基于衍生化与电位传感的氨基酸检测方法

发布时间：2022-10-19 11:12

　　氨基酸广泛分布于各种生物体液,参与各种各样的生物过程。生物体液及组织中氨基酸的种类和含量是诊断代谢疾病的重要指标。同时食品中氨基酸的含量与种类也会影响食品的口感、芳香性及营养价值。氨基酸的检测一直是人们研究的热点,目前现有的氨基酸检测方法都有一些不足,例如分析成本高、检测限高与测试速度慢等,因此开发新的低成本的氨基酸检测方法就迫在眉睫。本文针对氨基酸分子的特点,开发基于衍生化与电位传感两种氨基酸的检测方法,具体内容如下:（1）由于大部分氨基酸无紫外吸收且极性很大,因此在紫外检测模式下必须对其进行衍生化。以异硫氰酸苯酯作为衍生试剂对氨基酸进行化学衍生,研究了色谱柱类型、流动相组成与检测波长等色谱条件对不同氨基酸衍生物分离分析的影响。结果表明,采用C18色谱柱,以乙腈与0.1 mol/L的醋酸钠作为流动相,在254 nm的检测波长下各氨基酸衍生物均能得到较好的分离。对上述建立的方法进行方法学验证,结果表明,氨基酸衍生物峰面积与氨基酸浓度之间呈线性关系,相关系数均大于0.99,日内与日间精密度在1.26%-6.66%之间,加标回收率在在80.14%-111.85%之间,均符合方法学验证的要求... 

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 引言
    1.2 紫外检测
        1.2.1 无衍生化的紫外检测
        1.2.2 衍生化的紫外检测
    1.3 荧光检测
    1.4 质谱检测
        1.4.1 反相色谱-质谱法
        1.4.2 亲水作用色谱-质谱法
    1.5 气相色谱法
    1.6 蒸发光散射检测
    1.7 电化学检测
    1.8 微流控芯片
    1.9 主要内容与研究思路
2 苯异硫氰酸酯柱前衍生化检测氨基酸
    2.1 实验试剂及仪器
        2.1.1 实验仪器
        2.1.2 实验试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 溶液的配制
        2.2.2 衍生方法
        2.2.3 水解方法
        2.2.4 色谱条件
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 水解方法的选择
        2.3.2 衍生方法的选择
        2.3.3 色谱柱的选择
        2.3.4 梯度洗脱程序的选择
        2.3.5 紫外检测波长的选择
        2.3.6 精密度
        2.3.7 回收率
    2.4 枸杞中全氨基酸的测定
        2.4.1 枸杞样品的分析
    2.5 本章小结
3 枸杞中游离氨基酸含量的测定
    3.1 实验仪器及试剂
        3.1.1 实验仪器
        3.1.2 实验试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 溶液的配制
        3.2.2 衍生方法
        3.2.3 游离氨基酸提取方法
        3.2.4 色谱条件
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 游离氨基酸提取方法的选择
        3.3.2 提取温度的筛选
        3.3.3 提取溶剂组成的筛选
        3.3.4 料液比的选择
    3.4 枸杞样品分析
    3.5 色谱峰的识别
    3.6 本章小结
4 基于电位传感的氨基酸电化学检测
    4.1 实验试剂与仪器
        4.1.1 实验试剂
        4.1.2 实验仪器
    4.2 检测原理
    4.3 实验方法
        4.3.1 溶液配制
        4.3.2 离子选择性膜的制备
        4.3.3 实验方法
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 电极的能斯特响应
        4.4.2 电极的重现性
        4.4.3 内充液浓度的选择
        4.4.4 缓冲液浓度的选择
        4.4.5 有机相比例的筛选
    4.5 氨基酸的检测
    4.6 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间发表学术论文情况
致谢



本文编号：3693261