新型亲水作用色谱固定相制备及其用于壳寡糖分析的研究

发布时间：2017-09-13 12:34

  本文关键词：新型亲水作用色谱固定相制备及其用于壳寡糖分析的研究

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【摘要】：本文将亲水相互作用色谱技术应用到了对壳寡糖混合物的分离中。首先对国内外在亲水相互作用色谱方面的研究现状进行了概括,然后介绍了壳寡糖现有的分离、分析手段以及生物活性。实验主要包括三个部分:首先,采用等摩尔连续变换法筛选出3-氨基苯硼酸作为功能单体。继而确定了苯硼酸化胶的合成步骤:第一步以硅胶为基质与γ-氯丙基三乙氧基硅烷反应合成氯代化硅胶;第二步以氯代化硅胶为基质与3-氨基苯硼酸反应合成苯硼酸化硅胶,并分别进行了两个合成步骤最优合成条件的确定。分别扫描电镜、红外光谱、热重分析、元素分析等手段对氯代化硅胶以及苯硼酸化硅胶进行表征,并将最终合成产物苯硼酸化硅胶进行分析型色谱柱的装填。然后,在亲水色谱条件下对苯硼酸化硅胶柱进行保留特性的研究。发现碱基和核苷样品的保留时间随流动相中强洗脱剂的含量的增加而减少,符合亲水相互作用色谱模式。本文还分别研究了盐浓度、流动相p H以及柱温等因素对其保留的影响。结果表明,随着流动相中离子强度增加,溶质的保留时间均增加,而且极性越大的溶质,其保留时间增加的越多;流动相中pH对溶质保留影响研究时发现溶质保留时间随流动相p H变化很小;随着柱温升高,溶质的保留时间有所下降。最后,本文将苯硼酸化硅胶柱应用于壳寡糖样品的分离,在流动相:75%乙腈,25%水溶液-1.8%TEA,p H=7.8,流速为1.0 m L/min,柱温为25℃;示差检测器的分离条件下可以将聚合度从二至六的壳寡糖混合标准品完全分离,且峰形良好。证明了该色谱柱对壳寡糖混合物的分离具有较好的分离效果。
【关键词】：壳寡糖 亲水相互作用 色谱 3-氨基苯硼酸
【学位授予单位】：哈尔滨工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O652.63;O636.1
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第1章 绪论10-22
• 1.1 国外研究现状10-19
• 1.1.1 亲水作用色谱技术10-13
• 1.1.2 壳寡糖的生物活性13-16
• 1.1.3 壳寡糖分析方法16-19
• 1.2 本课题研究的主要内容19-22
• 1.2.1 本文合成苯硼酸化硅胶的步骤及原理19
• 1.2.2 本研究的技术路线19-20
• 1.2.3 研究目的及意义20-21
• 1.2.4 主要研究内容21-22
• 第2章 实验材料与方法22-33
• 2.1 实验材料22-23
• 2.1.1 试剂与材料22
• 2.1.2 实验仪器22-23
• 2.2 二氧化硅的化学修饰23-26
• 2.2.1 功能单体的筛选23-24
• 2.2.2 硅胶的改性24-26
• 2.3 苯硼酸化硅胶的结构表征26-28
• 2.3.1 扫描电子显微镜分析26
• 2.3.2 红外光谱分析26-27
• 2.3.3 氮气吸附27
• 2.3.4 元素分析27-28
• 2.3.5 硅胶表面基团数量28
• 2.3.6 热重分析28
• 2.4 苯硼酸化硅胶柱保留行为的研究28-31
• 2.4.1 碱基溶液与流动相溶液的配制29
• 2.4.2 苯硼酸改性硅胶柱的保留机理29-30
• 2.4.3 离子强度对溶质保留的影响30
• 2.4.4 流动相p H对溶质保留的影响30-31
• 2.4.5 柱温对溶质保留的影响31
• 2.5 苯硼酸化硅胶柱对壳寡糖的分离31-33
• 2.5.1 壳寡糖标准品的分离31-32
• 2.5.2 壳寡糖样品的分离32-33
• 第3章 苯硼酸化硅胶的制备及表征33-44
• 3.1 功能单体的筛选33-34
• 3.2 二氧化硅的化学修饰34-39
• 3.2.1 制备Si O2@Cl最佳反应条件的确定34-37
• 3.2.2 制备苯硼酸化硅胶最优条件的确定37-39
• 3.3 苯硼酸化硅胶的结构表征39-42
• 3.3.1 扫描电子显微镜分析39-40
• 3.3.2 红外光谱分析40-41
• 3.3.3 氮气吸附及元素分析41
• 3.3.4 热重分析41-42
• 3.4 本章小结42-44
• 第4章 苯硼酸化硅胶色谱柱保留行为研究44-52
• 4.1 苯硼酸化硅胶柱的HILIC保留行为44-45
• 4.2 苯硼酸化硅胶柱的保留机理45-47
• 4.3 不同色谱条件对溶质保留的影响47-50
• 4.3.1 离子强度47-48
• 4.3.2 流动相p H48
• 4.3.3 柱温48-49
• 4.3.4 苯硼酸化硅胶柱吸附热力学研究49-50
• 4.4 本章小结50-52
• 第5章 苯硼酸化硅胶柱对壳寡糖的分离52-57
• 5.1 苯硼酸化硅胶柱对壳寡糖标品的分离52-55
• 5.1.1 流动相p H对溶质保留影响53-54
• 5.1.2 流速对溶质保留的影响54-55
• 5.2 苯硼酸化硅胶柱对壳寡糖样品的分离55-56
• 5.2.1 苯硼酸化硅胶柱对壳寡糖-Ⅰ的分离55
• 5.2.2 苯硼酸化硅胶柱对壳寡糖-Ⅱ的分离55-56
• 5.3 本章小结56-57
• 结论57-59
• 参考文献59-67
• 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果67-69
• 致谢69

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 常海艳,陈建军,方芳,陈则;流感病毒灭活疫苗新型佐剂——壳聚糖增强免疫作用研究[J];中国生物制品学杂志;2004年06期

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本文编号：843773