基于金属纳米材料光学检测DNA甲基化

发布时间：2023-04-16 19:38

　　本文基于末端脱氧核苷酸转移酶延伸聚T碱基序列原位生成的铜纳米簇,和通过简单的水热法合成的金纳米粒子来构建光学传感器检测DNA甲基化。论文主要由以下几个部分组成:1.绪论部分主要介绍了表观遗传学的概念及其研究内容、DNA甲基化的概念及其检测方法、金属纳米材料及其相关的应用,着重介绍了检测DNA甲基化的方法和铜纳米簇与金纳米粒子的性质及其应用。最后阐述了本论文的主要研究内容及研究意义。2.基于末端脱氧核苷酸转移酶延伸聚T碱基序列原位生成的铜纳米簇,构建了一种无标记荧光探针检测甲基转移酶活性的方法。基于CpG甲基转移酶M.SssI和限制性核酸内切酶HpaⅡ的特异性识别以及末端脱氧核苷酸转移酶的延伸效果和铜纳米簇优异的荧光信号,可实现对M.SssI MTase活性的检测。利用末端脱氧核苷酸转移酶催化的有效聚合延伸反应和具有大斯托克斯位移的铜纳米簇代替荧光染料标记,实现了灵敏度的提高及检测范围的拓宽,检测的线性范围为1-300 U mL-1,检测限为0.176 U mL-1。此方法对M.SssI具有特异性,并且可应用于筛选甲基转移酶抑制剂。3.基于未修饰的金纳米粒子,构建了一种无标记和无酶的一步...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 表观遗传学
        1.1.1 表观遗传学概述
        1.1.2 表观遗传学研究内容
    1.2 DNA甲基化
        1.2.1 DNA甲基化的简介
        1.2.2 甲基转移酶的简介
        1.2.3 区分甲基化DNA的基本方法
        1.2.4 检测DNA甲基化的基本方法
    1.3 金属纳米材料
        1.3.1 金属纳米材料的简介
        1.3.2 铜纳米簇性质及其应用
        1.3.3 金纳米粒子性质及其应用
    1.4 本论文的主要研究内容
第2章 基于末端脱氧核苷酸转移酶延伸聚T碱基序列原位生成铜纳米簇检测甲基转移酶活性
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验药品与试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 发夹DNA的甲基化和剪切
        2.2.4 甲基转移酶的活性检测
        2.2.5 M.SssI选择性研究
        2.2.6 M.SssI MTase抑制评估
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 可行性分析
        2.3.2 实验条件的优化
        2.3.3 M.SssI MTase活性检测
        2.3.4 选择性分析
        2.3.5 抑制效果研究
    2.4 结论
第3章 基于未修饰的金纳米粒子的一步法快速比色检测DNA甲基化
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验药品与试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 金纳米粒子的制备
        3.2.4 亚硫酸氢盐处理DNA
        3.2.5 DNA杂交
        3.2.6 比色分析DNA甲基化
        3.2.7 实际样品检测
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 可行性分析
        3.3.2 实验条件的优化
        3.3.3 检测甲基化的DNA
        3.3.4 人血清样品中检测甲基化DNA
    3.4 绪论
第4章 总结与展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果



本文编号：3791738