光谱法研究三种四吡咯化合物与牛血清白蛋白的相互作用
本文关键词:光谱法研究三种四吡咯化合物与牛血清白蛋白的相互作用
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【摘要】:本论文在模拟人体生理条件下,运用荧光、紫外可见光谱法研究了三种四吡咯类化合物与牛血清白蛋白相互作用,主要包括以下三个部分:1、运用光谱技术研究了21-(Ph-N=N)-NCTPP与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。结果表明,21-(Ph-N=N)-NCTPP通过动静结合的混合猝灭机制对BSA的内源荧光有较强的猝灭作用。通过计算得到了21-(Ph-N=N)-NCTPP与BSA之间的结合常数和结合位点数。在三个不同温度下得到的热力学参数表明该结合过程是自发进行的,且它们之间的结合作用力是疏水作用力。根据非辐射能量转移原理,得到了受体与给体之间的结合距离。同时,同步荧光证明了21-(Ph-N=N)-NCTP几乎不改变BSA的构象。2、在298、304和310 K下研究了10,20-二(2,4,6-三甲基苯基)-5,15-二氮杂卟啉镍配合物(Ni-DAP)与BSA的相互作用。研究表明,它们的结合常数都在104以上,这说明它们的结合作用很强,结合位点数约为1,说明二者在反应过程中以1:1的摩尔比相结合形成复合物(Ni-DAP-BSA)。根据热力学方程,求得了它们之间的热力学参数及作用力类型。由于其结合距离小于7 nm,证明非辐射能量转移发生的可能性很大。此外,同步荧光表明Ni-DAP对BSA构象的改变是疏水性增强而引起的。3、利用荧光和紫外可见光谱法开展了Norcorrole与BSA相互作用的研究。研究发现:它们之间存在较强的作用,用Stern-Volmer方程对实验数据进行处理是发现在低浓度时,二者的猝灭机制是静态猝灭,加大Norcorrole的浓度时,其对BSA的荧光猝灭机制为动静结合的混合猝灭机制。测得BSA在加入Norcorrole前后的荧光寿命,进一步验证了其猝灭机理。运用改进的双对数方程求出了Norcorrole与BSA间的结合常数与结合位点数。根据Van’t Hoff方程得到了相关的热力学参数(ΔH,ΔS和ΔG)。计算得到Norcorrole与BSA的结合距离为3.67 nm。本论文通过对这三种四吡咯化合物与牛血清白蛋白相互作用的研究,为药物在体内的转运等提供了有用的参数。
【关键词】:荧光光谱法 紫外可见光谱法 吡咯化合物 牛血清白蛋白 相互作用
【学位授予单位】:湖南科技大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R96;O657.3
【目录】:
- 摘要5-6
- ABSTRACT6-11
- 第一章 绪论11-29
- 1.1 血清白蛋白简介11-15
- 1.1.1 血清白蛋白的结构11-13
- 1.1.2 血清白蛋白的功能13-15
- 1.2 四吡咯化合物简介15-17
- 1.3 蛋白质与小分子化合物相互作用的光谱学研究方法17-18
- 1.3.1 荧光光谱法17
- 1.3.2 紫外可见光谱17-18
- 1.4 小分子化合物与蛋白质分子作用的理论依据18-23
- 1.4.1 内滤效应18-19
- 1.4.2 猝灭机制的确定19-20
- 1.4.3 结合常数及结合位点数的求算20-21
- 1.4.4 热力学参数与相互作用力类型的判断21-22
- 1.4.5 结合距离的确定22-23
- 1.4.6 同步荧光法判断小分子化合物对BSA构象的影响23
- 1.5 本论文的研究内容及其意义23-24
- 参考文献24-29
- 第二章 21-(Ph-N=N)-NCTPP与牛血清白蛋白相互作用的光谱研究29-43
- 2.1 引言29-30
- 2.2 实验部分30-32
- 2.2.1 仪器和试剂30-31
- 2.2.2 实验方法31-32
- 2.3 结果与讨论32-39
- 2.3.1 21-(Ph-N=N)-NCTPP对BSA的荧光猝灭光谱32-33
- 2.3.2 猝灭机理的探究33-34
- 2.3.3 紫外 -可见吸收光谱34-35
- 2.3.4 结合常数和结合位点35-37
- 2.3.5 热力学参数和结合力类型37-38
- 2.3.6 结合距离的求算38-39
- 2.3.7 同步荧光光谱39
- 2.4 本章小结39-40
- 参考文献40-43
- 第三章 光谱法研究Ni-DAP与牛血清白蛋白的相互作用43-55
- 3.1 引言43-44
- 3.2 实验部分44-47
- 3.2.1 仪器和试剂44-45
- 3.2.2 实验方法45-47
- 3.3 结果与讨论47-53
- 3.3.1 Ni-DAP对BSA的荧光猝灭作用47
- 3.3.2 Ni-DAP对BSA荧光猝灭机理的探究47-49
- 3.3.3 结合常数和结合位点数的确定49-50
- 3.3.4 紫外吸收光谱50
- 3.3.5 结合作用力类型50-51
- 3.3.6 结合距离的求算51-52
- 3.3.7 同步荧光光谱52-53
- 3.4 本章小结53
- 参考文献53-55
- 第四章 光谱法研究Norcorrole与BSA的相互作用55-69
- 4.1 引言55-56
- 4.2 实验部分56-58
- 4.2.1 仪器和试剂56-57
- 4.2.2 实验方法57-58
- 4.3 结果与讨论58-65
- 4.3.1 Norcorrole对BSA的荧光猝灭作用58-59
- 4.3.2 猝灭机理的探究59-60
- 4.3.3 荧光寿命60-61
- 4.3.4 紫外 -可见吸收光谱61-62
- 4.3.5 结合常数和结合位点62-63
- 4.3.6 热力学参数和结合力类型63-64
- 4.3.7 能量转移64-65
- 4.4 本章小结65
- 参考文献65-69
- 第五章 结论与展望69-71
- 致谢71-73
- 附录73
【参考文献】
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,本文编号:647786
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