双酶（DS/DN）体系合成右旋糖酐的聚合过程研究
发布时间：2021-10-12 09:19
右旋糖酐作为典型的多糖类药物之一,其分子量大小及其分布与其性质及药理活性息息相关,传统制备右旋糖酐的方法“菌体发酵-酸降解-乙醇沉降”对分子量控制效果不理想,很大程度上限制了右旋糖酐在医药领域的推广应用;也有利用超声波的空化效应降解大分子右旋糖酐的研究,但超声降解存在一个“极限”,即超声一般只对极限分子量以上的右旋糖酐有较明显的降解作用;利用双酶（Dextransucrase合成酶和Dextranase分解酶）法定向合成药用右旋糖酐可以很好地对其分子量进行控制,大量获得临床药用所需分子量分布范围的系列右旋糖酐制剂,且产物更均一,产率更高,有很好的产业化应用前景。目前,极少有商品级的Dextransucrase合成酶,且合成酶对合成产物右旋糖酐分子量的控制也没有体现专一性。双酶法定向合成对产物分子量及均一性有很好地控制,但这一合成过程的规律还不明确,过程调控与机理还有待深入了解。本课题以Dextransucrase合成酶（DS）为聚合催化剂、Dextranase分解酶（DN）为聚合调控剂、蔗糖为聚合底物构建生物体外右旋糖酐的合成路线,量化研究右旋糖酐聚合过程,探索聚合重复单元、聚合模式及...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１右旋糖酐的结构??
）和Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌｇｌｕｃａｎ－ｂｉｎｄｉｎｇｄｏｍａｉｎ（Ｃ－端葡聚糖结合域）四部分组成，其中，Ｓｉｇｎａｌ??ｅｐｔｉｄｅ主要作用是引导Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶分泌到细胞膜外，Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?ｃａｔａｌｙｔｉｃ??ｏｍａｉｎ的主要作用是使供体鹿糖分子催化裂解，Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?ｇｌｕｃａｎ－ｂｉｎｄｉｎｇ?ｄｏｍａｉｎ的主??作用是使酶在合成过程中与葡聚糖紧密结合［１３，２４，５３，５４］。??Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶同时具有鹿糖酶和转移酶两种活性，Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶与??物鹿糖共价联结，薦糖分子被催化裂解释放出果糖分子，形成??中，酶催化的反应主要有聚合形成右旋糖酐链，与Ｈ２０作用生成葡萄糖，与外界受体??用生成低聚糖和逆向反应等四个方向其中，只有蔗糖作为底物时，将蔗糖催化分??成Ｄ－葡萄糖基（与酶连接）和果糖，接着将Ｄ－葡萄糖基转移到右旋糖酐残基的Ｃ３／Ｃ６??置或水分子上，聚合生成右旋糖酐糖链或水解蔗糖催化合成机制如图１－２所示［５１］。??ｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶除了能合成右旋糖酐外，当有可识别外源受体（如麦芽糖）存在时，??ｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶还可以将Ｄ－葡萄糖基转移到外源受体上聚合生成各种糖基化产物??（如功能性低聚糖等）Ｐ４，５６Ｌ??
的流速为１．０?ｍＬ／ｍｉｎ；进样量为２０?｜ｉＬ。??２．２．５?Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶酶活力测定中果糖标准曲线的构建??基于课题组前期研究进行构建如图２－１所示：??０．５１?７—??■?ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ??０?４?－?——ｌｉｎｅａｒ?ｆｉｔ??ｉ?ｘ??０．３－?Ｚ??ｓ?ｚ??Ｉｏ，?／??〇．〇：??－０．１?０．０?０．１?０．２?０．３?０．４?０．５?０．６?０．７?０．８??Ｆｒｕｃｔｏｓｅ?（ｍｇ）??图２－１果糖（Ｆｒｕｃｔｏｓｅ）的标准曲线??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｈｅ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｆｒｕｃｔｏｓｅ??１２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]超声降解葡聚糖及过程动力学研究[J]. 陈华磊,侯殿志,李素霞,于玥,黄双霞,蓝尉冰,王帅静,陈山. 食品科技. 2017(07)
[2]酶催化在聚合物合成中的应用进展[J]. 张磊,江帆,高亚会,郑轲,崔元臣. 高分子通报. 2016 (02)
[3]松木层孔菌（Phellinus pini）胞外多糖结构解析[J]. 袁雷,刘瑜,田发益,钟政昌,钟国辉. 中国药学杂志. 2013(08)
[4]低温生产高活性右旋糖苷蔗糖酶的明串珠菌的筛选[J]. 崔虎山,黄晓静,王山,李冬梅,金清. 食品科技. 2011(12)
[5]细菌多糖的生物合成机制[J]. 陈蕾蕾,王未名,祝清俊,杜方岭. 微生物学报. 2010(12)
[6]海藻酸钠-琼脂混合固定化重组右旋糖酐蔗糖酶的研究[J]. 张洪斌,伊晓楠,吴定涛,胡雪芹. 食品科学. 2010(05)
硕士论文
[1]酶法耦合两级膜定向制备右旋糖酐及其机理研究[D]. 侯殿志.广西大学 2017
[2]固定化双酶法定向合成右旋糖酐及其调控机理研究[D]. 张义平.广西大学 2015
[3]右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗酶的共固定化和右旋糖酐发酵生产中酶解新工艺的研究[D]. 宋丹丹.合肥工业大学 2013
本文编号：3432299
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１右旋糖酐的结构??
