不同条件对α-环糊精转化率的影响。试验结果表明,当α-CGTase的反应温度为50℃,pH值为5.5时,α-CGTase呈现最好的酶活性质,α-环糊精的转化率最高。反应体系中加入有机溶剂正癸醇,底物浓度为1.0%,加酶量为200 U/g淀粉,反应时间为14 h时,α-环糊精的转化率可达40.6%。通过水蒸气蒸馏法进一步分离纯化α-环糊精产物,经高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）鉴定分析,转化率可达到20%～40%,纯度达到75%。 

【文章来源】：食品研究与开发. 2020,41(13)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

加酶量对α-环糊精转化率的影响

反应时间对α-环糊精转化率的影响见图6。由图6可以看出，随着反应时间的延长α-环糊精的转化率先上升后下降，在反应14 h时，α-环糊精的转化率最高，为34.1%。14 h后，α-环糊精的转化率大幅降低，其原因可能是随着反应时间的延长，α-环糊精逐渐产生了分解。因此，选取14 h为最佳反应时间。

有机溶剂种类对α-环糊精转化率的影响见图7。醇类与环糊精能够形成包合物沉淀，促进反应向生成环糊精的方向不断进行，加快反应速度，提高α-环糊精的转化率[16]。试验中分别加入了有机溶剂乙醇、异丙醇、正丁醇和正癸醇，从图7可以看出，反应体系中加入正癸醇后，α-环糊精的转化率最高，为39.7%。另外由于可溶的醇类会造成后期提取上的困难，因此综合分析，选用正癸醇作为生产α-环糊精的有机溶剂。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]α-环糊精以及γ-环糊精的酶转化工艺研究[D]. 王宁.江南大学 2010
[2]环糊精测定方法及其制备工艺对产物组成影响的研究[D]. 刘虹.江南大学 2008



本文编号：3091083