枯草芽孢杆菌产酱香相关基因的筛选及功能研究
发布时间：2021-12-02 04:19
枯草芽孢杆菌在环境中分布广泛,主要应用于食品、农业及环保等领域。作为酱香功能菌株生产的产品如酱油、豆酱、豆豉、白酒等酱香类食品都深受消费者们的喜爱,迄今为止,枯草芽孢杆菌产酱香的机制仍然不清。通过对工业生产菌株B.subtilis BJ3-2进行中高温（45℃）和中温（37℃）的转录组进行测序,对其差异性进行了富集分析,筛选得到多个基因,最后通过生物信息学分析筛选得到3个基因可能与酱香相关,对其敲除后进行酱香功能研究。取得的结果如下:1、通过前期转录组数据,对其表达量分析、差异基因的GO分析KEGG注释和富集分析,控制筛选条件Fold-change≧2与FDR≦0.05,在45℃高表达的基因,初步筛选出15个差异显著基因,对其进行综合分析,获得出3个产酱香候选基因,cdoA（半胱氨酸双加氧酶）、panE（酮泛解酸还原酶）、lspA（脂蛋白信号肽酶Ⅱ）。2、荧光定量PCR对B.subtilis BJ3-2在37℃和45℃培养条件下的3个候选基因cdoA、panE、lspA的表达量进行检测,以16S rRNA作为内参基因。结果显示,cdoA、panE和lspA在45℃比37℃的表达量分别增...
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
pUC18+HLarm+cat+HRarm构建示意图
3、通过限制性内切酶(Sal I和Pst I)将从Bacilus subtilis BJ3-2基因组中HRarm和pUC18+HLarm+cat酶切后,连接并转化到大肠杆菌DH5α,提取得到质粒pUC18+HLarm+cat+HRarm。如图2.2所示(利用软件SnapGene 5.0.8制作)。lspA双交换载体的构建:
3、通过限制性内切酶(Pst I和Hind III)将从Bacilus subtilis BJ3-2基因组中扩增HRarm和pUC18+HLarm+cat酶切后,连接并转化到大肠杆菌DH5α,提取得到质粒pUC18+HLarm+cat+HRarm。如图2.3所示(利用软件SnapGene 5.0.8制作)。2.2.6.2 PCR扩增引物
【参考文献】：
期刊论文
[1]采用GC×GC-TOF-MS分析酱香型白酒缺陷酒挥发性风味物质[J]. 杨亮,何珺珺,罗楚翔,张春林. 中国酿造. 2019(08)
[2]长期贮存的某酱香型白酒风味物质成分变化分析[J]. 江津津,李永馨,李崇高,彭述辉,陈松. 广州城市职业学院学报. 2019(01)
[3]永川毛霉型豆豉在发酵过程中菌群动态变化规律[J]. 曾涛,罗沈斌,索化夷. 中国调味品. 2019(03)
[4]细菌脂蛋白生物合成调控研究进展[J]. 贾雨晴,夏杰,张文轩,闻刚,冯波,连旭,薛文杰,吴松. 中国抗生素杂志. 2019(02)
[5]海天酱油中的挥发性风味物质研究[J]. 王栋,钱存卫,陈选荣,任芳芳. 广东化工. 2019(04)
[6]酱油酿造过程中风味物质的形成与鉴定[J]. 李杨,李明达,刘军,马军,李成辉,王中江,江连洲. 食品工业科技. 2019(04)
[7]革兰氏阳性菌脂蛋白的研究进展[J]. 吴小芳,刘家亨,熊慧,乔建军,朱宏吉. 中国生物工程杂志. 2018(06)
[8]传统发酵豆制品生产过程中的安全隐患及改进措施[J]. 程教擘,谢艳华,刘金,陈力力,蒋立文. 食品安全质量检测学报. 2017(08)
[9]豆豉营养成分及研究进展[J]. 李洋. 食品安全导刊. 2017(18)
[10]高温大曲中两株产酱香菌的分离鉴定[J]. 鲁珍,有小娟,李恩中,彭康康,张建设. 河南科学. 2016(05)
博士论文
[1]基于转座子突变技术的毕赤酵母必须基因鉴定和功能基因筛选[D]. 朱锦祥.华东理工大学 2018
[2]白酒中四甲基吡嗪全程代谢机理研究[D]. 吴建峰.江南大学 2013
[3]基于EST数据库和转录组测序的茶树DNA分子标记开发与应用研究[D]. 王丽鸳.中国农业科学院 2011
[4]曲霉型豆豉发酵机理及其功能性的研究[D]. 张建华.中国农业大学 2003
硕士论文
[1]猪源化脓隐秘杆菌强、弱毒株全基因组测序及HSP100/Clp基因转录水平差异分析[D]. 田佳琪.吉林农业大学 2019
[2]乳酸乳球菌LspA对NisI成熟及nisin产量影响的研究[D]. 吴小芳.天津大学 2018
