聚谷氨酸肽类树状大分子的制备及其溶血栓应用研究

发布时间：2021-10-12 12:55

　　血栓疾病是心脑血管疾病发生的主要诱因,全世界每年因为血栓疾病死亡达数百万人。纳豆激酶（NK）是一类来自天然枯草杆菌的细菌性碱性丝氨酸蛋白酶,它具有较强的纤维蛋白溶解活性,可以直接断裂交联的纤维蛋白,催化血纤维蛋白酶原转变为纤溶酶或钝化纤维蛋白溶解抑制剂,具有安全性好、价格便宜、容易提取和副作用小等优点。然而,NK是一类蛋白质,在外界温度和pH影响下容易失活,此外,它没有靶向溶血栓的性能。因此,设计和制备NK的药物传输载体不仅可以保护NK的酶活,而且可以赋予其靶向溶血栓的性能。聚谷氨酸肽类树状大分子具有可控的尺寸、优异的水溶性、良好的生物降解性、良好的生物相容性和较低的细胞毒性等特点,另外,其表面具有大量的可功能化官能团,因此可以被用于保护和传输药物的理想载体。基于以上考虑,本学位论文使用聚谷氨酸肽类树状大分子作为传输和保护纳豆激酶的药物载体,制备了一系列肽类树状大分子,考察了其负载纳豆激酶前后的化学和生物性能。主要研究内容及结果如下:1.制备了二代、三代和四代的聚谷氨酸肽类树状大分子（G_n,n=2、3、4）,然后制备了聚乙二醇-不同代数聚谷氨酸肽类树状大分子（G<... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：133 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 前言
    1.2 肽类树状大分子的合成方法
        1.2.1 固相法
        1.2.2 液相法
        1.2.3 “Clickchemistry”合成法
        1.2.4 交联合成法
    1.3 肽类树状大分子的合成策略
        1.3.1 发散式
        1.3.2 收敛式
        1.3.3 发散收敛结合式
    1.4 肽类树状大分子的主要合成原料
        1.4.1 聚赖氨酸树状大分子
        1.4.2 聚谷氨酸树状大分子
        1.4.3 聚脯氨酸树状大分子
    1.5 肽类树状大分子与药物的作用机制及其应用
        1.5.1 肽类树状大分子与药物的作用机制
        1.5.2 肽类树状大分子在药物传输系统中的应用
    1.6 溶血栓药物的种类及其作用机制
        1.6.1 第一代溶血栓药物
        1.6.2 第二代溶血栓药物
        1.6.3 第三代溶血栓药物
        1.6.4 第四代溶血栓药物
    1.7 靶向溶血栓药物载体的分类
        1.7.1 被动靶向作用的药物载体
        1.7.2 主动靶向作用的药物载体
        1.7.3 物理化学靶向作用的药物载体
        1.7.4 主动靶向和物理化学靶向双重作用的药物载体
    1.8 本学位论文选题指导思想
    参考文献
第二章 聚乙二醇-不同代数聚谷氨酸肽类树状大分子的制备及其溶血栓性能研究
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 主要原料及仪器设备
        2.2.2 聚乙二醇-不同代数聚谷氨酸肽类树状大分子(G_n-PEG-G_n,n=2、3、4)的制备
        2.2.3 纳米材料结构的表征
        2.2.4 G_n-PEG-G_n/NK纳米复合物的制备和表征
        2.2.5 G_n-PEG-G_n/NK(n=2、3、4)纳米复合物中NK酶活的测定
        2.2.6 G_3-PEG-G_3/NK纳米复合物的体外溶栓实验
        2.2.7 G_3-PEG-G_3/NK纳米复合物的体外酶活稳定性
        2.2.8 G_3-PEG-G_3纳米材料的细胞毒性
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 G_n(n=2、3、4)的结构分析
        2.3.2 N_3-PEG-N_3的合成及表征
        2.3.3 G_n-PEG-G_n/NK(n=2、3、4)的合成
        2.3.4 不同比例G_n-PEG-G_n/NK(n=2、3、4)的酶活分析
        2.3.5 G_3-PEG-G_3/NK(6/1)的粒径和形貌表征
        2.3.6 不同温度储存条件下G_3-PEG-G_3/NK(6/1)的酶活变化
        2.3.7 G_3-PEG-G_3的细胞毒性
        2.3.8 体外溶血栓性能分析
    2.4 本章小结
    参考文献
第三章 多臂聚乙二醇-聚谷氨酸肽类树状大分子的制备及其溶血栓性能研究
    3.1 前言
    3.2 实验部分
        3.2.1 主要原料及仪器设备
        3.2.2 多臂聚乙二醇-聚谷氨酸肽类树状大分子(x-PEG(G_3)_x,x=2、4、6、8)的制备
        3.2.3 纳米材料结构的表征
        3.2.4 x-PEG(G_3)_x/NK(x=2、4、6、8)纳米复合物的制备和表征
        3.2.5 x-PEG(G_3)_x/NK(x=2、4、6、8)纳米复合物中NK酶活测定
        3.2.6 4-PEG(G3_)_4/NK(1/1)纳米复合物的体外溶栓实验
        3.2.7 4-PEG(G_3)_4/NK(1/1)纳米复合物的体外酶活稳定性
        3.2.8 4-PEG(G_3)_4纳米材料的细胞毒性
        3.2.9 体内溶栓实验
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 端叠氮基多臂聚乙二醇(x-PEG(N_3)_x,x=2、4、6、8)的合成及表征
        3.3.2 多臂聚乙二醇-聚谷氨酸肽类树状大分子(x-PEG(G_3)_x,x=2、4、6、8)的合成及表征
        3.3.3 不同比例x-PEG(G_3)_x/NK(x=2、4、6、8)的酶活分析
