野蔷薇根多糖的提

发布时间：2017-08-31 04:37

  本文关键词：野蔷薇根多糖的提取、纯化及生物活性研究

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【摘要】：本文选野蔷薇根(Rosa Multiflora Thunb)为原料,以野蔷薇根多糖为研究对象,较系统地研究了其提取、分离纯化的工艺条件。通过对野蔷薇根多糖的抗氧化性及抑菌功能进行了初步研究,为其在食品、医药及保健品等方面的应用奠定基础。研究结果如下:(1)考察不同提取方法对野蔷薇根多糖得率的影响。分别采用热水提取法、微波法、超声波法、超声微波法、酶解法和超声微波法酶解协同法提取野蔷薇根多糖,并设计响应曲面法优化超声-微波辅助提取和超声微波法酶解协同法提取的最佳工艺。结果表明,超声-微波辅助提取和超声微波法酶解协同法提取的得率最高。超声-微波辅助法提取野蔷薇根多糖的最佳工艺条件为:提取时间22 min,微波功率317 W,提取温度81℃,料液比32:1(mL/g),实测的多糖得率为6.10mg/g;超声微波法酶解协同法提取野蔷薇根多糖的最佳工艺条件为:纤维素酶添加量1.15%(酶活为40U/mg)、pH值5.72、提取温度81.19℃、液料比12.56:1(mL/g)。在此条件下,野蔷薇根多糖的得率为10.48mg/g。(2)筛选野蔷薇根多糖脱蛋白的最佳工艺。以蛋白去除率为主要考察指标,比较了Sevag法、TCA法(三氯乙酸法)、酶法及TCA-酶结合法对野蔷薇根多糖脱蛋白率的效果,并采用响应曲面法优化TCA法脱蛋白的最佳工艺。结果,优化后的TCA法脱蛋白最佳工艺为:TCA质量分数0.9%、体积比1:1、静置时间70min。在此条件下,蛋白去除率为75.92%,多糖损失率为22.57%。(3)探讨双氧水法脱色野蔷薇根多糖的最佳工艺条件。用双氧水法脱色野蔷薇根多糖,通过响应曲面法确定野蔷薇根多糖脱色的最佳工艺条件。双氧水法对野蔷薇根多糖的最佳脱色工艺条件为:H2O2体积分数35.0%、pH 9.0、脱色时间4.5 h,此时多糖脱色率和保留率分别为95.48%和75.17%。(4)建立野蔷薇根多糖分离纯化的方法,利用DEAE-52纤维素对野蔷薇根多糖进行分离纯化,并优化其工艺。结果,最佳分离纯化工艺参数为:离子强度为:水、0.1mol/L和0.3mol/L NaCl,DEAE-52纤维素添加量30g、流速30mL/h;经DEAE-52纤维素柱层析得到的三个组分RMTP-1、RMTP-2及RMTP-3通过冻融实验、紫外光谱鉴定为均一性的野蔷薇根多糖组分。紫外光谱分析结果表明该多糖组分不含核酸和蛋白质。(5)通过理化性质研究,野蔷薇根多糖RMTP-1和RMTP-2为不含蛋白质及酚类物质、具有多糖类化合物的通性。红外光谱分析表明,RMTP-1和RMTP-2都具有多糖的特征吸收峰。通过气质联用法(GC-MS)测定RMTP-1、RMTP-2的单糖组成:RMTP-1主要由木糖、果糖及甘露糖组成;RMTP-2主要由木糖和果糖组成。(6)采用化学方法对野蔷薇根多糖进行体外抗氧化活性测定,与VC进行了比较,并采用平板打孔法和试管稀释法对野蔷薇根多糖进行抑菌实验。实验结果表明,野蔷薇根多糖具有一定的抗氧化活性,野蔷薇根多糖的抗氧化性略低于VC,并在一定浓度范围内抗氧化活性与多糖含量呈正相关系;野蔷薇根多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、奇异变形杆菌都具有较明显的抑制作用。
【关键词】：野蔷薇根 多糖 提取 纯化 抗氧化性 抑菌作用
【学位授予单位】：新疆师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.63;TQ281
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-11
• 1 前言11-17
• 1.1 野蔷薇的简述11-12
• 1.1.1 野蔷薇的分类地位与形态特征11
• 1.1.2 野生蔷薇属植物资源的开发利用价值11-12