[3]基因组重测序基础上的早实枳与普通枳部分差异基因比较分析[D]. 王蒙召.华中农业大学 2016
[4]曲霉型豆豉的发酵条件及挥发性成分的研究[D]. 林晓华.南昌大学 2013
[5]海藻糖合酶基因（AE015451.1）在枯草芽孢杆菌中的表达[D]. 王建彬.齐鲁工业大学 2013
[6]混菌型豆豉发酵及风味物质的研究[D]. 李慧.大连工业大学 2009
本文编号：3527715
【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校
【文章页数】：106 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
pUC18+HLarm+cat+HRarm构建示意图
3、通过限制性内切酶(Sal I和Pst I)将从Bacilus subtilis BJ3-2基因组中HRarm和pUC18+HLarm+cat酶切后,连接并转化到大肠杆菌DH5α,提取得到质粒pUC18+HLarm+cat+HRarm。如图2.2所示(利用软件SnapGene 5.0.8制作)。lspA双交换载体的构建:
3、通过限制性内切酶(Pst I和Hind III)将从Bacilus subtilis BJ3-2基因组中扩增HRarm和pUC18+HLarm+cat酶切后,连接并转化到大肠杆菌DH5α,提取得到质粒pUC18+HLarm+cat+HRarm。如图2.3所示(利用软件SnapGene 5.0.8制作)。2.2.6.2 PCR扩增引物
【参考文献】：
期刊论文
[1]采用GC×GC-TOF-MS分析酱香型白酒缺陷酒挥发性风味物质[J]. 杨亮,何珺珺,罗楚翔,张春林. 中国酿造. 2019(08)
[2]长期贮存的某酱香型白酒风味物质成分变化分析[J]. 江津津,李永馨,李崇高,彭述辉,陈松. 广州城市职业学院学报. 2019(01)
[3]永川毛霉型豆豉在发酵过程中菌群动态变化规律[J]. 曾涛,罗沈斌,索化夷. 中国调味品. 2019(03)
[4]细菌脂蛋白生物合成调控研究进展[J]. 贾雨晴,夏杰,张文轩,闻刚,冯波,连旭,薛文杰,吴松. 中国抗生素杂志. 2019(02)
[5]海天酱油中的挥发性风味物质研究[J]. 王栋,钱存卫,陈选荣,任芳芳. 广东化工. 2019(04)
[6]酱油酿造过程中风味物质的形成与鉴定[J]. 李杨,李明达,刘军,马军,李成辉,王中江,江连洲. 食品工业科技. 2019(04)
[7]革兰氏阳性菌脂蛋白的研究进展[J]. 吴小芳,刘家亨,熊慧,乔建军,朱宏吉. 中国生物工程杂志. 2018(06)
[8]传统发酵豆制品生产过程中的安全隐患及改进措施[J]. 程教擘,谢艳华,刘金,陈力力,蒋立文. 食品安全质量检测学报. 2017(08)
[9]豆豉营养成分及研究进展[J]. 李洋. 食品安全导刊. 2017(18)
[10]高温大曲中两株产酱香菌的分离鉴定[J]. 鲁珍,有小娟,李恩中,彭康康,张建设. 河南科学. 2016(05)
博士论文
[1]基于转座子突变技术的毕赤酵母必须基因鉴定和功能基因筛选[D]. 朱锦祥.华东理工大学 2018
[2]白酒中四甲基吡嗪全程代谢机理研究[D]. 吴建峰.江南大学 2013
[3]基于EST数据库和转录组测序的茶树DNA分子标记开发与应用研究[D]. 王丽鸳.中国农业科学院 2011
[4]曲霉型豆豉发酵机理及其功能性的研究[D]. 张建华.中国农业大学 2003
硕士论文
[1]猪源化脓隐秘杆菌强、弱毒株全基因组测序及HSP100/Clp基因转录水平差异分析[D]. 田佳琪.吉林农业大学 2019
[2]乳酸乳球菌LspA对NisI成熟及nisin产量影响的研究[D]. 吴小芳.天津大学 2018
[3]基因组重测序基础上的早实枳与普通枳部分差异基因比较分析[D]. 王蒙召.华中农业大学 2016
[4]曲霉型豆豉的发酵条件及挥发性成分的研究[D]. 林晓华.南昌大学 2013
[5]海藻糖合酶基因（AE015451.1）在枯草芽孢杆菌中的表达[D]. 王建彬.齐鲁工业大学 2013
[6]混菌型豆豉发酵及风味物质的研究[D]. 李慧.大连工业大学 2009
本文编号：3527715
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