炎症微环境下骨髓间充质干细胞骨向分化中Periostin基因表达研究

发布时间：2021-12-02 08:05

　　目的:探讨炎症微环境对Wistar大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）成骨分化Periostin基因表达的影响。方法:采用全骨髓贴壁法分离和培养rBMSCs,取第3代rBMSCs成骨、成脂分化诱导;10μg/L TNF-α作用于rBMSCs模拟炎症微环境,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,qRT-PCR检测IL-1β及TNF-α的基因表达。将第3代rBMSCs分成对照组（OM）、炎症组（OM+TNF-α）进行成骨诱导,茜素红染色及钙离子沉积量检测,在成骨诱导的第7、14天采用qRT-PCR检测细胞中Periostin和Runx2的基因表达水平,Western blot检测Periostin蛋白表达量。结果:全骨髓贴壁法成功分离培养rBMSCs;炎症组细胞TNF-α及IL-1β的基因表达水平分别是对照组的1.8倍（P<0.05）、2.1倍（P<0.01）;炎症组较对照组成骨能力下降,相关成骨基因表达量降低;成骨诱导后炎症组的Periostin基因及蛋白表达水平较对照组明显降低（P<0.05）。结论:炎症微环境下诱导rBMSCs成骨分化Periostin基因表达水平下降,... 

【文章来源】：口腔医学研究. 2020,36(12)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

倒置显微镜观察大鼠BMSCs及成骨成脂分化(×40)

CCK-8检测结果(图2)显示,从第3天起两组细胞出现差异,均在第5天细胞增殖活性降低,开始进入平台期。炎症刺激组细胞增殖能力较正常对照组弱(P<0.05)。qRT-PCR结果显示实验组TNF- α基因表达水平是对照组的1.8倍(P<0.05),IL-1β基因表达水平是对照组的2.1倍(P<0.01),见图3。2.3 茜素红染色

茜素红染色结果见图4。钙离子沉积量的半定量分析显示,炎症组(图4b)细胞矿化结节较对照组(图4a)明显减少,差异有统计学意义(对照组、炎症组的A值分别为0.380±0.002、0.310±0.003,t=14.8,P<0.001。图4 茜素红染色大体观

【参考文献】：
期刊论文
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[2]Periostin在牙周膜作用的研究进展[J]. 丁瑞霞,王慧明.  口腔医学研究. 2019(07)
[3]慢性牙周炎中肿瘤坏死因子ɑ对骨髓间充质干细胞成骨分化的调控作用[J]. 李晓光,王一珠,郭斌.  华西口腔医学杂志. 2017(03)
[4]直流电场对炎症微环境下的rBMSCs成骨的影响[J]. 韩巍,王潇宇,高羽萱,刘娜,张维,李鸿波.  口腔颌面修复学杂志. 2017(02)
[5]炎性环境下牙周膜、骨髓间充质干细胞骨向分化差异性的研究[J]. 张静,陈彬,段银钟,孟箭.  口腔医学研究. 2014(10)



本文编号：3528044