喹哪啶红和刃天青在淀粉样蛋白中的新应用

发布时间：2021-12-17 07:11

　　淀粉样纤维在体内积累会导致多种疾病,例如阿尔茨海默氏病,Ⅱ型糖尿病和帕金森氏病等。因此,淀粉样蛋白变性相关研究成为化学,生物学和医学交叉领域的重要课题之一。为了监测淀粉样纤维形成过程并了解纤维形成的机理,寻找高品质的检测蛋白质缠结和淀粉样蛋白斑块的探针成为该领域的一项重要任务。在本论文中,我们发现了一种名为喹哪啶红（QR）的近红外荧光探针,该探针可识别淀粉样纤维的β-折叠结构。通过使用荧光光谱,共聚焦荧光显微镜和等温滴定量热法研究了在淀粉样纤维存在下,QR以及其他典型淀粉样蛋白探针的光化学和生物物理特性。此外,还用分子对接模拟方法计算了QR和胰岛素纤维之间的结合位点和相互作用模式。在这些淀粉样纤维探针中,QR显示出较大的优势,包括超分子力强,近红外发射峰,高灵敏度和抗漂白性。在存在血清的情况下,荧光信号与淀粉样纤维样品的浓度在1-30μM范围内呈线性响应,检出限为2.31μM。该方法在血清实际样品中的回收率和相对标准偏差分别为90.4%-99.2%和3.05%-3.47%。重要的是,QR在致病小鼠脑切片中淀粉样蛋白斑块的检测中体现出低的生物背景和高的灵敏度。我们建议QR作为监测淀粉样蛋... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

淀粉样蛋白纤维化的成核动力学[66]

第二章喹哪啶红重要的新用途-识别淀粉样纤维18图2.1QR分子结构。2.2实验部分2.2.1试剂喹哪啶红和牛胰岛素（insulin）购自于上海瑞勇生物科技有限公司。硫磺素T，硫磺素S，尼罗红，溶菌酶，纤维蛋白原于北京鼎国昌盛生物科技有限公司购买。实验用水均为去离子水。PBS缓冲溶液：Na2HPO4(10mM),KH2PO4(1.8mM),NaCl(140mM),KCl(2.7mM).；

第二章喹哪啶红重要的新用途-识别淀粉样纤维222.3结果与讨论2.3.1实验思路设计图图2.2QR与淀粉样纤维相互作用后发出近红外荧光。QR是一种常见的pH指示剂[96,97]，可识别α-酸性糖蛋白[98,99]和核酸[100,101]。在探究过程中，我们发现QR自身无荧光，与α-螺旋状态的淀粉样纤蛋白作用无荧光产生，但与β-折叠状态下的淀粉样纤维结合时在630nm处出现强的荧光发射峰，在此实验基础上我们探究了QR作为淀粉样纤维探针的潜力。通过理论模拟与实验相结合探究了QR与淀粉样蛋白的结合原理及QR与淀粉样纤维结合的发光原理。经探究发现QR与传统淀粉样纤维探针相比，具有斯托克斯位移较大，热力学作用力和抗干扰性强，在实际样品中的灵敏度高，发射处于近红外区使得生物成像背景低等优点，综上，本章描述了QR作为对淀粉样纤维的一种新的荧光探针具有潜在的应用前景，作用示意图见图2.2。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]硫、硒醇小分子荧光探针的设计、合成及其成像应用[D]. 潘月.湖南大学 2017
[2]多功能纳米诊疗剂的构建及其在肿瘤的成像与治疗中的应用研究[D]. 丁星.吉林大学 2017
[3]基于蛋白纤维模板法贵金属纳米材料的制备及电催化研究[D]. 鲜义芬.燕山大学 2014
[4]脑MRI图像分割方法的研究与实现[D]. 刘玮.华南理工大学 2012
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本文编号：3539628