8-羟基喹啉类巯基荧光探针的研究

发布时间：2017-09-19 04:06

  本文关键词：8-羟基喹啉类巯基荧光探针的研究

  更多相关文章： 荧光分析法 8-羟基喹啉 半胱氨酸(Cys) 谷胱甘肽(GSH) 细胞成像

【摘要】：荧光分析法具有高灵敏度、高选择性,可实现细胞内定位以及对生物组织破坏性小等优点,因此已广泛用于生物医学、环境检测等领域。生物体内巯基化合物如半胱氨酸(Cys)、高半胱氨酸(Hcy)、谷胱甘肽(GSH)等对维持细胞内环境的稳定性具有重要作用。设计合成出具有单一选择性检测巯基化合物已成为当前的研究热点。本文在巯基荧光探针的研究工作如下:(1)设计合成了一种以5-氨基-8-羟基喹啉为荧光基团,2,4-二硝基苯磺酰基为识别基团的探针5-(2,4-二硝基苯磺酰氨)-8-羟基喹啉H1。研究表明,探针H1本身荧光很弱,当加入Cys后,在530nm处荧光强度出现明显增强。在最优条件下(t=35min,T=37℃,pH=7.4),H1对Cys测定的线性范围为7×10-5mol/L至2.7×10-4mol/L,检测限为7.9×10-7mol/L。其他巯基化合物不干扰测定。探针H1已成功用于细胞内Cys的荧光成像。(2)以5-氨基-8羟基喹啉与乙二醛为原料合成荧光探针H2,并考察了其对巯基化合物的选择性。研究表明,H2本身荧光很弱,在最佳条件下(pH=7.4、T=50℃、t=120mim)探针H2与Cys反应,在430nm处荧光增强,分别在5.0×10-5-1.0×10-4mol/L和1.0×10-4-7.0×10-4mol/L浓度范围内荧光变化与Cys浓度呈线性关系,检测限分别为4.4×10-7mol/L、3.5×10-6mol/L。其他巯基化合物不干扰测定,探针H2已成功用于HeLa细胞内Cys的荧成像。(3)合成了一种多功能荧光探针5-(对二甲氨基苯甲胺)-8-羟基喹啉H3。研究表明,在酸性条件下,H3可用作为一种比率型pH荧光探针,响应范围pH为2-7,pKa为5.47。在碱性条件及十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)存在下,Cd~(2+)和Al~(3+)能使H_3荧光显著增强,而GSH能够使H3-CTAB-Cd~(2+)体系的荧光显著下降,据此建立了胶束增敏荧光光度法测定GSH的方法。该方法线性范围5-250μmol/L,检测限为5.81×10-8 mol/L。
【关键词】：荧光分析法 8-羟基喹啉 半胱氨酸(Cys) 谷胱甘肽(GSH) 细胞成像
【学位授予单位】：武汉工程大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：O657.3
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-11
• 第一章 绪论11-27
• 1.1 引言11
• 1.2 常见荧光探针11-23
• 1.2.1 罗丹明类荧光探针11-13
• 1.2.2 荧光素类荧光探针13-15
• 1.2.3 香豆素类荧光探针15-16
• 1.2.4 萘酰亚胺类荧光探针16-18
• 1.2.5 喹啉类荧光探针18-20
• 1.2.6 BODIPY类荧光探针20-21
• 1.2.7 其他类荧光探针21-23
• 1.3 巯基及其荧光探针概述23-26
• 1.4 立题依据及本文研究内容26-27
• 第二章 5-（2，，4-二硝基苯磺酰胺）8羟基喹啉巯基荧光探针的研究27-39
• 2.1 前言27
• 2.2 实验部分27-30
• 2.2.1 实验药品及仪器27-28
• 2.2.2 H1合成28-29
• 2.2.3 溶液配制29
• 2.2.4 H1与半胱氨酸的反应29
• 2.2.5 H1的细胞毒性实验29-30
• 2.2.6 H1的细胞成像实验30
• 2.3 结果与分析30-36
• 2.3.1 H1红外光谱图30
• 2.3.2 H1质谱图30-31
• 2.3.3 H1的氢核磁共振图31-32
• 2.3.4 荧光结果分析32-36
• 2.4 干扰测试36-37
• 2.5 细胞毒性实验37-38
• 2.6 细胞成像38
• 2.7 小结38-39
• 第三章 5-（亚胺醛基）8羟基喹啉巯基荧光探针的研究39-47
• 3.1 前言39
• 3.2 实验部分39-40
• 3.2.1 实验药品与仪器39
• 3.2.2 H2的制备39-40
• 3.2.3 溶液的配置40
• 3.2.4 荧光分析测定40
• 3.2.5 细胞实验40
• 3.3 结果与讨论40-45
• 3.3.1 H2结构表征40-41
• 3.3.2 H2与Cys反应前后的光谱变化41-42
• 3.3.3 pH对H2与Cys反应的影响42
• 3.3.4 温度和时间对H2与Cys反应的影响42-43
• 3.3.5 H2对巯基化合物的选择性43
• 3.3.6 工作曲线的测定43-44
• 3.3.7 干扰测试44-45
• 3.4 细胞实验45-46
• 3.5 小结46-47
• 第四章 5-（对二甲氨基苯甲胺）8羟基喹啉巯基荧光探针的研究47-63
• 4.1 前言47
• 4.2 实验部分47-49
• 4.2.1 实验药品及仪器47
• 4.2.2 5-（对二甲氨基苯甲胺）8羟基喹啉H3的合成47-48
• 4.2.3 溶液的配置48
• 4.2.4 pH对H3的荧光性能的影响48
• 4.2.5 H3对金属离子的荧光响应48
• 4.2.6 H3-Cd~(2+)络合物对GSH的测定48-49
• 4.3 结果与分析49-61
• 4.3.1 H3的谱图分析49-50
• 4.3.2 H3用于比率检测型pH值50-52
• 4.3.3 对金属离子选择性测定52-57
• 4.3.4 巯基化合物与探针/金属络合物反应57-61
• 4.4 小结61-63
• 结论及展望63-65
• 参考文献65-71
• 攻读硕士学位期间发表论文情况71-73
• 攻读硕士学位期间的工作所受到资助科研项目73-75
• 致谢75

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 杨志广;李运林;刘增臣;田丰收;彭鹏;;有机巯基小分子生物荧光探针研究进展[J];分析试验室;2015年11期

2 王红萍;崔爱军;田茂忠;彭孝军;;氟硼荧(BODIPY)染料的研究进展[J];当代化工;2007年02期

3 罗先金,黄德音,宋健,程侣柏;新型香豆素荧光染料的合成及应用[J];中国科学(B辑 化学);2001年06期

本文编号：879384