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荧光碳点传感器的构建及其在酶活性检测中的应用

发布时间:2023-04-25 05:39
  碳点(CDs)是一种具有分散性的碳纳米颗粒,具有优良的荧光性质、良好的水溶性、稳定性和生物相容性,以及无毒、环保、低成本等优点,近年来被广泛应用于材料学、生物学、医学等各个领域。生物酶与人体的许多疾病息息相关,利用生物酶来进行医学诊断的研究越来越广泛,而利用简单快速的化学方法来检测生物酶,为医学疾病的诊断提供了新的思路和方法。在本课题中,我们在相对温和的条件下合成荧光纳米材料作为探针,以酶活性单元作为生物敏感单元,构建对目标分析物高选择性的检测器。1. 建立了由荧光聚多巴胺纳米粒子(F-PDA)和羟基氧化钴(Co OOH)纳米片制备的新型F-PDA-Co OOH探针,用于测定α-葡萄糖苷酶的活性。巧妙地结合并利用了两种纳米材料之间的荧光能量共振转移(FRET)效应,通过荧光“开启”模式成功测定了α-葡萄糖苷酶活性。当α-葡萄糖苷酶的活性在2-80 U/L之间与F-PDA的荧光强度具有良好的线性关系,检测限低至1.65 U/L。该探针易于制备,具有良好的选择性、灵敏度和准确性,在人体血清样品检测中显示出较好的适用性。2. 由对氨基苯酚和乙二胺在50℃加热条件下,一步合成了荧光碳点(CDs...

【文章页数】:130 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
缩略语表
第一章 绪论
    1.1 引言
    1.2 荧光碳点的简介
        1.2.1 碳点的分类
        1.2.2 碳点的性质
    1.3 荧光碳点的合成
        1.3.1 水热法
        1.3.2 化学氧化法
        1.3.3 电化学法
    1.4 荧光碳点的应用
        1.4.1 碳点在无机物检测中的应用
        1.4.2 碳点在有机小分子检测中的应用
        1.4.3 碳点在生物大分子检测中的应用
    1.5 本课题的研究意义及内容
第二章 构建F-PDA-Co OOH纳米传感器用于α-葡萄糖苷酶活性及其抑制剂的检测
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 CoOOH纳米片的制备及表征
        2.2.4 F-PDA纳米粒子的制备及表征
        2.2.5 Co OOH与 F-PDA之间的猝灭效应
        2.2.6 抗坏血酸的测定
        2.2.7 α-葡萄糖苷酶活性的测定
        2.2.8 阿卡波糖抑制率的测定
        2.2.9 传感器的特异性测试
        2.2.10 人体血清样品中α-葡萄糖苷酶活性的测定
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 CoOOH纳米片的表征
        2.3.2 F-PDA纳米粒子的表征
        2.3.3 Co OOH与 F-PDA的猝灭效应机理探究
        2.3.4 抗坏血酸的检测
        2.3.5 α-葡萄糖苷酶活性的定量检测
        2.3.6 阿卡波糖抑制率的检测
        2.3.7 传感器的特异性
        2.3.8 人体血清样品中的α-葡萄糖苷酶活性检测
    2.4 本章小结
第三章 构建碳点荧光纳米探针用于NAG活性检测及应用
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 荧光碳点CDs的制备与表征
        3.2.4 荧光碳点CDs的量子产率测量
        3.2.5 NAG活性的测定
        3.2.6 传感器的特异性测试
        3.2.7 NAG活性测定传感器的应用
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 荧光碳点CDs的表征
        3.3.2 基于内滤波效应的荧光猝灭机理
        3.3.3 NAG活性的定量检测
        3.3.4 检测方法的特异性
        3.3.5 NAG活性检测在人体样品中的应用
    3.4 本章小结
第四章 构建CDs-EPA荧光传感器用于葡萄糖浓度检测及应用
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 实验试剂
        4.2.2 实验仪器
        4.2.3 荧光碳点CDs的制备与表征
        4.2.4 H2O2对EPA的氧化实验
        4.2.5 H2O2浓度的测定
        4.2.6 葡萄糖浓度的测定
        4.2.7 传感器的特异性测试
        4.2.8 人体血清样品中葡萄糖浓度的测定
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 荧光碳点CDs的表征
        4.3.2 H2O2对EPA的氧化实验
        4.3.3 荧光猝灭机理验证
        4.3.4 H2O2浓度的定量检测
        4.3.5 葡萄糖浓度的定量检测
        4.3.6 传感器的特异性
        4.3.7 人体血清样品中葡萄糖浓度的测定
    4.4 本章小结
第五章 构建荧光纳米碳点CDs传感器用于酪氨酸酶活性和曲酸浓度的检测及应用
    5.1 引言
    5.2 实验部分
        5.2.1 实验试剂
        5.2.2 实验仪器
        5.2.3 荧光碳点CDs的制备与表征
        5.2.4 检测条件优化选择
        5.2.5 荧光探针的选择性实验
        5.2.6 TYR活性的测定
        5.2.7 曲酸浓度的测定
        5.2.8 土豆和杏鲍菇中的TYR活性检测
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 荧光碳点CDs的表征
        5.3.2 荧光碳点猝灭机理
        5.3.3 荧光探针的特异性
        5.3.4 TYR活性的检测
        5.3.5 曲酸抑制率检测
        5.3.6 TYR活性检测的应用
    5.4 本章小结
结论与展望
参考文献
硕士期间发表论文
致谢



本文编号:3800819

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