基于目标循环放大及背景抑制策略构建灵敏的DNA荧光生物传感器的研究

发布时间：2024-06-28 19:20

　　生物传感器是由分析化学、生物化学、生物医学和生物技术等领域相互渗透而形成的一个新兴的研究课题。生物传感器凭借其设备简单、易于携带、测试成本低廉、检测快速方便、结果灵敏可靠以及易于实现原位活体检测等优势,跻身当前的研究热点之一。DNA荧光传感器便是其中一种。DNA荧光生物传感器通过DNA生物传感器将目标物的信号转换成荧光信号进行输出和检测,进而对目标物进行定性及定量分析。这种分析方法将生物传感器的特异性、易于实现多种放大策略的优点和荧光传感器的高灵敏度、高选择性和较高的仪器普及率等特点结合起来,大大提高了分析测试的灵敏度、准确度和可操作性。这些特点使得DNA荧光生物传感器吸引了大量研究者的目光,因而该技术也得到了不断的发展。然而随着基因测序、疾病诊断、食品药品监控、环境保护等领域对于分析检测技术的要求不断提高,DNA荧光传感器的研究也迫切需要更加深入,以期发展出更加灵敏快速、准确可靠、简易、实惠的测定方法,服务科研和社会。本文以DNA荧光传感技术为基础结合多种酶利用目标循环放大策略来提高方法的灵敏度,同时采用核酸外切酶Ⅲ和氧化石墨烯(GO)以实现对荧光背景信号的降低,构建了三种生物传感器...

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
    1.1 DNA生物传感器
        1.1.1 DNA
        1.1.2 生物传感器
        1.1.3 DNA荧光型生物传感器的优点及应用
    1.2 赛博绿 Ⅰ 荧光染料
        1.2.1 赛博绿 Ⅰ 荧光染料简介
        1.2.2 赛博绿 Ⅰ 荧光染料在DNA荧光传感器中的应用
    1.3 提高DNA传感器灵敏度的方法
        1.3.1 DNA传感器的信号放大策略
        1.3.2 DNA传感器的背景抑制策略
    1.4 本文的研究思路
第2章 基于toehold链置换反应驱动的目标循环放大以及外切酶 Ⅲ 辅助背景信号降低原理构建荧光传感器用于突变DNA序列的检测
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 试剂及材料
        2.2.2 仪器装置
        2.2.3 DNA传感过程
        2.2.4 荧光测定过程
        2.2.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
        2.2.6 在血清样品中进行回收率试验
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 机理及其验证
        2.3.2 实验条件的优化
        2.3.3 灵敏度的研究
        2.3.4 检测目标DNA的选择性和重复性探究
        2.3.5 实际应用前景的探究
    2.4 结论
第3章 基于toehold链置换反应驱动的目标循环放大以及外切酶 Ⅲ 辅助背景信号降低原理构建荧光传感器用于凝血酶的检测
    3.1 前言
    3.2 实验部分
        3.2.1 试剂及材料
        3.2.2 仪器装置
        3.2.3 DNA传感过程
        3.2.4 荧光测定过程
        3.2.5 在血清样品中进行回收率试验
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 机理及其验证
        3.3.2 实验条件的优化
        3.3.3 灵敏度的研究
        3.3.4 检测凝血酶的选择性探究
        3.3.5 实际应用前景的探究
    3.4 结论
第4章 基于脱氧核酶和Klenow Fragment, Exo- 聚合酶的双重信号循环放大和氧化石墨烯辅助的背景信号降低策略检测L-组氨酸
    4.1 前言
    4.2 实验部分
        4.2.1 试剂及材料
        4.2.2 仪器装置
        4.2.3 DNA传感过程
        4.2.4 荧光测定过程
        4.2.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
        4.2.6 在血清样品中进行回收率试验
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 机理及其验证
        4.3.2 实验条件的优化
        4.3.3 灵敏度的研究
        4.3.4 检测L-组氨酸的选择性探究
        4.3.5 实际应用前景的探究
    4.4 结论
参考文献
硕士期间发表的论文
致谢



本文编号：3996557