        3.3.4 4-PEG(G_3)_4/NK(1/1)的粒径和形貌表征
        3.3.5 不同温度和pH储存条件下4-PEG(G_3)_4/NK(1/1)的酶活变化
        3.3.6 4-PEG(G_3)_4的细胞存活率
        3.3.7 体外溶血栓性能分析
        3.3.8 体内溶血栓性能分析
    3.4 本章小结
    参考文献
第四章 Fe_3O_4/多臂聚乳酸-聚谷氨酸肽类树状大分子的制备及其靶向溶血栓性能研究
    4.1 前言
    4.2 实验部分
        4.2.1 主要原料及仪器设备
        4.2.2 多臂聚乳酸-聚谷氨酸肽类树状大分子(x-PLA(G_3)_x,x=3、4、6)的制备
        4.2.3 纳米材料结构的表征
        4.2.4 x-PLA(G_3)_x/NK(x=3、4、6)纳米复合物的制备和表征
        4.2.5 x-PLA(G_3)_x(x=3、4、6)纳米复合物中NK酶活的测定
        4.2.6 Fe_3O_4-4-PLA(G_3)_4-RGD纳米材料的细胞毒性
        4.2.7 体外溶栓实验
        4.2.8 体内溶血栓实验
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 多臂聚乳酸(x-PLA(OH)_x,x=3、4、6)的制备及表征
        4.3.2 端叠氮基多臂聚乳酸(x-PLA(N_3)_x,x=3、4、6)的制备及表征
        4.3.3 多臂聚乳酸-聚谷氨酸肽类树状大分子(x-PLA(G_3)_x,x=3、4、6)的制备及表征
        4.3.4 不同比例x-PLA(G_3)_x/NK(x=3、4、6)的酶活分析
        4.3.5 Fe_3O_4-4-PLA(G_3)_4-RGD的形貌和磁性表征
        4.3.6 Fe_3O_4-4-PLA(G_3)_4-RGD的细胞存活率
        4.3.7 体外溶血栓性能分析
        4.3.8 体内溶血栓性能分析
    4.4 本章小结
    参考文献
第五章 Fe_3O_4/二氧化硅-聚谷氨酸肽类树状大分子的制备及其靶向溶血栓性能研究
    5.1 前言
    5.2 实验部分
        5.2.1 主要原料及仪器设备
        5.2.2 磁性介孔二氧化硅纳米粒子(M-MSNs)的制备
        5.2.3 具有双重靶向的二氧化硅-聚谷氨酸肽类树状大分子(M-MSNs-G_3-RGD)的制备
        5.2.4 纳米材料结构的表征
        5.2.5 M-MSNs-G_3-RGD/NK纳米复合物的制备和表征
        5.2.6 M-MSNs-G_3-RGD纳米复合物中NK酶活的测定
        5.2.7 M-MSNs-G_3-RGD纳米材料的细胞毒性
        5.2.8 体外溶栓实验
        5.2.9 体内溶血栓实验
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 M-MSNS-G_3-RGD的制备及其对NK的负载
        5.3.2 M-MSNS-G_3的表征
        5.3.3 M-MSNS-G_3-RGD的表征
        5.3.4 不同比例M-MSNS-G_3-RGD/NK的酶活分析
        5.3.5 M-MSNS-G_3-RGD的细胞存活率
        5.3.6 体外溶血栓性能分析
        5.3.7 体内溶血栓性能分析
    5.4 本章小结
    参考文献
全文总结
攻读博士学位期间已发表和待发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]蚓激酶的提取工艺改进研究[J]. 涂清波,苏鹏亮,林颖,陆冬莺,王赛男,马宇凡,徐丹.  天津中医药. 2018(01)
[2]肽类树状大分子的合成及其在药物传输系统中的应用[J]. 张少飞,杨建东,柳明珠,吕少瑜,高春梅,吴灿,朱召彦.  化学学报. 2016(05)
[3]使用新型耦合活化剂Oxyma高效合成利拉鲁肽[J]. 王风亮,许玲,储国超,石景,郭庆祥.  有机化学. 2016(01)
[4]Synthesis of peptide dendrimers with polyhedral oligomeric silsesquioxane cores via click chemistry[J]. Yu-Ji Pu,Hui Yuan,Ming Yang,Bin He,Zhong-Wei Gu.  Chinese Chemical Letters. 2013(10)
[5]点击化学在拓扑结构聚合物合成中的应用[J]. 胡健,何金林,张明祖,倪沛红.  高分子学报. 2013(03)
[6]肽类树状大分子及其生物医学应用[J]. 佘汶川,徐翔晖,王刚,罗奎,顾忠伟.  中国材料进展. 2012(05)
[7]Polypeptide dendrimers: Self-assembly and drug delivery[J]. XU XiangHui, LI CaiXia, LI HaiPing, LIU Rong, JIANG Chao, WU Yao, HE Bin* & GU ZhongWei* National Engineering Research Center for Biomaterials, Sichuan University, Chengdu 610064, China.  Science China（Chemistry）. 2011(02)
[8]新型生物医用材料:肽类树枝状大分子及其生物医学应用[J]. 顾忠伟,罗奎,佘汶川,吴尧,何斌.  中国科学:化学. 2010(03)
[9]聚乙二醇支载的杂环化合物库的液相合成[J]. 林旭锋,王彦广.  有机化学. 2005(10)
[10]纤溶酶原激活剂的抑制剂与动脉粥样硬化关系的研究进展[J]. 梁伟,焦洁茹.  国外医学(老年医学分册). 2001(01)



本文编号：3432620