基于纤维素酶功能的荧光探针分子的构建及应用

发布时间：2021-11-12 10:41

　　近年来,随着化石燃料的日渐枯竭及环境污染的日益严重,生物质原料的资源化、能源化利用受到人们广泛关注。木质纤维素是地球上最丰富的可再生生物质,其通过生物转化可获得多种燃料和化学品,而木质纤维素细胞壁的复杂多糖网络结构及其主要化学组分（如木质素、半纤维素、纤维素、果胶等）的交互作用,使其成为抵抗生物质降解的天然屏障,降低了生物质纤维素的可及性,进而影响木质纤维素生物质的酶解转化率。影响木质纤维素生物质可及性因素可分为直接因子和间接因子。直接因子即为纤维素的可及表面积（CASA）,其是决定纤维素酶解性能的直接因素;间接因素包括化学组成（木质素,半纤维素,纤维素,乙酰基基团,胞壁蛋白等）、基质物理结构因素（孔隙率、孔径、粒径、比表面积等）以及纤维素本身结构因素（结晶度、聚合度等）。因此,准确定量分析纤维素可及度对于研究和强化木质纤维素的生物转化具有重要意义。然而,传统用于表征木质纤维素生物质可及表面积的分析方法还存在一些不足之处。其一,所用探针分子大小往往与纤维素酶分子大小相差较大,导致所测得的可及表面积与“真实值”存在较大偏差;其二,所用探针分子对底物识别特异性较差或无特异性识别;其三,通常... 

【文章来源】：福建师范大学福建省

【文章页数】：131 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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Ｌｉｎｋｃｒ－ＴｒＣＢＭ基因序列ＰＣＲｏｄｕｃｔ?ｏｆ?ＨｉｓｔａｇＬｉｎｋｃｒ－ＴｒＣＢＭＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?；?Ｌａｎｄ?ａｎｄ?Ｌａｎｅ２丨蛋白构建及表达??酶切位点，双酶切将ｐＥ接将ＨｉｓｔａｇＬｉｎｋｅｒ－ＴｒＣＢ得表达质粒ｐＥＴ－２８ａ－Ｈｉｓｔ及测序比对均与原始目

ｐＥＴ－２８ａ－ＨｉｓｔａｇＬｉｎｋｅｒ－ＣＢＭ??５５１４ｂｐ??图１－８表达质粒ｐＥＴ－２８ａ－ＨｉｓｔａｇＬｉｎｋｅｒ－ＴｒＣＢＭＩ构建示意图??Ｆｉｇ?１－８?Ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐＥＴ－２８ａ－ＨｉｓｔａｇＬｉｎｋｃｒ－ＴｒＣＢＭ?Ｉ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ??（２）质粒富集??将构建完成的表达质粒ｐＥＴ－２８ａ－Ｈｉｓｔａｇ－Ｌｉｎｋｅｒ－ＴｒＣＢＭ通过热激的方法（参照第??一章２．２．９）转化入大肠杆菌（￡＞〇／／?ＤＨ５ａ），用添加有５０ｕｇ／ｍＬ卡那霉素的ＬＢ平??板筛选转化成功的菌株，将该菌株接种至５ｍＬ液体ＬＢ培养基中（卡那抗性），置于??４２??

【参考文献】：
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博士论文
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本文编号：3490751