）和Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌｇｌｕｃａｎ－ｂｉｎｄｉｎｇｄｏｍａｉｎ（Ｃ－端葡聚糖结合域）四部分组成，其中，Ｓｉｇｎａｌ??ｅｐｔｉｄｅ主要作用是引导Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶分泌到细胞膜外，Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?ｃａｔａｌｙｔｉｃ??ｏｍａｉｎ的主要作用是使供体鹿糖分子催化裂解，Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?ｇｌｕｃａｎ－ｂｉｎｄｉｎｇ?ｄｏｍａｉｎ的主??作用是使酶在合成过程中与葡聚糖紧密结合［１３，２４，５３，５４］。??Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶同时具有鹿糖酶和转移酶两种活性，Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶与??物鹿糖共价联结，薦糖分子被催化裂解释放出果糖分子，形成??中，酶催化的反应主要有聚合形成右旋糖酐链，与Ｈ２０作用生成葡萄糖，与外界受体??用生成低聚糖和逆向反应等四个方向其中，只有蔗糖作为底物时，将蔗糖催化分??成Ｄ－葡萄糖基（与酶连接）和果糖，接着将Ｄ－葡萄糖基转移到右旋糖酐残基的Ｃ３／Ｃ６??置或水分子上，聚合生成右旋糖酐糖链或水解蔗糖催化合成机制如图１－２所示［５１］。??ｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶除了能合成右旋糖酐外，当有可识别外源受体（如麦芽糖）存在时，??ｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶还可以将Ｄ－葡萄糖基转移到外源受体上聚合生成各种糖基化产物??（如功能性低聚糖等）Ｐ４，５６Ｌ??
的流速为１．０?ｍＬ／ｍｉｎ；进样量为２０?｜ｉＬ。??２．２．５?Ｄｅｘｔｒａｎｓｕｃｒａｓｅ合成酶酶活力测定中果糖标准曲线的构建??基于课题组前期研究进行构建如图２－１所示：??０．５１?７—??■?ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ??０?４?－?——ｌｉｎｅａｒ?ｆｉｔ??ｉ?ｘ??０．３－?Ｚ??ｓ?ｚ??Ｉｏ，?／??〇．〇：??－０．１?０．０?０．１?０．２?０．３?０．４?０．５?０．６?０．７?０．８??Ｆｒｕｃｔｏｓｅ?（ｍｇ）??图２－１果糖（Ｆｒｕｃｔｏｓｅ）的标准曲线??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｈｅ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｆｒｕｃｔｏｓｅ??１２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]超声降解葡聚糖及过程动力学研究[J]. 陈华磊,侯殿志,李素霞,于玥,黄双霞,蓝尉冰,王帅静,陈山. 食品科技. 2017(07)
[2]酶催化在聚合物合成中的应用进展[J]. 张磊,江帆,高亚会,郑轲,崔元臣. 高分子通报. 2016 (02)
[3]松木层孔菌（Phellinus pini）胞外多糖结构解析[J]. 袁雷,刘瑜,田发益,钟政昌,钟国辉. 中国药学杂志. 2013(08)
[4]低温生产高活性右旋糖苷蔗糖酶的明串珠菌的筛选[J]. 崔虎山,黄晓静,王山,李冬梅,金清. 食品科技. 2011(12)
[5]细菌多糖的生物合成机制[J]. 陈蕾蕾,王未名,祝清俊,杜方岭. 微生物学报. 2010(12)
[6]海藻酸钠-琼脂混合固定化重组右旋糖酐蔗糖酶的研究[J]. 张洪斌,伊晓楠,吴定涛,胡雪芹. 食品科学. 2010(05)
硕士论文
[1]酶法耦合两级膜定向制备右旋糖酐及其机理研究[D]. 侯殿志.广西大学 2017
[2]固定化双酶法定向合成右旋糖酐及其调控机理研究[D]. 张义平.广西大学 2015
[3]右旋糖酐酶与右旋糖酐蔗酶的共固定化和右旋糖酐发酵生产中酶解新工艺的研究[D]. 宋丹丹.合肥工业大学 2013
本文编号：3432299
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