乳品中牛乳铁蛋白及乳果糖的定量检测方法研究
发布时间：2021-08-13 08:27
乳品是由生牛乳或生羊乳等鲜乳经加工后,加入适量维生素、矿物质及其他营养物质制成的产品,营养成分极高,满足人体健康需求,尤其是婴儿健康成长所需的所有营养素。随着人们生活水平的提高,对食品尤其是具高营养价值的乳品要求越来越高,因此国内外对乳品从奶场到货架都建立了较为完善的法律法规和检测技术。乳品中的功能性营养成分越来越受消费者喜欢,而乳品质量及潜在风险与其加工方式密切相关,牛乳铁蛋白与乳果糖分别作为两项可靠指标受到关注,但尚无简便、适用性强的检测平台。针对乳品中牛乳铁蛋白及乳果糖建立快速、灵敏、可靠的检测技术,为消费者健康保驾护航具有重要意义。本文分别采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）与液相色谱-蒸发光检测技术（LC-EL SD）建立了乳品中牛乳铁蛋白及乳果糖定量检测方法,主要研究内容和结果如下:1.基于LC-MS/MS建立了乳品中牛乳铁蛋白定量检测方法。样品经冷冻离心脱脂、胰蛋白酶水解后,使用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-Q/Exactive-HRMS）系统,在数据依赖采集（Date-dependent MS2）模式下,结合Pro...
【文章来源】：上海大学上海市 211工程院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
牛乳铁蛋白空间结构[4]
上海大学硕士学位论文7图1-2β-半乳糖苷酶催化乳糖转化为乳果糖的反应[45]Fig.1-2β-galactosidase-catalyzedtransgalactosylationreactionoflactosetolactulose[45]表1-1乳果糖、乳糖化合物信息Table1-1Informationoflactuloseandlactose中文通用名英文通用名CAS号分子量分子式结构式理化性质乳果糖Lactulose4618-18-2243.2C12H22O11白色不规则的粉末，易溶于水。乳糖Lactose5989-81-1243.2C12H22O11白色晶体或结晶粉末，微溶于乙醇，溶于乙醚和氯仿。农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心建立了奶产品质量监测数据库，同时结合国际研究进展综合分析发现，乳果糖是牛奶热加工的副产物，结合糠氨酸含量，能够科学区分生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳和复原乳，是规范奶产品市场的科学指标[45-58]。美国[49]、CAC[50]、欧盟[51]等均明确规定了巴氏杀菌乳和灭菌乳的工艺条件。牛奶中常见的热加工工艺见表
上海大学硕士学位论文12定量限较高。Yuan等[88]基于特征肽ETTVFENLPEK定量牛乳铁蛋白，经Blast表明该肽段非牛乳铁蛋白特征肽段，还存在于羊奶中。Chen等[89]结合UPLC-Q-TOF-MS和CESI-Q-TOF-MS两种方法检测牛乳铁蛋白肽段，有效展现乳铁蛋白序列，对特征肽段的搜寻提供一定帮助，但未进行乳铁蛋白的定量研究。因此，LC-MS/MS方法测定蛋白含量的关键是找出酶解后肽段的特异性，先采用高分辨质谱对蛋白标准品及实际样品酶解后肽段进行全扫，通过匹配数据库确证蛋白，获得特征肽段，进一步建立肽段的多反应监测方法（图1-3）[90-92]。图1-3特征肽段的选择Fig.1-3Selectionofmarkerpeptides3.2乳品中乳果糖的检测方法乳果糖可作为衡量巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳等热处理程度的敏感指标，鉴别各种不同加工工艺液态乳。这一指标早已得到国际认可，欧洲现行法规规定经热处理的乳品必须满足食品卫生要求，该法规制定了巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳的温度和时间条件。巴氏杀菌乳可通过短时间内高温处理（至少72℃加热15s）、低温处理长时间段（至少63℃加热30min）或者其他等效的时间-温度处理情况；UHT灭菌乳可通过短时间内超高温处理（至少135℃以上保持3-5s）。根据欧盟和国际乳业联盟（InternationalDairyFederation,IDF）的规定将UHT灭菌乳中乳果糖的最大浓度是600mg/L。