多糖功能化氧化石墨烯作为CpG ODN载体的研究

发布时间：2020-12-01 16:27

　　人工合成的含有胞嘧啶（cytosine,C）和鸟嘌呤（guanine,G）的寡脱氧核苷酸（CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN）具有与细菌DNA相似的免疫刺激作用,可激活先天性和适应性免疫应答。因此,CpG ODN在抗感染、过敏治疗、疫苗和肿瘤治疗等方面具有广阔的应用。然而,未经修饰的CpG ODN易被核酸酶降解,同时其细胞摄取率较低,这大大限制了其应用。在本研究中,我们利用氧化石墨烯（Graphene oxide,GO）作为纳米载体,分别使用壳聚糖（Chitosan,CS）和酵母β-葡聚糖（yeastβ-glucan）两种多糖对其进行表面功能化修饰,在研究了多糖功能化氧化石墨烯的结构性质后,分别利用这两种纳米复合物作为CpG ODN的递送载体,并研究了载药复合物进入RAW264.7细胞的效率及其体外免疫刺激活性。实验结果表明,与氧化石墨烯相比,壳聚糖修饰后的氧化石墨烯具有更小的尺寸、带正电的表面性质以及良好的生物相容性。壳聚糖功能化还可以明显减少氧化石墨烯对非特异性蛋白质的吸附,提高了材料应用的安全性。而且,GO-CS复合物能够更显著地激活巨噬细胞RAW2... 

【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 CpG ODN
        1.1.1 CpG ODN免疫效应的机制及其免疫活性
        1.1.2 CpG ODN的应用
        1.1.3 CpG ODN应用面临的问题及解决策略
        1.1.4 基于纳米材料的CpG ODN递送系统
    1.2 氧化石墨烯
    1.3 壳聚糖
    1.4 酵母 β-葡聚糖
    1.5 本论文的研究意义及主要研究内容
        1.5.1 本论文的研究意义
        1.5.2 本论文的主要研究内容
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料和方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验仪器及测试设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 GO-CS的制备
        2.2.2 GO-β-glucan的制备
        2.2.3 表征方法
        2.2.4 蛋白吸附实验
        2.2.5 细胞培养
        2.2.6 细胞毒性和增殖实验
        2.2.7 CpG ODN的装载
        2.2.8 细胞摄取和胞内定位
        2.2.9 细胞因子的检测
第三章 结果与讨论
    3.1 壳聚糖功能化的氧化石墨烯作为潜在的免疫佐剂
        3.1.1 GO-CS纳米复合物的表征
        3.1.2 GO-CS纳米复合物的蛋白吸附特性
        3.1.3 GO-CS纳米复合物的生物相容性研究
        3.1.4 GO-CS纳米复合物的免疫激活效应
    3.2 壳聚糖功能化的氧化石墨烯用于CpG ODN的递送
        3.2.1 CpG ODN的装载
        3.2.2 GO-CS/CpG ODN的细胞摄入
        3.2.3 GO-CS/CpG ODN的胞内定位
        3.2.4 CpG ODN复合物的免疫刺激作用
    3.3 酵母 β-葡聚糖功能化的氧化石墨烯用于CpG ODN的靶向递送
        3.3.1 酵母 β-葡聚糖的预处理
        3.3.2 GO-β-glucan纳米复合物的表征
        3.3.3 GO-β-glucan纳米复合物的蛋白吸附特性
        3.3.4 GO-β-glucan纳米复合物的生物相容性研究
        3.3.5 GO-β-glucan/CpG ODN的细胞摄入
        3.3.6 CpG ODN复合物的免疫刺激作用
主要结论与展望
    主要结论
    展望
致谢
参考文献
附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文



本文编号：2894928