• 1.1.3 成分与功效12
• 1.2 多糖研究进展12-15
• 1.2.1 多糖的提取12-13
• 1.2.2 多糖的生物活性13
• 1.2.3 多糖的分离纯化13-14
• 1.2.4 多糖的含量测定与结构分析14-15
• 1.3 本课题的研究目的意义，，主要内容和创新点15-17
• 1.3.1 研究目的意义15-16
• 1.3.2 主要内容16
• 1.3.3 本论文的创新点16-17
• 2 野蔷薇根多糖的提取工艺研究17-36
• 2.1 实验材料17-18
• 2.1.1 原料17
• 2.1.2 试剂17
• 2.1.3 仪器设备17-18
• 2.2 实验方法18-20
• 2.2.1 原料预处理18
• 2.2.2 野蔷薇根多糖提取工艺流程18
• 2.2.3 超声微波提取18
• 2.2.4 超声微波提取响应面优化实验设计18-19
• 2.2.5 超声微波酶解协同提取19
• 2.2.6 超声微波酶解协同提取响应面优化实验设计19
• 2.2.7 不同提取方法19-20
• 2.2.8 多糖含量的测定20
• 2.3 结果与讨论20-34
• 2.3.1 超声微波提取单因素实验20-23
• 2.3.2 响应曲面法优化超声微波提取工艺23-25
• 2.3.3 响应曲面与等高线分析25-27
• 2.3.4 超声微波提取最佳工艺参数的确定及模型验证27
• 2.3.5 超声微波酶解协同提取单因素实验27-30
• 2.3.6 响应曲面法优化超声微波酶解协同提取工艺30-32
• 2.3.7 响应曲面与等高线分析32-34
• 2.3.8 超声-微波酶解协同提取最佳工艺参数的确定及模型验证34
• 2.3.9 不同提取方法比较34
• 2.4 本章小结34-36
• 3 野蔷薇根多糖的分离纯化36-56
• 3.1 实验材料36-38
• 3.1.1 原料36
• 3.1.2 试剂36-37
• 3.1.3 仪器设备37-38
• 3.2 实验方法38-41
• 3.2.1 野蔷薇根多糖的分离纯化工艺流程38
• 3.2.2 脱蛋白38-39
• 3.2.3 脱色39-40
• 3.2.4 DEAE-52纤维素离子交换柱层析40-41
• 3.2.5 纯度鉴定41
• 3.3 结果与讨论41-54
• 3.3.1 脱蛋白单因素实验结果41-43
• 3.3.2 响应曲面法优化脱蛋白工艺43-45
• 3.3.3 脱蛋白参数的优化与模型验证实验45-46
• 3.3.4 不同脱蛋白方法的比较46
• 3.3.5 脱色单因素实验结果46-48
• 3.3.6 响应曲面法优化脱色工艺48-50
• 3.3.7 脱色参数的优化与模型验证实验50-51
• 3.3.8 DEAE-52纤维素离子交换柱层析的条件选择51-53
• 3.3.9 多糖的DEAE-52纤维素离子交换层析53
• 3.3.10 纯度鉴定53-54
• 3.4 本章小结54-56
• 4 野蔷薇根多糖初步结构鉴定及生物活性研究56-66
• 4.1 实验材料56-57
• 4.1.1 原料56
• 4.1.2 试剂56-57
• 4.1.3 仪器设备57
• 4.2 实验方法57-60
• 4.2.1 野蔷薇根多糖组分的基本理化性质57-58
• 4.2.2 野蔷薇根多糖组分的红外光谱测定58
• 4.2.3 野蔷薇根多糖组分的气质联用（CG-MS）测定58
• 4.2.4 抗氧化实验58-60
• 4.2.5 抑菌实验60
• 4.3 结果与讨论60-65
• 4.3.1 野蔷薇根多糖组分的基本理化性质分析60
• 4.3.2 红外光谱分析60-61
• 4.3.3 气质联用（GC-MS）分析61-63
• 4.3.4 抗氧化实验结果63-64
• 4.3.5 野蔷薇根多糖抑菌实验结果64-65
• 4.4 本章小结65-66
• 结论66-68
• 参考文献68-74
• 在学期间公开发表论文及著作情况74-75
• 致谢75

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本文编号：763501