我国农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心建立了奶产品质量监测数据库，同时结合国际研究进展综合分析发现，乳果糖是牛奶热加工的副产物，结合糠氨酸含量，能够科学区分生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳和复原乳，是规范奶产品市场的科学指标。农业行业标准农业部标准NYT939-2016巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定以乳果糖和糠氨酸的比值判定巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中是否含有复原乳，并
【参考文献】：
期刊论文
[1]用乳果糖、莫沙必利联合生物反馈疗法对老年功能性便秘患者进行治疗的效果分析[J]. 党雅荣,秦慧. 当代医药论丛. 2019(21)
[2]高效液相色谱-串联质谱法测定肉制品和调味料中7种水产品过敏原[J]. 孟佳,古淑青,方真,钮冰,邓晓军,郭德华,朱坚,韩芳. 色谱. 2019(07)
[3]酶联免疫法检测奶粉样本中的乳铁蛋白及其均匀度的探索[J]. 郑云鹏,赵红杰,郭靖宇,吕肖楠. 中国乳品工业. 2019(06)
[4]基于液相色谱-串联质谱法的肉类特征肽段鉴别及掺假测定[J]. 古淑青,詹丽娜,赵超敏,郑江,蔡一村,邓晓军. 色谱. 2018(12)
[5]高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中的莫奈太尔及其代谢物[J]. 吴映璇,林峰,陈思敏. 食品科学. 2019(10)
[6]高效液相色谱蒸发光散射检测法测定乳制品中乳果糖[J]. 刘萌萌,宋戈. 中国乳品工业. 2018(03)
[7]酶联免疫吸附法快速检测婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量[J]. 吴春香,刘志楠,赵源,宋晓东,喻东威,刘萍萍,王俊英,莎日娜,张利珍. 食品安全质量检测学报. 2018(04)
[8]超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测食品中的牛奶过敏原酪蛋白[J]. 詹丽娜,陈沁,古淑青,邓晓军. 色谱. 2017(04)
[9]高效液相色谱-蒸发光散射检测法与酶法检测UHT灭菌乳中乳果糖含量的对比研究[J]. 刘洋,岳虹,赵贞,刘丽君,李翠枝,邵建波. 乳业科学与技术. 2017(01)
[10]乳果糖联合双歧杆菌四联活菌片对慢性重型乙型肝炎患者肠黏膜屏障功能的保护作用[J]. 厉慧琴. 中国微生态学杂志. 2016(04)
硕士论文
[1]牛奶中乳果糖的研究及检测方法的开发[D]. 田瑶.湖南农业大学 2017
本文编号：3340093
【文章来源】：上海大学上海市 211工程院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
牛乳铁蛋白空间结构[4]
上海大学硕士学位论文7图1-2β-半乳糖苷酶催化乳糖转化为乳果糖的反应[45]Fig.1-2β-galactosidase-catalyzedtransgalactosylationreactionoflactosetolactulose[45]表1-1乳果糖、乳糖化合物信息Table1-1Informationoflactuloseandlactose中文通用名英文通用名CAS号分子量分子式结构式理化性质乳果糖Lactulose4618-18-2243.2C12H22O11白色不规则的粉末，易溶于水。乳糖Lactose5989-81-1243.2C12H22O11白色晶体或结晶粉末，微溶于乙醇，溶于乙醚和氯仿。农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心建立了奶产品质量监测数据库，同时结合国际研究进展综合分析发现，乳果糖是牛奶热加工的副产物，结合糠氨酸含量，能够科学区分生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳和复原乳，是规范奶产品市场的科学指标[45-58]。美国[49]、CAC[50]、欧盟[51]等均明确规定了巴氏杀菌乳和灭菌乳的工艺条件。牛奶中常见的热加工工艺见表
