低浓度甲醛对多肽和蛋白化学修饰的质谱研究

发布时间：2017-09-14 04:41

  本文关键词：低浓度甲醛对多肽和蛋白化学修饰的质谱研究

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【摘要】：采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和纳升电喷雾四极杆飞行时间串联质谱(Nano-ESI-QTOF MS)技术,以标准肽段和流感病毒基质蛋白酶切肽段为模型,研究了甲醛对蛋白质和多肽主链的修饰作用。采用与实际病毒灭活过程一致的实验条件(4℃,0.025%(V/V)福尔马林(37%(w/w)甲醛溶液)处理72 h),进行甲醛与多肽的化学反应。结果表明,在实验条件下,甲醛能与标准肽段N端的氨基反应生成羟甲基加合物,再发生缩合反应生成亚胺,形成+12 Da的产物。此外,甲醛还能与标准肽段中的精氨酸、赖氨酸的侧链发生反应,生成+12 Da的反应产物。对流感病毒基质蛋白的酶切肽段与甲醛的反应的质谱分析结果显示,多数的肽段都生成了+24 Da的产物,质量的增加来源于肽段N端氨基(+12 Da)和C端精氨酸或赖氨酸的侧链(+12 Da)的贡献。此外,还观察到有一个漏切位点的肽段生成了+36 Da的产物。本研究结果表明,在实验条件下,低浓度甲醛主要与肽段和蛋白的N端氨基,以及精氨酸和赖氨酸侧链发生反应。本研究为分析低浓度甲醛与蛋白质的反应产物提供了有效的质谱分析方法和解谱依据。
【作者单位】： 吉林大学第二医院;吉林亚泰生物药业股份有限公司;吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室;
【关键词】： 甲醛 多肽 基质蛋白 化学修饰 质谱
【基金】：国家自然科学基金(Nos.81472030,31372409,21175055) 吉林省科技厅项目(Nos.20110739,20150204001YY) 吉林大学白求恩计划B(2012210)资助~~
【分类号】：O657.63;O629.7
【正文快照】： 1引言在生物医学领域,甲醛被广泛用于临床组织样本的固定,以及毒素和病毒的灭活等。甲醛能与生物大分子尤其是蛋白质的活性基团发生反应,从而将蛋白质交联、失活,甚至固定。在致病微生物尤其是高致病性微生物(如禽流感病毒)的研究中,经常使用一定浓度的甲醛溶液处理样本,使微，

本文编号：847936