日本囊对虾中的一种新型白斑综合征病毒诱导基因的表达和研究
发布时间:2022-01-02 22:55
在过去的几十年里,对虾养殖业作为渔业生产中最经济商品之一,世界范围内涌现了养虾热。然而随着对虾养殖业的迅速发展,病害问题已经成为一个关键性风险因素。日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)是亚洲重要的对虾养殖品种,曾经为养殖业者带来很好的经济效益。自从90年代各种虾病的爆发以来,日本囊对虾也深受其害。其中病毒性“白斑病”是危害最严重的一种疾病,其病原体为白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,简称WSSV)。WSSV是一种病毒科(Nimaviridae),白斑病毒属(Whispovirus),具有囊膜的双链DNA棒状病毒,其致病能力强,传播范围广,给世界对虾养殖业造成了巨大的经济损失,而且令人担忧的是至今仍无有效的防治方法。此外,“黄头病”也是一种严重危害虾类的疾病,其病原体是黄头病毒(yellow head virus,简称YHV),属于Roniviridae家族中的杆状形状的,有包膜的正向单链RNA病毒,据报道到目前还没有任何药物或化学物质能够控制这种病毒。本文中也将稍作提及另外一种造成严重虾病的是急性肝胰脏坏死综合征,致病原是副溶血弧...
【文章来源】:上海海洋大学上海市
【文章页数】:61 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
1.1 虾类养殖状况及病害的研究进展
1.2 虾类免疫系统的研究进展
1.3 虾类血细胞的分类及重要意义
1.4 虾类白斑病诱导及免疫应答基因的研究进展
1.4.1 WSSV先在虾体的血细胞里大量增殖
1.4.2 WSSV的感染宿主和传播途径
1.4.3 对虾针对WSSV产生的类免疫反应
1.4.4 WSSV感染与细胞凋亡
1.4.5 针对WSSV的防御措施与研究
1.5 本研究的目的与意义
第二章 材料与方法
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 实验用虾
2.2.2 克隆和蛋白表达用的质粒菌种
2.2.3 感染试验所用的病毒和弧菌菌种
2.2.4 各类试剂及抗体
2.3 实验仪器及材料
2.4 实验步骤与方法
2.4.1 基因克隆和mRNA水平差异表达
2.4.2 重组蛋白的构建和兔克隆多抗的制备
2.4.3 SDS-PAGE和Western blot
2.4.4 免疫荧光定位
2.4.5 流式细胞仪使用和分析
2.4.6 病毒和细菌感染实验
2.4.7 RNA干扰
第三章 结果
3.1 MjVIG1的基因序列分析
3.2 MjVIG1基因在不同组织中的mRNA表达
3.3 SDS-PAGE和Western blot结果
3.4 经WSSV感染后的MjVIG1mRNA水平的差异表达
3.5 免疫荧光标记结果
3.6 流式细胞仪分析结果
3.7 经YHV和VP(D6)感染后MjVIG1 的mRNA水平的差异表达
3.8 敲降MjVIG1基因后诱导的基因表达变化
第四章 讨论与展望
参考文献
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]中国对虾对白斑综合征病毒的类免疫反应与验证[J]. 李战军,孟宪红,孔杰,单从文,罗坤,栾生,常亚青. 中国水产科学. 2012(06)
[2]白斑综合征病毒感染与对虾的免疫防御反应[J]. 宋晓玲,黄倢,王秀华,杨冰. 中国水产科学. 2006(06)
[3]对虾的免疫机制及其疾病预防策略的研究[J]. 魏克强,许梓荣. 中国兽药杂志. 2004(09)
[4]白斑症病毒在日本对虾体内的感染增殖[J]. 战文斌,王远红,铃木信一,俞开康,福田颖穗. 水产学报. 1999(03)
[5]用聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测无包埋体对虾病毒[J]. 朱山,郭福生,涂小林,陆承平,吴时友. 南京农业大学学报. 1998(02)
本文编号:3565043
【文章来源】:上海海洋大学上海市
【文章页数】:61 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
1.1 虾类养殖状况及病害的研究进展
1.2 虾类免疫系统的研究进展
1.3 虾类血细胞的分类及重要意义
1.4 虾类白斑病诱导及免疫应答基因的研究进展
1.4.1 WSSV先在虾体的血细胞里大量增殖
1.4.2 WSSV的感染宿主和传播途径
1.4.3 对虾针对WSSV产生的类免疫反应
1.4.4 WSSV感染与细胞凋亡
1.4.5 针对WSSV的防御措施与研究
1.5 本研究的目的与意义
第二章 材料与方法
2.1 引言
2.2 实验材料
2.2.1 实验用虾
2.2.2 克隆和蛋白表达用的质粒菌种
2.2.3 感染试验所用的病毒和弧菌菌种
2.2.4 各类试剂及抗体
2.3 实验仪器及材料
2.4 实验步骤与方法
2.4.1 基因克隆和mRNA水平差异表达
2.4.2 重组蛋白的构建和兔克隆多抗的制备
2.4.3 SDS-PAGE和Western blot
2.4.4 免疫荧光定位
2.4.5 流式细胞仪使用和分析
2.4.6 病毒和细菌感染实验
2.4.7 RNA干扰
第三章 结果
3.1 MjVIG1的基因序列分析
3.2 MjVIG1基因在不同组织中的mRNA表达
3.3 SDS-PAGE和Western blot结果
3.4 经WSSV感染后的MjVIG1mRNA水平的差异表达
3.5 免疫荧光标记结果
3.6 流式细胞仪分析结果
3.7 经YHV和VP(D6)感染后MjVIG1 的mRNA水平的差异表达
3.8 敲降MjVIG1基因后诱导的基因表达变化
第四章 讨论与展望
参考文献
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]中国对虾对白斑综合征病毒的类免疫反应与验证[J]. 李战军,孟宪红,孔杰,单从文,罗坤,栾生,常亚青. 中国水产科学. 2012(06)
[2]白斑综合征病毒感染与对虾的免疫防御反应[J]. 宋晓玲,黄倢,王秀华,杨冰. 中国水产科学. 2006(06)
[3]对虾的免疫机制及其疾病预防策略的研究[J]. 魏克强,许梓荣. 中国兽药杂志. 2004(09)
[4]白斑症病毒在日本对虾体内的感染增殖[J]. 战文斌,王远红,铃木信一,俞开康,福田颖穗. 水产学报. 1999(03)
[5]用聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测无包埋体对虾病毒[J]. 朱山,郭福生,涂小林,陆承平,吴时友. 南京农业大学学报. 1998(02)
本文编号:3565043
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