上海大学硕士学位论文12定量限较高。Yuan等[88]基于特征肽ETTVFENLPEK定量牛乳铁蛋白，经Blast表明该肽段非牛乳铁蛋白特征肽段，还存在于羊奶中。Chen等[89]结合UPLC-Q-TOF-MS和CESI-Q-TOF-MS两种方法检测牛乳铁蛋白肽段，有效展现乳铁蛋白序列，对特征肽段的搜寻提供一定帮助，但未进行乳铁蛋白的定量研究。因此，LC-MS/MS方法测定蛋白含量的关键是找出酶解后肽段的特异性，先采用高分辨质谱对蛋白标准品及实际样品酶解后肽段进行全扫，通过匹配数据库确证蛋白，获得特征肽段，进一步建立肽段的多反应监测方法（图1-3）[90-92]。图1-3特征肽段的选择Fig.1-3Selectionofmarkerpeptides3.2乳品中乳果糖的检测方法乳果糖可作为衡量巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳等热处理程度的敏感指标，鉴别各种不同加工工艺液态乳。这一指标早已得到国际认可，欧洲现行法规规定经热处理的乳品必须满足食品卫生要求，该法规制定了巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳的温度和时间条件。巴氏杀菌乳可通过短时间内高温处理（至少72℃加热15s）、低温处理长时间段（至少63℃加热30min）或者其他等效的时间-温度处理情况；UHT灭菌乳可通过短时间内超高温处理（至少135℃以上保持3-5s）。根据欧盟和国际乳业联盟（InternationalDairyFederation,IDF）的规定将UHT灭菌乳中乳果糖的最大浓度是600mg/L。我国农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心建立了奶产品质量监测数据库，同时结合国际研究进展综合分析发现，乳果糖是牛奶热加工的副产物，结合糠氨酸含量，能够科学区分生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳和复原乳，是规范奶产品市场的科学指标。农业行业标准农业部标准NYT939-2016巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中复原乳的鉴定以乳果糖和糠氨酸的比值判定巴氏杀菌乳和UHT灭菌乳中是否含有复原乳，并
【参考文献】：
期刊论文
[1]用乳果糖、莫沙必利联合生物反馈疗法对老年功能性便秘患者进行治疗的效果分析[J]. 党雅荣,秦慧. 当代医药论丛. 2019(21)
[2]高效液相色谱-串联质谱法测定肉制品和调味料中7种水产品过敏原[J]. 孟佳,古淑青,方真,钮冰,邓晓军,郭德华,朱坚,韩芳. 色谱. 2019(07)
[3]酶联免疫法检测奶粉样本中的乳铁蛋白及其均匀度的探索[J]. 郑云鹏,赵红杰,郭靖宇,吕肖楠. 中国乳品工业. 2019(06)
[4]基于液相色谱-串联质谱法的肉类特征肽段鉴别及掺假测定[J]. 古淑青,詹丽娜,赵超敏,郑江,蔡一村,邓晓军. 色谱. 2018(12)
[5]高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中的莫奈太尔及其代谢物[J]. 吴映璇,林峰,陈思敏. 食品科学. 2019(10)
[6]高效液相色谱蒸发光散射检测法测定乳制品中乳果糖[J]. 刘萌萌,宋戈. 中国乳品工业. 2018(03)
[7]酶联免疫吸附法快速检测婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量[J]. 吴春香,刘志楠,赵源,宋晓东,喻东威,刘萍萍,王俊英,莎日娜,张利珍. 食品安全质量检测学报. 2018(04)
[8]超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测食品中的牛奶过敏原酪蛋白[J]. 詹丽娜,陈沁,古淑青,邓晓军. 色谱. 2017(04)
[9]高效液相色谱-蒸发光散射检测法与酶法检测UHT灭菌乳中乳果糖含量的对比研究[J]. 刘洋,岳虹,赵贞,刘丽君,李翠枝,邵建波. 乳业科学与技术. 2017(01)
[10]乳果糖联合双歧杆菌四联活菌片对慢性重型乙型肝炎患者肠黏膜屏障功能的保护作用[J]. 厉慧琴. 中国微生态学杂志. 2016(04)
硕士论文
[1]牛奶中乳果糖的研究及检测方法的开发[D]. 田瑶.湖南农业大学 2017
本文编号：3340093
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/huaxue/3340093.html
教材专著
