超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测食品中的牛奶过敏原酪蛋白

发布时间：2021-12-30 08:18

　　基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱系统,建立了食品中牛奶过敏原酪蛋白的快速筛查和定量检测方法。样品经缓冲液提取后,采用5 kD超滤膜去除小分子杂质,得到蛋白质提取液。以数据依赖采集（data-dependent acquisition,DDA）方式获得全扫描质谱图,进行蛋白质定性确证,以平行反应监测（parallel reaction monitoring,PRM）技术对目标特征肽段进行定量分析。针对特征肽段,设计并合成了内标肽和内标物质,以降低基质效应和抵消处理过程中的损失。该方法应用于食品中的α-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白的快速筛查和定量检测。结果表明,该方法在5²50μg/L范围内线性关系良好,定量限为0.2⁵.5μg/kg,平均回收率在68.8%¹04.4%之间,RSD<6%。该方法可用于果汁饮料、果酱、面包、早餐谷物中牛奶过敏原酪蛋白的快速筛查和定量分析。 

【文章来源】：色谱. 2017,35(04)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

果汁中酪蛋白特征肽段与合成内标肽段的色谱图

剩幔恚?1－Ｈ0．55．510－250Ｙ＝0．047Ｘ＋0．1420．991Ｓ2－Ｆ0．10．55－250Ｙ＝0．031Ｘ＋0．0560．997к－Ｓ0．52．510－250Ｙ＝0．020Ｘ＋0．0860．993β－Ｖ0．051．05－250Ｙ＝0．021Ｘ－0．0170．997ＯａｔｍｅａｌＳ1－Ｈ16．010－250Ｙ＝0．129Ｘ－0．2790．997Ｓ2－Ｆ0．10．55－250Ｙ＝0．026Ｘ－0．0340．998к－Ｓ0．52．510－250Ｙ＝0．019Ｘ－0．0130．997β－Ｖ0．051．05－250Ｙ＝0．037Ｘ＋0．1890．999Ｙ：ｐｅａｋａｒｅａ；Ｘ：ｍａｓｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，μｇ／Ｌ．图34种酪蛋白特征肽段与合成内标肽段的线性响应Ｆｉｇ．3Ｌｉｎｅａｒｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｆｏｕｒｃａｓｅｉｎｓｉｇｎａｔｕｒｅｐｅｐｔｉｄｅｓａｎｄｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｐｅｐｔｉｄｅｓ图44种酪蛋白的酶解浓度随酶解时间的变化Ｆｉｇ．4Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｆｏｕｒｔｙｐｅｓｏｆｃａｓｅｉｎｓａｌｏｎｇｗｉｔｈｔｈｅｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｔｉｍｅｓ2．4方法的线性关系、ＬＯＤ和ＬＯＱ在4种样品中分别找出一个不含有牛奶的样品作为空白，采用空白基质提取液配制标准曲线，每个浓度点均加入100μＬ对应的内标肽段标准工作溶液。最终肽段Ｓ1－Ｈ和к－Ｓ的质量浓度为10、25、50、100和250μｇ／Ｌ；肽段Ｓ2－Ｆ和β－Ｖ的质量浓度为5、25、50、100和250μｇ／Ｌ。在空白基质提取液中，添加低浓度水平的标准溶液，获得每个肽段信噪比（Ｓ／Ｎ）为3时的质量浓度，作为该特征肽段的ＬＯＤ，Ｓ／Ｎ＝10时的质量浓度为ＬＯＱ，结果见表3。2．5加标回收率在4种样品的提取液中加入标准蛋白质和内标物，根据蛋白质和特征肽段的等物质的量

4种酪蛋白的酶解浓度随酶解时间的变化

【参考文献】：
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本文编号：3557819